發(fā)布時間：2017-04-24 23:16

  本文關鍵詞：xCT調節(jié)肝癌細胞轉移的作用機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 肝癌是世界范圍內最常見的10種惡性腫瘤之一,在我國肝癌是死亡率僅次于胰腺癌的第二大常見惡性腫瘤,肝癌初期癥狀不明顯,晚期主要表現為肝痛、腹水、乏力、消瘦等癥狀。由于肝癌早期不易發(fā)現,晚期患者癌細胞易擴散,所以臨床上一般采用的放化療、外科手術與肝移植等手段治愈率較低,因此對于肝癌細胞轉移機制的研究顯得尤為重要,然而目前對于肝癌細胞轉移的機制還不清楚。近期研究發(fā)現,很多腫瘤細胞中xCT的表達明顯升高,xCT是Xc-氨基酸轉運系統(tǒng)的功能性亞基,對于維持細胞內GSH(谷胱甘肽)的含量和細胞的氧化還原狀態(tài)起著重要的作用。近年來,研究發(fā)現xCT與多種癌癥的發(fā)生發(fā)展及轉移有著密切的關系,但其與肝細胞癌的轉移的關系尚未報道,因此本研究主要探討人類肝細胞癌中xCT的表達對腫瘤細胞轉移的影響及其機制。 研究方法： 用逆轉錄PCR檢測不同轉移能力的人乳腺癌、人肝癌和小鼠黑色素瘤細胞中xCT的表達水平,分析xCT的表達與三種癌細胞轉移能力的關系；用xCT特異性抑制劑SASP處理高轉移肝癌細胞,Western Blot和RT-PCR方法檢測自噬標志物以及EMT過程相關標志物的表達水平,并用傷口愈合實驗和Transwell檢測xCT的活性與肝癌細胞轉移能力的關系；將xCT抑制劑SASP分別與自體吞噬(自噬)抑制劑3-MA和還原劑B-ME聯合用藥處理細胞,抑制自噬的發(fā)生,進一步分析xCT的活性與自噬及EMT的關系。 結果： 第一部分： 1.人肝癌細胞與小鼠黑色素瘤細胞中xCT的表達水平高于人正常肝細胞與小鼠黑色素細胞中xCT的表達水平。 2.人高轉移肝癌細胞、乳腺癌細胞和小鼠高轉移黑色素瘤細胞中xCT的表達水平分別高于人低轉移肝癌細胞和小鼠低轉移黑色素瘤細胞中xCT的表達水平。 3.抑制高轉移癌細胞中xCT的活性后,癌細胞的轉移能力降低。 第二部分： 1.利用xCT的特異性抑制劑SASP處理人高轉移肝癌細胞97H,可以降低細胞的轉移能力。 2.用SASP處理97H細胞使xCT活性降低,能夠誘導其發(fā)生自噬。 3.肝癌細胞97H的自噬過程伴隨Snail的降解,并抑制細胞發(fā)生EMT過程。 4.在肝癌細胞97H中,通過抑制自噬的發(fā)生,可以減少Snail的降解以及減弱對EMT過程的抑制。 結論： 1.xCT在人乳腺癌、人肝癌和小鼠黑色素瘤細胞中的表達上調,而且與腫瘤細胞轉移能力呈正相關。 2.xCT通過調節(jié)人類高轉移肝癌細胞97H發(fā)生自噬,降解細胞中的轉錄因子Snail,從而減弱EMT過程的發(fā)生并降低人類高轉移肝癌細胞的轉移能力。
【關鍵詞】：xCT 肝癌細胞 自噬 上皮間質化 轉移
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R735.7;R730.44
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-10
• 縮略語10-11
• 前言11-14
• 研究現狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 一、xCT與癌細胞遷移能力的關系14-27
• 1.1 對象和方法14-20
• 1.1.1 實驗對象14
• 1.1.2 實驗儀器及試劑14-17
• 1.1.3 實驗方法17-20
• 1.2 結果20-24
• 1.2.1 xCT在正常細胞與癌細胞中的表達20-21
• 1.2.2 xCT在不同轉移能力的癌細胞中的表達21-22
• 1.2.3 抑制xCT的活性可以抑制高轉移潛能癌細胞的遷移22-24
• 1.3 討論24-26
• 1.4 小結26-27
• 二、xCT調節(jié)肝癌細胞轉移的作用機制研究27-46
• 2.1 對象和方法27-35
• 2.1.1 實驗對象27
• 2.1.2 實驗儀器及試劑27-30
• 2.1.3 實驗方法30-35
• 2.2 結果35-41
• 2.2.1 xCT的表達與不同轉移能力肝癌細胞的關系35
• 2.2.2 抑制xCT的活性可以抑制肝癌細胞97H的遷移和侵襲35-37
• 2.2.4 抑制xCT的活性可使肝癌細胞97H發(fā)生自噬37-38
• 2.2.5 抑制自噬的發(fā)生可以降低Snail的分解38-39
• 2.2.6 xCT通過自噬調節(jié)肝癌細胞97H遷移和侵襲39-41
• 2.3 討論41-45
• 2.4 小結45-46
• 結論46-47
• 參考文獻47-52
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明52-53
• 綜述 ROS調控自噬的發(fā)生53-69
• 綜述參考文獻63-69
• 致謝69

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 曹景利;朱學良;;上皮細胞極性的建立和維持[J];中國細胞生物學學報;2010年02期

  本文關鍵詞：xCT調節(jié)肝癌細胞轉移的作用機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：325177