前言 肝纖維化是肝內纖維結締組織的異常增生與沉積，是各種慢性肝病向肝硬化發(fā)展的必經階段。肝纖維化的早期診斷及嚴重程度判定在慢性肝病的早期治療和預后判斷中有重要意義。 各種影像方法在基于肝纖維化的形態(tài)學研究中始終未發(fā)現比較敏感和特異的指標。近年來各種MR功能成像方法的出現為肝纖維化的診斷帶來了曙光，其中的MR彌散加權成像(diffusion-weighted imaging，DWI)和~1H磁共振波譜(~1H magnetic resonance spectroscopy，~1H-MRS)技術分別通過檢測組織內微觀水分子的運動狀態(tài)和含~1H代謝物的波譜組成與含量變化，對肝纖維化形態(tài)學改變出現之前分子水平的結構變化和代謝、功能改變進行評價。 本研究通過對兔肝纖維化模型進行血液生化學、DWI和活體~1H-MRS檢查，探討肝纖維化時三者的變化規(guī)律；通過與肝臟組織病理和超微結構改變進行對照分析，對DWI和~1H-MRS結果作出更深入合理的解釋；通過評價三種檢查方法在肝纖維化中的診斷效能并對三者之間關系進行分析，以便對無創(chuàng)性評價肝纖維化的方法作出合理選擇和應用，提高肝纖維化的診斷水平。 材料和方法 健康新西蘭大白兔45只，隨機分為6組：1組為對照組，5只；2、3、4、5、6組為實驗組，每組8只。對照組每周一次腹腔注射生理鹽水(0.1ml／kg)，實驗組每周一次腹腔注射四氯化碳(0.1ml／kg)。分別在給藥第8、12、16、20、24周周末選對照組1只兔及2、3、4、5、6組兔行MR檢查。 MR檢查前兔耳緣靜脈取血制備血清，統一進行血清學肝纖維化指標檢測，包括透明質酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)和層粘連蛋白(LN)。比較不同纖維化分期時各指標變化規(guī)律，分析血清學各指標間及與肝纖維化分期的相關性。 MR設備應用GE Signa Twinspeed 1.5T磁共振儀，膝關節(jié)線圈。DWI采用SE-EPI序列，b值分別取300、600、1000s／mm~2，TR／TE=3700／60.1、68.2、75.5ms(分別對應于b取300／600／1000s／mm~2)、層厚3mm、層間距1mm、矩陣128×128、視野16cm×16cm、激勵次數12。應用GE ADW4.0工作站Functool軟件進行圖像后處理，軟件自動產生ADC及EADC偽彩圖。每只兔左、右肝共選3個層面設置ROI，ROI面積＞60mm~2，并避開肝內大血管及偽影。記錄DWI圖像信號強度值(signal intensity，SI)及對應的ADC、EADC值。比較不同肝纖維化分期和炎癥活動度分級時DWI參數變化情況，分析各參數與纖維化分期和炎癥活動度分級之間的相關性。 ~1H-MRS檢查使用PROBE-SV PRESS序列：TR／TE=1500msec／35msec，NEX=8，FOV16×16cm，VOI分別置于左葉和右外葉，避開肝內大血管、肝周脂肪和氣體，VOI不小于10mm，在VOI周圍加飽和帶。其中對照組2例、實驗組隨機選擇10例在其它參數不變，僅TE改為144msec情況下，重復~1H-MRS掃描。使用GE公司波譜分析Sage軟件對波譜數據進行自動后處理，手動標記波譜圖像中不同代謝物，軟件自動得出各代謝物的峰高和波峰下面積。分析肝臟~1H-MRS波譜組成，不同TE時~1H-MRS波譜變化情況，記錄各代謝物峰高及波峰下面積，計算(代謝物／脂質)峰高與(代謝物／脂質)面積，比較肝纖維化不同分期時~1H-MRS波譜形態(tài)及參數變化，并進行相關分析。 MR掃描后立即取兔肝臟，10％甲醛固定，病理取材盡量與MR中ROI設置層面相對應，行HE、Masson和網狀纖維染色。光鏡下判定肝纖維化分期、炎癥活動程度分級。其中對照組和實驗組每組2只，處死后即刻取1×1×3mm肝組織2.5％戊二醛固定，常規(guī)電鏡切片制作，于PHILIPS CM10透射電鏡下觀察肝組織超微結構改變。 以肝纖維化病理分期S≥1為判斷陽性的標準，繪制ROC曲線，計算機處理曲線下面積(AUC)，選擇約登指數最大者作為截斷點，計算三種檢查方法各指標的靈敏度和特異度，并對各指標進行相關分析。 結果 造模期間對照組無死亡，實驗組死亡18只，共27只兔完成實驗。肝纖維化的分布為對照組：S0(n=5)，實驗組：S0(n=2)、S1(n=4)、S2(n=5)、S3(n=5)、S4(n=6)。隨給藥時間延長，實驗組肝細胞變性、壞死及炎細胞浸潤加重，肝內膠原纖維和網狀纖維數量增多、范圍擴大。電鏡觀察隨給藥時間延長肝細胞損傷加重，貯脂細胞向肌成纖維細胞演變，肝內纖維沉積增多，肝竇毛細血管化早期出現并持續(xù)存在。 一、血清學肝纖維化指標變化 各血清學指標隨纖維化分期進展逐漸升高，僅HA總體差異有統計學意義(P＜0.05)。各血清學指標間及與肝纖維化分期之間顯著正相關(P＜0.01)。 二、DWI結果 b取300、600s／mm~2時，隨纖維化分期增加，SI、EADC值依次升高，ADC值依次降低(P＜0.05)；而b取1000s／mm~2時，僅SI值在各組間差異有統計學意義(P＜0.05)。b取300、600及1000s／mm~2時，隨炎癥活動度分級增加，不同組間SI、ADC與EADC值差異存在統計學意義(P＜0.05)，SI依次升高，ADC值波浪式減低，EADC值則波浪式升高。SI、ADC與EADC值與纖維化分期和炎癥活動度分級均有很好的相關性，b=300s／mm~2時相關關系最密切。 三、~1H-MRS表現及結果分析 肝臟~1H-MRS圖像由脂質(lip)、膽堿復合物(cho)和糖原復合物(glc)3個主要的代謝物波峰組成。TE為35msec時，波譜信噪比高，基線平穩(wěn)；TE為144msec時，波譜信噪比低，基線不穩(wěn)，各代謝物峰高和峰下面積明顯下降(P＜0.01)，(cho／lip)Amp和(cho／lip)Are明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)。除S2期外，纖維化肝臟cho峰和glc峰升高，可見明顯波峰顯示，TG峰稍降低。Cho、glc、lip的峰高及峰下面積隨纖維化分期進展，變化規(guī)律不完全相同。在肝纖維化不同分期時，僅(cho／lip)Amp、(glc／lip)Amp和(cho／lip)Are顯示有差異(P＜0.05)，并與肝纖維化分期存在正相關關系(P＜0.05)。 四、血清學肝纖維化指標、DWI及~1H-MRS成像參數診斷肝纖維化的ROC曲線分析及各指標間的相關性 血清學肝纖維化指標ROC曲線的AUC依次為HA＞C-Ⅳ＞LN＞PCⅢ，將靈敏度和特異度綜合考慮，HA是最具診斷意義的指標。DWI參數ROC曲線的AUC依次為EADC1＞ADC1＞SI1＞SI2＞EADC2＞ADC2，隨b值升高，DWI各指標的診斷準確性輕度下降。~1H-MRS成像參數ROC曲線的AUC依次為(cho／lip)Amp＞(cho／lip)Are＞(glc／lip)Amp＞choAre＞choAmp，綜合考慮靈敏度和特異度，(cho／lip)Are和(cho／lip)Amp為最具診斷意義指標。 b=300s／mm~2時，SI、ADC、EADC與不同的血清學指標間均存在一定相關性；b=600s／mm~2時，僅SI與HA存在顯著正相關(P＜0.01)。C-Ⅳ與choAmp、choAre顯著正相關(P＜0.01)，LN與choAre、(cho／lipl)Are正相關(P＜0.05)。b=300s／mm~2時，ADC、EADC與choAmp、choAre分別呈負相關和正相關(P＜0.05)，b=600s／mm~2時，僅EADC與choAre正相關(P＜0.05)。 結論 1、血清學指標隨纖維化分期進展依次升高，其中HA具有定量肝纖維化嚴重程度的能力；血清學指標相互之間及與纖維化分期之間存在顯著正相關關系。 2、DWI不僅具有定量肝纖維化嚴重程度、檢測早期肝硬化及重度肝纖維化的能力，同樣具有定量肝臟炎癥活動嚴重程度和檢測重度炎癥的能力。兩種病理改變引起的DWI參數變化有其各自不同的病理學基礎。 3、不同纖維化分期時，cho、glc和lip變化規(guī)律不完全相同，可由相應的病理學改變作出解釋。(cho／lip)Amp、(glc／lipl)Amp和(cho／lip)Are三項指標具有定量肝纖維化程度、鑒別重度纖維化的能力，并與肝纖維化分期之間存在相關關系。 4、血清學肝纖維化指標、DWI和~1H-MRS參數指標在肝纖維化的診斷中均具有一定價值，但無一指標的靈敏度和特異度具佳；三種診斷方法各指標之間存在一定程度的相關關系，這種相關關系是對其共同的病理、生理基礎的一種體現。
【學位單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2007
【中圖分類】：R445.2;R575.2
【部分圖文】：

對照組HE(X100)、Masson(X40)、網狀纖維染色(X40)。圖6一s，實驗組給藥s周時HE(X100)、Masson(X100)、網狀纖維染色(X100)改變，中央靜脈周圍纖維化，肝小葉結構保留。

對照組給藥16周及實驗組給藥24周時肝臟。圖3一5，對照組 HE(X100)、Masson(X40)、網狀纖維染色(X40)。圖6一s，實驗組給藥s周時 HE(X100)、 Masson(X100)、網狀纖維染色(X100)改變，中央靜脈周圍纖維化，肝小葉結構保留。圖9~11，實驗組給藥24周時HE(X4o)、Masson(X40)、網狀纖維染色(X40)改變，正常肝小葉結構消失，肝內大量纖維增生并包繞形成假小葉，增生纖維周圍可見大量肝細胞重度水樣變及炎癥細胞浸潤。

實驗組給藥s周時HE(X100)、Masson(X100)、網狀纖維染色(X100)改變，中央靜脈周圍纖維化，肝小葉結構保留。圖9~11，實驗組給藥24周時HE(X4o)、Masson(X40)、網狀纖維染色(X40)改變，正常肝小葉結構消失，肝內大量纖維增生并包繞形成假小葉，增生纖維周圍可見大量肝細胞重度水樣變及炎癥細胞浸潤。
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 梁兆松;;莫讓胃潰瘍掩蓋了肝硬化[J];健康人生;2010年02期

2 劉紅艷;方步武;;蒿鱉養(yǎng)陰軟堅方對ConA誘導小鼠肝纖維化的預防作用[J];天津醫(yī)藥;2011年07期

3 劉士敬;;吃藥不當也可導致肝硬化[J];家庭醫(yī)學;2011年06期

4 馮建文;劉立新;張海燕;張騫騫;;膠囊滲透壓泵控釋rmIGFBPrP1對小鼠肝腎組織的影響及意義[J];臨床肝膽病雜志;2011年08期

5 劉玉蘭;陳國棟;;肝硬化門靜脈高壓癥的診斷[J];中國實用內科雜志;2011年07期

6 許景芝;金月娥;周麗;郭建松;刀波;;血色病1例報道[J];醫(yī)學信息(中旬刊);2011年08期

7 薛丹連;楊玉;冉貞平;;1例肝硬化并發(fā)上消化道出血患者的護理[J];內蒙古中醫(yī)藥;2010年04期

8 陳向紅;羅小紅;李冠瓊;;肝硬化并上消化道出血60例的護理體會[J];現代醫(yī)藥衛(wèi)生;2011年18期

9 黃丹丹;;肝硬化合并上消化道出血的護理[J];醫(yī)學信息(上旬刊);2011年09期

10 ;肝硬化住院患者的營養(yǎng)習慣評價[J];中國肝臟病雜志(電子版);2008年01期

相關博士學位論文 前10條

1 顧小紅;PARs對大鼠HSC活化、增殖和功能的調控機制及其在肝纖維化中的作用[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

2 王秋實;血液生化學、磁共振彌散加權成像和～1H磁共振波譜分析在肝纖維化中的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2007年

3 劉金元;青蒿琥酯抗實驗性肝纖維化機理的探索性研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2008年

4 焦艷;TGF-β1在BMSC移植可能對大鼠肝纖維及肝癌進程影響中的作用[D];福建醫(yī)科大學;2009年

5 洪汝濤;褪黑素對大鼠肝纖維化的保護作用及其對NF-κB活性的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2009年

6 常實;同種異體肝細胞移植對大鼠肝臟纖維化的影響[D];中南大學;2007年

7 蔡紅兵;大黃蟅蟲丸對肝纖維化大鼠細胞因子表達譜的影響及其調控機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2008年

8 胡慶偉;雙環(huán)醇抗肝纖維化及其作用機制的研究[D];中國協和醫(yī)科大學;2006年

9 李亞琳;新城疫病毒抑制肝星狀細胞的活化及其逆轉小鼠肝纖維化的研究[D];第四軍醫(yī)大學;2008年

10 田曉麗;硒對金屬硫蛋白的誘導表達及對肝纖維化的防護作用研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2006年

相關碩士學位論文 前10條

1 屈文東;Leptin及其受體在實驗性脂肪肝及肝硬化中的檢測與表達意義[D];昆明醫(yī)學院;2005年

2 田偉;溫陽消臌方治療肝硬化腹水的臨床療效觀察[D];湖北中醫(yī)學院;2006年

3 王彩紅;MSCT灌注對肝癌病人肝硬化分級及肝儲備功能評價的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2008年

4 佐拉木·買買提;22例肝移植術后病人預后的分析[D];新疆醫(yī)科大學;2008年

5 賓萍;肝硬化對大鼠血、肝、腦和病人血錳及其它5種金屬元素水平的影響[D];廣西醫(yī)科大學;2005年

6 徐凱進;肝硬化病人腸道細菌易位的臨床研究[D];浙江大學;2006年

7 蘭永廷;肝硬化并發(fā)上消化道出血的相關因素分析[D];吉林大學;2006年

8 梁啟明;注射用奧曲肽微球對大鼠實驗性肝硬化門靜脈高壓癥的影響及其機制研究[D];吉林大學;2007年

9 吳昊星;調肝健脾補腎為主組方治療肝硬化腹水的臨床療效觀察[D];湖北中醫(yī)學院;2008年

10 卿軼;當歸多糖對大鼠肝性腦病的預防作用及其機制的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學;2008年

本文編號：2858225