【摘要】： [目的]建立大鼠腦內(nèi)出血模型,從組織、細胞、行為學(xué)、分子角度對腦出血后的神經(jīng)纖維潰變進行研究;并利用MR-DTI技術(shù),對大鼠腦白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)纖維進行彌散張量纖維重建,探討腦出血發(fā)生后磁共振彌散張量成像對神經(jīng)纖維潰變的診斷價值。 [材料和方法]1.制作SD大鼠腦出血動物模型:選Sprague-Dawley(SD)成年健康雄性大鼠40只,體重350-400克,隨機分成4組,每組10只:即假損傷組,腦出血組,再分為:1d,7d,14d。根據(jù)《大鼠腦立體定向圖譜》,采用腦立體定向術(shù)對大鼠腦尾狀核部位注入自體尾動脈血制成大鼠腦內(nèi)出血的模型。 2.在術(shù)后各個時間段用Berderson和Corner Test對大鼠進行神經(jīng)行為學(xué)評分。 3.用LFB(羅克沙爾堅牢藍)對ICH大鼠進行注血層面的神經(jīng)軸突染色,進行組織病理學(xué)觀察。 4.用Western-blot檢測ICH大鼠腦干部位NF-M,MAP-2因子的變化規(guī)律。 5.使用Philips Achieva MR 3.0T超導(dǎo)型磁共振成像系統(tǒng),3inch表面線圈,對各個時間段ICH大鼠行冠狀、矢狀、水平位掃描,層厚1mm,層間隔0mm。圖像后處理采用PHILIPS Extended MR Workspace R1.0軟件,檢測DTI相關(guān)定量分析參數(shù)FA值和ADC值,并進行注血區(qū)神經(jīng)纖維束三維重建。采用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件包進行統(tǒng)計學(xué)處理,以P＜0.05為差異具有顯著性。 [結(jié)果]1.實驗組不同時期腦組織病理形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為出血側(cè)腦組織內(nèi)不規(guī)則的圓形或橢圓形的出血區(qū),出血灶邊緣腦組織疏松、水腫、變性、壞死。2.神經(jīng)髓鞘染色可見有神經(jīng)纖維變性,神經(jīng)髓鞘發(fā)生了形態(tài)上的改變,髓鞘腫脹、斷裂,形成脂質(zhì)空泡,變性的神經(jīng)纖維喪失正常神經(jīng)纖維染色性質(zhì),證實了神經(jīng)纖維潰變。3.神經(jīng)系統(tǒng)功能評分顯示所有的實驗組動物均發(fā)生了不同程度的偏癱。4.NF-M和MAP-2在大鼠術(shù)后在第1天、第7天、14天均呈遞減變化,NF-M在第7天、第14天和對照組比較有顯著性差異(P＜0.05),MAP-2在第1天、第7天、第14天和對照組比較均有顯著性差異(P＜0.05)。5.ICH大鼠經(jīng)MR-DTI分析,FA值呈逐漸下降的變化趨勢,1天組和7天組與對照組無明顯差異,14天組與對照組有明顯差異(P＜0.05)。ADC值1天組和7天組與對照組相比逐漸下降,14天組與對照組相比上升,但無統(tǒng)計學(xué)意義。MR-DTI三維纖維束圖像能清晰的顯示大鼠尾狀核內(nèi)的白質(zhì)纖維,并可以觀察到局灶性出血灶對神經(jīng)纖維的侵犯程度及病灶與神經(jīng)纖維之間的相對空間位置。 [結(jié)論]1.自體動脈血注入法可建立可靠的實驗性ICH動物模型。紋狀體腦出血模型操作簡單,成活率高,傷情穩(wěn)定、均一,對肢體運動功能損傷小,較為符合臨床。 2.實驗性ICH動物有肢體運動障礙等行為學(xué)變化,鏡下主要組織病理變化包括組織壞死、水腫、,神經(jīng)纖維和髓鞘損傷。 3.NF-M,MAP-2在ICH模型早期呈遞減趨勢,其變化規(guī)律與神經(jīng)行為學(xué)改變和組織病理學(xué)變化相一致,可以反映腦出血后神經(jīng)纖維的潰變程度。 4.DTI可提供活體研究腦白質(zhì)出血性損傷細微改變的量化信息,FA值和ADC值可以反映白質(zhì)神經(jīng)纖維完整性的潰變程度,DTI神經(jīng)纖維的三維重建可對出血灶準確定位,可用于觀察和評價白質(zhì)纖維束走行、完整性以及屬性狀態(tài),DTI為神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)提供可視化、實時、無創(chuàng)的研究平臺,可指導(dǎo)腦出血的臨床分型、治療及判斷預(yù)后。
【圖文】：

在手術(shù)過程中不會移位，確保定位點準確，四肢不固定。c.頭頂部皮膚消毒后，在雙眼正中至耳朵之間做一縱行切口，深達骨膜，長約Zcm，細致剝離骨膜暴露BregIDa點(圖1)，參考大鼠腦立體定位圖譜〔川進行定位，定位部位為大鼠尾狀核。Bregma點右側(cè)中線旁開3lllln，前Ilnln為進針部位。用牙科鉆鉆一直徑約Ilnm的小孔至硬腦膜。將微量注射器置于立體定向儀上，使其針頭垂直于顱骨骨面并對準小孔，，取下注射器。d.將大鼠雙下肢翻轉(zhuǎn)朝上，暴露尾根部腹側(cè)。消毒后在腹側(cè)根部正中做一長Zcm一3cm的縱向切口，細致分離尾動脈(位于尾靜脈背側(cè))。用鹽水沖洗過的微量注射器穿刺尾動脈，抽取尾動脈血60u1(相當于人約40ml)

無神經(jīng)功能缺損1前肢出現(xiàn)任何屈曲成分，即對側(cè)腕關(guān)節(jié)、肘關(guān)節(jié)屈曲、肩內(nèi)收屈曲不伴其它不正常2上述體征+向麻痹側(cè)推阻力下降無轉(zhuǎn)圈行為，即側(cè)向推力實驗陽性3同2級行為+自發(fā)性旋轉(zhuǎn)，自由活動時向癱瘓側(cè)劃圈(呈追尾狀)2.2.2CornerTest[，3]實驗裝置為由兩塊30cmx20cmxIcm的平板構(gòu)成30。的夾角(圖4)。當實驗動(小鼠或大鼠)進入夾角(corner)深部，雙側(cè)的觸須將受到刺激，繼而小鼠將站立并身面向夾角的開口端。正常小鼠向左向右轉(zhuǎn)身的幾率基本相等，而一側(cè)腦損傷的小則以向腦損傷同側(cè)轉(zhuǎn)身為主。不對稱分值=(向出血側(cè)作“站立轉(zhuǎn)身”的次數(shù)/總的“立轉(zhuǎn)身”的次數(shù))x10服，正�；�為5服，分值越高，反映損傷越嚴重。主要用以檢大鼠“不對稱感覺運動功能障礙”(as卿etriealsensorimotordysfunetion)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R743.34;R445.2

【參考文獻】

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本文編號：2656389