【摘要】：背景與目的: 腦水腫(brain edema)是由于腦組織中液體過多導(dǎo)致異常蓄積而形成的,創(chuàng)傷、缺氧、炎癥、中毒等均可成為其發(fā)生發(fā)展的原因。臨床上嚴(yán)重?zé)齻∪送烙趪?yán)重的內(nèi)臟并發(fā)癥,盡管近年來隨著診療技術(shù)水平不斷提高,使燒傷病人的內(nèi)臟并發(fā)癥發(fā)生率顯著降低,但是腦水腫的發(fā)病率卻改善不明顯,有資料表明燒傷后腦水腫的生前診斷率僅為24.59%,這主要可能是由于我們對腦水腫的早期診斷還缺乏客觀指標(biāo),對其發(fā)生機(jī)制研究尚不深入、細(xì)致,而燒傷本身的嚴(yán)重性與其它致命的并發(fā)癥很大程度上掩蓋了腦水腫的癥狀,加之臨床醫(yī)生的重視程度不夠,使腦水腫的發(fā)生更具有隱匿性。以往的研究將嚴(yán)重?zé)齻?小時以后作為觀察腦組織改變的時間段,提示嚴(yán)重?zé)齻竽X水腫包含有血管源性腦水腫(vasogenic brain edema,VBE)和細(xì)胞毒性腦水腫(cytotoxic brain edema,CBE)兩者的表現(xiàn)特征,腦含水量及血腦屏障改變均呈彌漫型進(jìn)行性加重趨勢,而6小時以內(nèi)腦含水量及血腦屏障變化規(guī)律還研究甚少。研究表明常規(guī)的T1WI、T2WI掃描在6小時內(nèi)并無形態(tài)學(xué)改變,那么如何才能在嚴(yán)重?zé)齻笤缙?6小時內(nèi))發(fā)現(xiàn)腦含水量的變化呢?彌散加權(quán)成像(diffusion weighted image,DWI)這一非侵入性MRI成像序列技術(shù),可以觀察和量化組織內(nèi)水分子彌散運(yùn)動變化,是目前唯一能在活體內(nèi)測量水分子彌散異常的方法,對腦水腫的早期診斷與鑒別具有重要價值。近年來研究發(fā)現(xiàn)水通道蛋白(Aquaporin, AQP)可能參與了跨細(xì)胞膜運(yùn)輸過程,尤其是在血管周圍星形膠質(zhì)細(xì)胞足突上表達(dá)的水通道蛋白-4(AQP4)可使水分子通過血-腦脊液屏障進(jìn)入細(xì)胞,但是AQP4與嚴(yán)重?zé)齻竽X水腫的形成之間具有怎樣的關(guān)系,目前尚不清楚。因此,本實驗著重探索了嚴(yán)重?zé)齻缙?6小時內(nèi))水分子在腦組織內(nèi)彌散情況及AQP4的表達(dá)規(guī)律,在腦水腫發(fā)生發(fā)展過程中它們之間的聯(lián)系以及對腦水腫類型的鑒別診斷等問題。本研究以建立兔50 %Ⅲ度燒傷為模型基礎(chǔ),采用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)、干濕質(zhì)量法、免疫組化(immunohistochemistry)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)等技術(shù)和方法,通過檢測水通道蛋白-4表達(dá)水平和MRI相關(guān)參數(shù)改變,對比分析AQP4在燒傷后腦水腫形成中的表達(dá)規(guī)律及磁共振信號變化聯(lián)系,證實磁共振彌散成像可無創(chuàng)、動態(tài)量化及評價嚴(yán)重?zé)齻缙谀X水腫的可行性,提高燒傷后腦水腫早期診斷的水平,闡明AQP4的表達(dá)規(guī)律和嚴(yán)重?zé)齻X水腫病理聯(lián)系,及其與DWI的相關(guān)性,初步探討嚴(yán)重?zé)齻缙谀X內(nèi)水的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)特征。 方法: 70只體質(zhì)量2.5～3.2 kg的健康新西蘭大白兔(3月齡,雄性)按隨機(jī)數(shù)字表法分為7個時相點(diǎn)組:對照組及燒傷后1、2、3、4、5、6 h組,燒傷組兔均制成50%總燒傷面積Ⅲ度燒傷模型。每組5只兔常規(guī)行MRI T1WI、T2WI、DWI、DTI顱腦檢查,對各燒傷組和對照組的表觀彌散系數(shù)(ADC)值、各向異性分?jǐn)?shù)(FA)值,指數(shù)表觀彌散系數(shù)(eADC)值進(jìn)行動態(tài)觀察,并用干濕重法檢測其腦含水量的變化;每組另5只兔于MRI檢查后,兔腹腔注射3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)麻醉下取腦,分別取額葉、顳葉及頂葉皮質(zhì)、小腦及基底節(jié)區(qū)組織,采用免疫組化法及RT-PCR法檢測AQP4的表達(dá)。 結(jié)果: 1.燒傷后6 h內(nèi),T1WI、T2WI圖像未見明顯信號改變。 2.與對照組相比,燒傷后4～6 h ADC值明顯降低(P0.01),同時eADC值明顯增高(P0.01),而FA值無明顯改變。隨著觀察時間的延長,腦含水量呈逐漸增高趨勢,以傷后3～6 h表現(xiàn)最為顯著。腦含水量與ADC值、eADC值的變化呈明顯相關(guān)性,與FA值無明顯相關(guān)性。 3.在額葉、顳葉及頂葉皮質(zhì)區(qū)、小腦和基底節(jié)區(qū)各部位病理結(jié)果均顯示:燒傷后2小時血管周圍間隙輕度增寬,而細(xì)胞稍腫脹;燒傷后3小時顯示細(xì)胞明顯腫脹。燒傷后6小時毛細(xì)血管充血,周圍間隙增寬,細(xì)胞仍明顯腫脹。 4.免疫組化結(jié)果顯示嚴(yán)重?zé)齻蟾鲿r相點(diǎn)腦組織AQP4表達(dá)呈強(qiáng)陽性,與對照組比較均有不同程度上調(diào),尤其在傷后4h表達(dá)最強(qiáng)烈,傷后6h仍高于對照組水平,在各部位表達(dá)趨勢大體一致。兔嚴(yán)重?zé)齻昂蟾鲿r相點(diǎn)腦組織AQP4在額葉、顳葉及頂葉皮質(zhì),小腦和基底節(jié)區(qū)均有表達(dá),表明AQP4的表達(dá)是彌散性進(jìn)行的,并未局限于某一部位。 5. RT-PCR結(jié)果顯示AQP4mRNA在正常時為弱表達(dá),燒傷后1小時與正常對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異,燒傷后2小時達(dá)高峰,隨后表達(dá)逐漸減弱,燒傷后6小時仍高于正常水平,AQP4mRNA在各部位隨時間的延長表達(dá)趨勢大體一致。 6. AQP4表達(dá)量與ADC值的變化呈明顯負(fù)相關(guān)性。 結(jié)論: 1.本實驗研究結(jié)果可以初步證實兔50%Ⅲ度燒傷后6 h內(nèi)ADC值和eADC值均可反映水分子分布的總體趨勢,尤其ADC值能準(zhǔn)確便捷的反映其變化情況,最早在4 h可以發(fā)現(xiàn)明顯的統(tǒng)計學(xué)差異,表明MR彌散成像能夠較好的反映嚴(yán)重?zé)齻竽X含水量的變化,對燒傷早期明確診斷腦水腫具有重要參考價值。 2.在兔嚴(yán)重?zé)齻缙诳梢夾QP4表達(dá)增高,與DWI的ADC值的存在明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系,提示在嚴(yán)重?zé)齻缙谀X水腫形成過程中AQP4可能起到重要作用,其發(fā)生以促進(jìn)細(xì)胞毒性腦水腫形成為主,并呈彌漫性進(jìn)行性發(fā)展。ADC值則可準(zhǔn)確可靠的反映AQP4表達(dá)變化情況。
【圖文】：

嚴(yán)重?zé)齻昂蟛煌瑫r相點(diǎn)腦組織含水量的變化

腦組織含水量與ADC值呈線性負(fù)相關(guān)(r=-0.898,P<0.01)
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R644;R445.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號：2673293