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不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki67、MVD、P73表達(dá)的相關(guān)性研究.doc 全文免費(fèi)在線

發(fā)布時(shí)間:2016-10-26 09:17

  本文關(guān)鍵詞:不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki67、MVD、P73表達(dá)的相關(guān)性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


網(wǎng)友1529039003近日為您收集整理了關(guān)于不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki67、MVD、P73表達(dá)的相關(guān)性研究的文檔,,希望對(duì)您的工作和學(xué)習(xí)有所幫助。以下是文檔介紹:蘭州大學(xué)碩士研究生論文不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki、MVD、P表達(dá)的相關(guān)性研究前言腎細(xì)胞癌起源于腎臟近曲小管上皮細(xì)胞,是腎臟最常見的原發(fā)惡性腫瘤[],發(fā)病率僅次于膀胱癌居泌尿系惡性腫瘤的第二位。在全世界范圍內(nèi),每年分別有超過(guò)萬(wàn)的新發(fā)腎癌病例和萬(wàn)因腎癌而死亡的病例[],肥胖、主動(dòng)與被動(dòng)吸煙、高血壓等因素被證實(shí)或多或少與腎癌的發(fā)生有著一定的關(guān)聯(lián)[-]。腎癌多發(fā)生于中老年人,平均年齡在左右,很多患者可無(wú)任何臨床癥狀,均在體檢中偶然發(fā)現(xiàn)。腎癌典型的癥狀主要為腰部疼痛、血尿以及腹部腫塊,這些癥狀的出現(xiàn)表明患者大多已處于中晚期。其它的一些全身癥狀體重減輕、盜汗、發(fā)熱等,部分患者出現(xiàn)骨痛或是持續(xù)性咳嗽等轉(zhuǎn)移性癥狀后才被發(fā)現(xiàn)。腎癌的早期發(fā)現(xiàn)直接影響到最終的治療效果,隨著人們健康意識(shí)的不斷增強(qiáng)以及醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,特別是醫(yī)學(xué)影像學(xué)的快速發(fā)展,使腎癌早診斷早治療成為了可能。目前腎癌最常用的檢查方法包括CT、MRI、B超等,在腎臟腫瘤的這些檢查手段中,CT是目前使用最廣泛的檢查方法[]。年WHO對(duì)腎癌的分型進(jìn)行了修訂,將腎細(xì)胞癌分為了個(gè)亞型[],包括:透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌、乳頭狀細(xì)胞癌、多方囊性透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞腎細(xì)胞癌、腎髓質(zhì)癌、Xp易位癌、Bellini集合管癌、粘蛋白管狀和梭形細(xì)胞瘤、腎癌合并神經(jīng)母細(xì)胞瘤、未歸類腎癌。在這型中又以透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌和嫌色神細(xì)胞癌最常見[]。由于顆粒細(xì)胞癌胞漿很豐富,核分級(jí)比透明細(xì)胞癌高,在新分類中被劃歸為高分級(jí)的透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌。年版中提出的囊腫伴腎細(xì)胞癌這一病理類型,在版中已經(jīng)取消,囊性腎癌目前僅作為影像學(xué)診斷用語(yǔ)在使用,而多房囊性腎細(xì)胞癌確是獨(dú)立的腎癌類型,因此,在一定程度上造成了二者的混淆。不同的腎癌亞型有著不同的預(yù)后[],故術(shù)前比較準(zhǔn)確對(duì)亞型腎癌進(jìn)行診斷有重要的意義。分子生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展使得現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)各種疾病特別是腫瘤的認(rèn)識(shí)深入了分子基因水平。借助于免疫組化技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤更為準(zhǔn)確的診斷與鑒別診斷、尋找轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位、對(duì)腫瘤進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型、發(fā)現(xiàn)更微小的轉(zhuǎn)移性病灶,為幫助臨床確定最佳的手術(shù)法案提供依據(jù)。Ki抗原是一種核增殖抗原,又名細(xì)胞核增殖抗原,與細(xì)胞的有絲分裂周期關(guān)系密切,它也是判斷細(xì)胞增值的一個(gè)重要指標(biāo),廣泛應(yīng)用于評(píng)價(jià)腫瘤的良惡性程度以及預(yù)后等方面,被認(rèn)為是最有前途的細(xì)胞增殖標(biāo)記物[]。MVD是用來(lái)評(píng)價(jià)腫瘤血管生成的指標(biāo),它與腫瘤臨床及其病理特征關(guān)系密切,同時(shí)與疾病進(jìn)展呈正相關(guān)性[]。人們認(rèn)為p蘭州大學(xué)碩士研究生論文不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki、MVD、P表達(dá)的相關(guān)性研究基因有可能是p家族中的一員[],其編碼蛋白質(zhì)在序列上的同源性和功能性上等諸多方面與p蛋白有相似之處。p基因具有個(gè)體特異性和組織特異性,自發(fā)現(xiàn)以來(lái)對(duì)它還存在不少爭(zhēng)議,但大量研究表明它可以在一定程度上反映出腫瘤患者的預(yù)后。本研究選取了MVD、Ki、p三個(gè)指標(biāo)與腎癌亞型的CT征象進(jìn)行相關(guān)性研究,分別從腫瘤的血管生成、細(xì)胞增殖和基因等三個(gè)不同的角度評(píng)價(jià)腎癌的影像特征與生物學(xué)特性之間的相關(guān)性,探討腫瘤的生物學(xué)特性與CT表現(xiàn)之間的相關(guān)性,以求更進(jìn)一步提高對(duì)腎癌常見亞型的術(shù)前診斷符合率,并為其術(shù)前方案的制定及預(yù)后評(píng)價(jià)提供參考。蘭州大學(xué)碩士研究生論文不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki、MVD、P表達(dá)的相關(guān)性研究第一章材料與方法.材料..資料來(lái)源收集我院近三年來(lái)例腎癌患者病例,術(shù)前行CT動(dòng)態(tài)增強(qiáng)檢查。包括男性例,女性例,并且所有病例均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)。所有病例包括透明細(xì)胞腎癌例,乳頭狀腎細(xì)胞癌例,嫌色細(xì)胞腎癌例,多房囊性腎癌及腎集合管癌各例。同時(shí)取例正常腎組織(取材來(lái)自全腎切除病例)為對(duì)照組進(jìn)行對(duì)照。..主要設(shè)備儀器及實(shí)驗(yàn)試劑Siemenssensation排螺旋CT德國(guó)SIEMENS公司雙目顯微鏡日本OLYMPUS公司顯微照相儀日本OLYMPUS公司石蠟切片機(jī)德國(guó)LEICA公司電熱恒溫水浴箱上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠低溫冰箱海爾公司烘箱非離子型對(duì)比劑碘海醇(mg/m)北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司CD鼠抗人單克隆抗體北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司Ki鼠抗人單克隆抗體北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司P羊抗人單克隆抗體北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品PV試劑盒實(shí)驗(yàn)中用到的其它設(shè)備和用品還包括有振蕩器、電磁爐、高壓鍋、載玻片支架、蓋玻片等。.方法..CT檢查應(yīng)用西門子SENSATION排螺旋CT行雙腎CT平掃及三期動(dòng)態(tài)增強(qiáng)掃描。使用高壓注射器由前臂靜脈注入非離子造影劑(碘海醇,mgI/ml)-ML不蘭州大學(xué)碩士研究生論文不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki、MVD、P表達(dá)的相關(guān)性研究等,流速為—ml/s,螺距.,層厚mm,掃描過(guò)程在病人平靜呼吸下屏氣后進(jìn)行。..蠟塊制備取材及固定:將手術(shù)切除標(biāo)本放入%的中性甲醛溶液固定(-小時(shí))。洗滌和脫水:用流水沖洗,繼而放入酒精中脫水,自不同濃度酒精(%-%)直至無(wú)水乙醇。透明:將標(biāo)本放入純酒精和二甲苯的混合液浸泡,時(shí)間大約為-小時(shí),隨后放入純二甲苯中,具體時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)取材大小不同進(jìn)行調(diào)整。浸蠟與包埋:將材料放入加熱融化的石蠟和二甲苯混合液中,時(shí)間約小時(shí)。完畢后取出標(biāo)本再依次放入個(gè)融化的石蠟液中,時(shí)間為小時(shí)左右。浸蠟后的標(biāo)本材料放進(jìn)裝有蠟液的容器中,看見表層凝固后即迅速放入冷水中冷卻,蠟塊制作完成。..切片用刀片將蠟塊修整整齊,一般為方塊或長(zhǎng)方塊,將修整好的蠟塊放入切片機(jī)的蠟塊鉗內(nèi),切片刀與蠟塊切面必須保持平行,然后固定、旋緊,以微米厚度進(jìn)行連續(xù)切片。烤片:使用水撈法將切片展平,將其粘附于載玻片上,切片不超過(guò)載玻片邊緣,最后放入℃的溫箱中進(jìn)行干燥。..H.E染色將干燥好的切片放入二甲苯中進(jìn)行脫蠟,時(shí)間大約為一lO分鐘。放入:二甲苯和純酒精混合液中,約分鐘左右。分別放入%、%、%、%的酒精(各-分鐘),將玻片過(guò)蒸餾水后放進(jìn)染液里進(jìn)行染色。用蘇木素精染液進(jìn)行染色(時(shí)間為—分鐘)。將玻片再次通過(guò)蒸餾水,以去除玻片上多余的染液,然后在用.-%鹽酸酒精進(jìn)行分色,整個(gè)過(guò)程使用顯微鏡檢查控制,直到細(xì)胞核及核內(nèi)染色質(zhì)清晰為止。流水沖洗玻片約分鐘。將玻片再次通過(guò)蒸餾水進(jìn)行沖洗。使用.~.%伊紅染液染色約分鐘。順序通過(guò)%、%、%、%不同濃度的酒精進(jìn)行脫水,分別約—分鐘。蘭州大學(xué)碩士研究生論文不同類型腎癌的CT表現(xiàn)與Ki、MVD、P表達(dá)的相關(guān)性研究使用二甲苯進(jìn)行透明,共兩次約lO分鐘左右。用干毛巾擦去切片周圍多余的二甲苯,滴加適量的中性樹膠,加蓋玻片封固。使用高倍光鏡觀察染色玻片中切片組織的病理學(xué)改變。..S—P法免疫組化染色將組織材料切片,然后進(jìn)行常規(guī)的脫臘和水化。用磷酸鹽緩沖液沖洗次,每次分鐘。切片放入.%過(guò)氧化氫室溫孵育一分鐘,目的是消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。磷酸鹽緩沖液再次進(jìn)行沖洗次,每次分鐘。將玻片放入高壓鍋加熱進(jìn)行抗原修復(fù),再次磷酸鹽緩沖液沖洗次,每次分鐘。滴加蛋白阻斷液,室溫孵育約分鐘,緩沖液沖洗次,每次分鐘。加一抗,放入℃冰箱過(guò)夜,緩沖液沖洗次,每次分鐘。加二抗,室溫孵育分鐘,緩沖液沖洗次,每次分鐘。滴加過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉菌抗生素蛋白,室溫孵育分鐘

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本文編號(hào):153779

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