【摘要】：目的：探討地塞米松、維拉帕米聯(lián)合持續(xù)低流量復(fù)灌注治療兔單側(cè)睪丸不全扭轉(zhuǎn)復(fù)位后缺血再灌注損傷的超聲表現(xiàn)、保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。 方法： 制備脂質(zhì)微泡造影劑并檢測其物理學(xué)活性。 將30只健康成年大白兔隨機(jī)分成對照組、地塞米松組（DS組）、維拉帕米組（VP組）、30s持續(xù)低流量復(fù)灌注（H組）和聯(lián)合處理組（L組），共五組，每組6只。在超聲監(jiān)控下根據(jù)血流減少程度對兔單側(cè)精索行不全結(jié)扎，制成單側(cè)睪丸中度不全缺血模型。在復(fù)灌注前分別對各組進(jìn)行不同方式的處理，對照組直接完全復(fù)灌注，其他四組分別給予地塞米松、維拉帕米、30s持續(xù)低流量復(fù)灌注和三種方式的聯(lián)合處理后再行完全復(fù)灌注，再灌注3天后再行超聲檢查，取下術(shù)側(cè)睪丸觀察其組織學(xué)改變、細(xì)胞凋亡情況、丙二醛（MDA）含量改變、超氧化物歧化酶（SOD）活力，黃嘌呤氧化酶（XOD）活力及低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）蛋白含量。5組兔子均在再灌注前及再灌注3天后進(jìn)行超聲脂質(zhì)微泡造影，分析各個時(shí)間段雙側(cè)睪丸造影參數(shù)峰值強(qiáng)度（PEAK）、達(dá)峰時(shí)間（P-T）、平均通過時(shí)間(M-T)和曲線下面積（AREA）的變化。 結(jié)果： 脂質(zhì)微泡造影劑為乳白色渾濁液體，光鏡下可見粒徑平均1.5~4μm，分布均勻的圓形微泡，室溫下保存12h后液體變澄清，鏡下觀察微泡變大、數(shù)量減少。 各組再灌注前，術(shù)側(cè)睪丸不全扭轉(zhuǎn)的二維灰階、彩色多普勒超聲表現(xiàn)一致；各組術(shù)側(cè)睪丸體積比較，再灌注前比術(shù)前增大，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）。超聲造影參數(shù)比較，各組術(shù)側(cè)睪丸與對側(cè)比，參數(shù)PEAK降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05），T-P延長，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.01），M-T延長，有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.000），AREA減小，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05），所有參數(shù)各組兩兩比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）；各組超聲造影時(shí)間-強(qiáng)度曲線顯示，術(shù)側(cè)睪丸均呈現(xiàn)“慢進(jìn)慢退”現(xiàn)象。 再灌注3天后，術(shù)側(cè)睪丸超聲表現(xiàn)不同，體積比較，除H組外，均較再灌注前縮小，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05）；超聲造影參數(shù)比較，各組術(shù)側(cè)睪丸與對側(cè)比，對照組T-P和AREA縮短，減小，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.014，0.026），對照組和H組比M-T延長，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.023，0.002），DS組各參數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p0.05）；所有造影參數(shù)各組間兩兩比較，DS組、VP組和L組參數(shù)PEAK較對照組減低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05），P-T和M-T較對照組延長，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05），DS組和L組的AREA值較對照組減小，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.018,0.000），VP組與DS組比，各參數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p0.05）；各組超聲造影時(shí)間-強(qiáng)度曲線顯示，對照組和H組術(shù)側(cè)睪丸造影時(shí)間-強(qiáng)度呈“快進(jìn)慢退”現(xiàn)象，VP組峰值高，消退較慢，DS組、L組雙側(cè)幾乎“同進(jìn)同退”。 光鏡下Johnsen’s評分，各處理組較對照組評分高，均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p0.01），L組較H組評分高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.025）。Tunel檢測凋亡指數(shù)AI%，各處理組術(shù)側(cè)睪丸組織較對照組減低，均有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.000），L組較H組減低，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.001）。MDA含量檢測，各處理組術(shù)側(cè)睪丸組織比對照組降低，均有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.000），L組較其他組減低不明顯。SOD活力檢測，各處理組術(shù)側(cè)睪丸組織較對照組增高，有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.000），L組較H組增高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p=0.007）。XOD活力檢測，VP組和L組較其他組活力降低，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.05），VP組與L組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p=0.671）。HIF-1α蛋白含量檢測，H組和L組較其它組含量增高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p0.001），H組與L組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p=0.603）。 結(jié)論：①聯(lián)合彩色多普勒超聲和超聲脂質(zhì)微泡造影，能夠?qū)崟r(shí)動態(tài)地顯示睪丸不全扭轉(zhuǎn)及扭轉(zhuǎn)后復(fù)位各階段組織和微循環(huán)的改變。②地塞米松、維拉帕米和持續(xù)低流量復(fù)灌注對睪丸不全扭轉(zhuǎn)復(fù)位后IRI治療效果不同。③多種途徑聯(lián)合治療IRI效果更好。
【圖文】：

物理學(xué)性質(zhì)測定方法懸濁液靜置后不同時(shí)間段肉眼觀察其外觀變鏡下觀察脂質(zhì)微泡形態(tài)，粒徑大小及分布情懸浮液稀釋 100 倍后，采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢，肉眼觀察外觀呈乳白色懸濁液（圖 1），乳白色的微泡，下層為透明溶液。室溫下隔基本消失，僅可見少許泡沫漂浮在透明溶液通光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，微泡圓形，m（圖 2）。室溫下放置 12 小時(shí)后再觀察發(fā)散在的微泡，直徑約 1.0-10μm（圖 4）。 1:100 比例稀釋，血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定微泡體的濃度為 5.0×108個/mL。

通光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，微泡圓形，m（圖 2）。室溫下放置 12 小時(shí)后再觀察發(fā)散在的微泡，直徑約 1.0-10μm（圖 4）。 1:100 比例稀釋，血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定微泡濃體的濃度為 5.0×108個/mL。圖 1 脂質(zhì)微泡肉眼觀
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R445.1;R697.22

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2619149