本文關(guān)鍵詞：xCT調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 肝癌是世界范圍內(nèi)最常見(jiàn)的10種惡性腫瘤之一,在我國(guó)肝癌是死亡率僅次于胰腺癌的第二大常見(jiàn)惡性腫瘤,肝癌初期癥狀不明顯,晚期主要表現(xiàn)為肝痛、腹水、乏力、消瘦等癥狀。由于肝癌早期不易發(fā)現(xiàn),晚期患者癌細(xì)胞易擴(kuò)散,所以臨床上一般采用的放化療、外科手術(shù)與肝移植等手段治愈率較低,因此對(duì)于肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究顯得尤為重要,然而目前對(duì)于肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的機(jī)制還不清楚。近期研究發(fā)現(xiàn),很多腫瘤細(xì)胞中xCT的表達(dá)明顯升高,xCT是Xc-氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的功能性亞基,對(duì)于維持細(xì)胞內(nèi)GSH(谷胱甘肽)的含量和細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)起著重要的作用。近年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)xCT與多種癌癥的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系,但其與肝細(xì)胞癌的轉(zhuǎn)移的關(guān)系尚未報(bào)道,因此本研究主要探討人類(lèi)肝細(xì)胞癌中xCT的表達(dá)對(duì)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制。 研究方法： 用逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)不同轉(zhuǎn)移能力的人乳腺癌、人肝癌和小鼠黑色素瘤細(xì)胞中xCT的表達(dá)水平,分析xCT的表達(dá)與三種癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系；用xCT特異性抑制劑SASP處理高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞,Western Blot和RT-PCR方法檢測(cè)自噬標(biāo)志物以及EMT過(guò)程相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)水平,并用傷口愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell檢測(cè)xCT的活性與肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系；將xCT抑制劑SASP分別與自體吞噬(自噬)抑制劑3-MA和還原劑B-ME聯(lián)合用藥處理細(xì)胞,抑制自噬的發(fā)生,進(jìn)一步分析xCT的活性與自噬及EMT的關(guān)系。 結(jié)果： 第一部分： 1.人肝癌細(xì)胞與小鼠黑色素瘤細(xì)胞中xCT的表達(dá)水平高于人正常肝細(xì)胞與小鼠黑色素細(xì)胞中xCT的表達(dá)水平。 2.人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞和小鼠高轉(zhuǎn)移黑色素瘤細(xì)胞中xCT的表達(dá)水平分別高于人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞和小鼠低轉(zhuǎn)移黑色素瘤細(xì)胞中xCT的表達(dá)水平。 3.抑制高轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞中xCT的活性后,癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力降低。 第二部分： 1.利用xCT的特異性抑制劑SASP處理人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞97H,可以降低細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。 2.用SASP處理97H細(xì)胞使xCT活性降低,能夠誘導(dǎo)其發(fā)生自噬。 3.肝癌細(xì)胞97H的自噬過(guò)程伴隨Snail的降解,并抑制細(xì)胞發(fā)生EMT過(guò)程。 4.在肝癌細(xì)胞97H中,通過(guò)抑制自噬的發(fā)生,可以減少Snail的降解以及減弱對(duì)EMT過(guò)程的抑制。 結(jié)論： 1.xCT在人乳腺癌、人肝癌和小鼠黑色素瘤細(xì)胞中的表達(dá)上調(diào),而且與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。 2.xCT通過(guò)調(diào)節(jié)人類(lèi)高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞97H發(fā)生自噬,降解細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子Snail,從而減弱EMT過(guò)程的發(fā)生并降低人類(lèi)高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。
【關(guān)鍵詞】：xCT 肝癌細(xì)胞 自噬 上皮間質(zhì)化 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7;R730.44
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 目錄8-10
• 縮略語(yǔ)10-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 一、xCT與癌細(xì)胞遷移能力的關(guān)系14-27
• 1.1 對(duì)象和方法14-20
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象14
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑14-17
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法17-20
• 1.2 結(jié)果20-24
• 1.2.1 xCT在正常細(xì)胞與癌細(xì)胞中的表達(dá)20-21
• 1.2.2 xCT在不同轉(zhuǎn)移能力的癌細(xì)胞中的表達(dá)21-22
• 1.2.3 抑制xCT的活性可以抑制高轉(zhuǎn)移潛能癌細(xì)胞的遷移22-24
• 1.3 討論24-26
• 1.4 小結(jié)26-27
• 二、xCT調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究27-46
• 2.1 對(duì)象和方法27-35
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象27
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑27-30
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法30-35
• 2.2 結(jié)果35-41
• 2.2.1 xCT的表達(dá)與不同轉(zhuǎn)移能力肝癌細(xì)胞的關(guān)系35
• 2.2.2 抑制xCT的活性可以抑制肝癌細(xì)胞97H的遷移和侵襲35-37
• 2.2.4 抑制xCT的活性可使肝癌細(xì)胞97H發(fā)生自噬37-38
• 2.2.5 抑制自噬的發(fā)生可以降低Snail的分解38-39
• 2.2.6 xCT通過(guò)自噬調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞97H遷移和侵襲39-41
• 2.3 討論41-45
• 2.4 小結(jié)45-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明52-53
• 綜述 ROS調(diào)控自噬的發(fā)生53-69
• 綜述參考文獻(xiàn)63-69
• 致謝69

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 曹景利;朱學(xué)良;;上皮細(xì)胞極性的建立和維持[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2010年02期

  本文關(guān)鍵詞：xCT調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：325177