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新生鼠HIBD模型血清S100B蛋白表達(dá)及TTC染色與MRI的相關(guān)性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-09-28 06:19
   第一部分3日齡新生鼠不同程度缺氧缺血性腦損傷的磁共振表現(xiàn)目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立3日齡新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷模型,探討:(1)新生鼠缺氧缺血性腦損傷不同受損程度常規(guī)磁共振(Magnetic resonance imaging,MRI)及磁共振彌散加權(quán)成像(Diffusion weighted imaging,DWI)的影像學(xué)表現(xiàn)。(2)DWI在缺氧缺血性腦損傷早期診斷中的價(jià)值。資料與方法選用健康、清潔級(jí)3日齡新生SD大鼠共104只,雌鼠50只,雄鼠54只,體重約7.3-10.7g,平均值:8.9±0.15g,隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組15只、假手術(shù)對(duì)照組15只、模型組74只。模型組麻醉后行左側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎術(shù),術(shù)后恢復(fù)1h后置于8%O2、92%N2的混合氣體的密閉容器中,并設(shè)置環(huán)境溫度為37℃,分別持續(xù)缺氧1h、2h、3h,制成不同程度HIBD動(dòng)物模型,分別為缺氧模型1h組(19只)、缺氧模型2h組(20只)、缺氧模型3h組(35只);取相同時(shí)間出生只暴露單側(cè)頸總動(dòng)脈、不結(jié)扎、不缺氧的新生仔鼠(15只)為假手術(shù)對(duì)照組;另取相同時(shí)間出生未做任何處理的新生仔鼠(15只)為空白對(duì)照組。分別于模型制作成功后6-12h、12-24h、3d、7d行常規(guī)MRI及DWI掃描并觀察各時(shí)間段各仔鼠的一般情況。取雙側(cè)額頂葉皮層及皮層下區(qū)、雙側(cè)海馬、雙側(cè)側(cè)腦室旁腦白質(zhì)、雙側(cè)丘腦為本實(shí)驗(yàn)的感興趣區(qū)(ROI),測(cè)量各部位表觀彌散系數(shù)(Apparent Diffusion Coefficient,ADC)并分析組內(nèi)及組間相同部位ADC值的差異。結(jié)果(1)3日齡新生SD大鼠在缺氧缺血模型制作成功后出現(xiàn)不同程度的運(yùn)動(dòng)行為學(xué)異常,如抽搐、躁動(dòng)不安、皮膚發(fā)暗、干燥、自主活動(dòng)減少、不能翻身等癥狀,而正常對(duì)照組與假手術(shù)組新生大鼠未出現(xiàn)上述異常表現(xiàn)。(2)磁共振成像表現(xiàn):1h模型組與正常對(duì)照組比較,病變部位主要分布在左側(cè)皮層及皮層下區(qū),3d前有ADC值的減低,7d已恢復(fù)正常;2h模型組的病變部位主要分布在左側(cè)皮層及皮層下區(qū)及部分左側(cè)海馬,在6-12h時(shí)ADC值最低,而后逐漸升高,于7d時(shí)恢復(fù)正常;3h模型組的病變部位在左側(cè)皮層及皮層下區(qū)、右側(cè)皮層及皮層下區(qū)、左側(cè)海馬、左側(cè)側(cè)腦室旁及左側(cè)丘腦,分布廣泛,左側(cè)皮層及皮層下區(qū)受損最嚴(yán)重。對(duì)照組和假手術(shù)組常規(guī)MRI和DWI均未見(jiàn)明顯異常信號(hào)。結(jié)論(1)HIBD早期損傷部位主要分布在皮層及皮層下區(qū);缺氧時(shí)間越長(zhǎng),病變部位越廣泛,對(duì)應(yīng)的ADC值越低;(2)DWI可以更早期檢測(cè)HIBD病變范圍并進(jìn)行預(yù)后評(píng)估,是檢查HIBD的重要方法。第二部分3日齡新生鼠不同程度HIBD血清S100B蛋白表達(dá)變化及TTC染色的實(shí)驗(yàn)研究目的本實(shí)驗(yàn)借助3日齡新生大鼠HIBD模型,通過(guò)對(duì)血清中S100B蛋白濃度的檢測(cè)與TTC染色,探討:(1)血清S100B蛋白在新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷早期診斷中的價(jià)值。(2)血清S100B蛋白水平與腦損傷嚴(yán)重程度的相關(guān)性。(3)新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷后血清S100B蛋白濃度升高的出現(xiàn)時(shí)間、峰值時(shí)間及消失時(shí)間,為臨床新生兒缺氧缺血性腦損傷的早期診斷和腦損傷評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。(4)TTC染色結(jié)果與磁共振彌散加權(quán)成像上病變的匹配關(guān)系,進(jìn)一步驗(yàn)證腦損傷的缺血范圍及程度。資料與方法(1)選用3日齡健康清潔級(jí)新生SD大鼠136只,雌雄各半,體重約7.5-11.8g,平均值:9.3±0.3g,隨機(jī)分為3組:空白對(duì)照組(8只),假手術(shù)組(8只)及HIBD模型組(120只),根據(jù)缺氧時(shí)間的不同,HIBD組又隨機(jī)分為3大組,即缺氧1h模型組、缺氧2h模型組、缺氧3h模型組?瞻讓(duì)照組、假手術(shù)組、各個(gè)模型組分別于模型制作成功后0h、12h、24h、3d、7d按照各個(gè)時(shí)間點(diǎn)取血,并留取新鮮腦組織。(2)采用ELISA法(雙抗夾心法)檢測(cè)血清中的S100B蛋白表達(dá)水平的變化。留取新鮮腦組織進(jìn)行TTC染色。結(jié)果(1)HIBD組血清S100B蛋白分別與假手術(shù)對(duì)照組和空白對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)比較血清S100B蛋白濃度值均升高,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,HIBD組在24h時(shí),S100B蛋白濃度值達(dá)到最大值;血清S100B蛋白水平各時(shí)間點(diǎn)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:空白對(duì)照組組間比較血清S100B蛋白濃度,P0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;假手術(shù)對(duì)照組組間比較血清S100B蛋白濃度,P0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;空白對(duì)照組與假手術(shù)對(duì)照組比較,P0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;表明假手術(shù)對(duì)照組S100B蛋白濃度表達(dá)穩(wěn)定,未受手術(shù)因素的影響;(2)TTC染色結(jié)果顯示蒼白色梗死區(qū)域及面積與磁共振彌散加權(quán)成像異常信號(hào)部位及面積基本一致。結(jié)論(1)S100B蛋白可以作為HIBD早期診斷的生化指標(biāo)。(2)新生大鼠HIBD血清中S100B蛋白在模型制作成功后12h開(kāi)始升高,24h達(dá)到高峰,之后開(kāi)始下降。(3)TTC染色可以作為判斷腦梗死的重要染色方法。
【學(xué)位單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2016
【中圖分類】:R742;R445.2
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略詞
前言
第一部分 3日齡新生鼠不同程度缺氧缺血性腦損傷的磁共振表現(xiàn)
    1 資料與方法
    2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 3日齡新生鼠不同程度HIBD血清S100B蛋白表達(dá)變化及TTC染色的實(shí)驗(yàn)研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 新生兒缺氧缺血性腦損傷的影像學(xué)研究現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝

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