本文關(guān)鍵詞：核質(zhì)橋作為輻射生物標(biāo)志物的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國疾病預(yù)防控制中心》 2014年

核質(zhì)橋作為輻射生物標(biāo)志物的初步研究

趙驊  

【摘要】：核質(zhì)橋(nucleoplasmic bridges, NPB)是胞質(zhì)分裂阻滯法(cytokinesis-block analysis, CB)制備的雙核細(xì)胞中位于兩個主核之間連續(xù)的橋狀核質(zhì)連接,是DNA錯誤修復(fù)、染色體重排或端粒末端融合的生物標(biāo)志物。研究表明：淋巴細(xì)胞中NPB的數(shù)量隨所受電離輻射劑量的增加而增加；在相同環(huán)境條件培養(yǎng)下,NPB與淋巴細(xì)胞中期分裂相雙著絲粒染色體及著絲粒環(huán)(Dicentic chromosome+Centric ring, dic+r)的頻率呈正相關(guān)。NPB具有本底水平低、計數(shù)效率高、易于鑒別等特點。因此,NPB具備成為輻射生物劑量計的基礎(chǔ)條件。 本研究旨在對NPB作為輻射生物標(biāo)志物進(jìn)行初步研究,為輻射損傷研究提供新的生物標(biāo)志物,并為NPB最終成為快速、準(zhǔn)確的輻射生物劑量計提供科學(xué)依據(jù)。 材料與方法：采用CB法對輻射誘導(dǎo)的人外周血淋巴細(xì)胞NPB的劑量-效應(yīng)關(guān)系及劑量響應(yīng)范圍、NPB在正常人群的本底水平、不同劑量率射線、不同種類射線對NPB的影響進(jìn)行系統(tǒng)研究；采用染色體畸變分析(Chromosomal aberration, CA)法分析淋巴細(xì)胞中期分裂相dic+r的頻率,并與相同劑量照射后的NPB結(jié)果作比較；采用熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)技術(shù)對NPB的形成機(jī)制進(jìn)行初步探索。 結(jié)果： (1)人離體外周血在受到60Coγ射線照射后,隨著吸收劑量的增加,NPB細(xì)胞數(shù)及NPB頻率均顯著增加,在同一個雙核細(xì)胞中具有2個NPB的雙核細(xì)胞數(shù)也有增加的趨勢。在0～6Gy及0～1Gy范圍內(nèi),NPB頻率與60Coγ射線吸收劑量間的劑量-效應(yīng)關(guān)系均符合線性平方模型,擬合兩條的劑量-效應(yīng)曲線分別為：y=(1.39×10-3)x2+(4.94×10-3)x (R2=0.981, P0.01)及y=-(2.48×10-2)x2+(5.62x10-2)x+0.336(R2=0.960, P0.01),其中x為吸收劑量(Gy),y為NPB/細(xì)胞。 (2)用0、2、5Gy60Co y射線照射人離體外周血,染色體中期分裂相中dic+r及無著絲粒斷片(Acentic fragment, ace)的頻率均隨60Coγ射線吸收劑量的增加而顯著增加。相同劑量60Co γ射線照射后,NPB的發(fā)生率遠(yuǎn)低于dic+r,dic+r與NPB在本底水平、2Gy及5Gy60Co y射線照射后發(fā)生率的比值分別為0.725、23.1及33.5；NPB率、MN率、dic+r率及ace率四者相互間具有很強(qiáng)的正相關(guān)性。 (3) FISH標(biāo)本中,DAPI染色的雙核細(xì)胞及NPB呈藍(lán)色,Cy3標(biāo)記的泛著絲粒探針的雜交信號呈紅色。將兩種染色的圖像進(jìn)行融合處理后,在雙核細(xì)胞中的NPB上觀察到紅色點狀的泛著絲粒探針信號。 (4)NPB在正常人群的自發(fā)率為(0.56+0.69)×10-3/細(xì)胞。將受試者按性別分組,男性NPB自發(fā)率為(0.65+0.74)×10-3/細(xì)胞,女性NPB自發(fā)率為(0.46+0.62)×10-3/細(xì)胞,NPB自發(fā)率男性略高于女性(P0.05)。按不同年齡分組,NPB自發(fā)率在20-29歲組最低,為(0.364-0.66)×10-3/細(xì)胞；40-49歲組最高,為(0.92±±0.76)×10-3/細(xì)胞；而50歲及以上組低于30-39歲組(P0.05)及40～49歲組(P0.05)。 (5)用總照射劑量相同(5Gy)、劑量率不同的60Co Y射線照射正常人離體外周血,隨著60Co γ,射線劑量率的升高,雙核細(xì)胞中的NPB頻率有下降的趨勢。5.0與10.0Gy/min組的NPB頻率較0.2、0.5、1.0、3.0Gy/min四組顯著’降低(P0.01)；NPB頻率在0.2、0.5、1.0、3.0Gy/min四組相互間及5.0與10.0Gy/min兩組間并無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。 (6)人離體外周血在受到高傳能線密度(Linear energy transfer, LET)射線照射后,隨著重離子12C6+吸收劑量的增加,NPB細(xì)胞數(shù)及NPB頻率均顯著增加,NPB頻率與重離子12C6+吸收劑量間的劑量-效應(yīng)關(guān)系符合線性平方模型,擬合的0～8Gy范圍內(nèi)的劑量-效應(yīng)曲線為：y=-(1.73×10-3)x2+(3.51×10-2)x(R2=0.934, P 0.01),其中x為吸收劑量(Gy),γ為NPB/細(xì)胞。NPB率在0.005-0.07/細(xì)胞時,重離子12C6+對60Coγ射線的相對生物效能(Relative biological effect, RBE)值為5.86-2.47,平均值為3.72。 結(jié)論： (1)NPB在正常人群的自發(fā)率很低,不受性別因素的影響,有隨年齡增加而升高的趨勢； (2)人離體外周血在受到60Co γ射線照射后,雙核細(xì)胞中的NPB具有良好的劑量效應(yīng)關(guān)系,且對高LET射線(重離子12C6+)也具有良好的劑量效應(yīng)關(guān)系； (3)相同劑量、不同劑量率射線照射后,高劑量率組NPB頻率低于低劑量率組； (4)在NPB上檢測到泛著絲粒探針信號,提示NPB的形成可能與dic有關(guān)。 雙核淋巴細(xì)胞中的NPB有可能成為新的輻射生物標(biāo)志物,但要成為成熟的輻射生物劑量計尚需進(jìn)一步完善的系統(tǒng)研究。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R817
【目錄】：

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3 王偉力;肺癌放射治療療效及毒性相關(guān)的遺傳免疫學(xué)標(biāo)志物的研究[D];吉林大學(xué);2014年

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5 張遲;生物標(biāo)志物的檢測方法研究[D];華中科技大學(xué);2006年

6 汪建君;生物標(biāo)志物在全新世古生態(tài)恢復(fù)中的應(yīng)用與南極氣溶膠特征[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2007年

7 李遜斗;食物中能夠進(jìn)入淋巴液的蛋白尿蛋白質(zhì)組影響因素及腎癌標(biāo)志物的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張海龍;東海和黃海表層沉積物中類脂生物標(biāo)志物的分布特征和古生態(tài)重建[D];中國海洋大學(xué);2008年

2 郭利果;原油中不同生物標(biāo)志物的生物降解性及其在評價溢油海岸線生物修復(fù)效果中的應(yīng)用研究[D];中國海洋大學(xué);2009年

3 孫蘊(yùn)婕;沉積物中脂類生物標(biāo)志物的物源示蹤及環(huán)境演變指示[D];華東師范大學(xué);2011年

4 宋雙雙;鯽魚分子生物標(biāo)志物的研究與應(yīng)用[D];山東師范大學(xué);2013年

5 趙媛媛;基于質(zhì)譜的生物標(biāo)志物檢測方法研究與應(yīng)用[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 楊庶;典型海洋沉積物中脂類生物標(biāo)志物的形態(tài)分布及來源分析[D];中國海洋大學(xué);2009年

7 王群;聯(lián)合應(yīng)用2種雙殼類的生物標(biāo)志物評價北部灣底棲環(huán)境質(zhì)量[D];中國海洋大學(xué);2014年

8 丁玲;東海陸架區(qū)懸浮顆粒物中浮游植物生物標(biāo)志物的比例變化及濟(jì)州島西南泥質(zhì)區(qū)種群結(jié)構(gòu)重建[D];中國海洋大學(xué);2008年

9 易慶軍;傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒血清生物標(biāo)志物的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年

10 羅爭峰;鎘、鉛環(huán)境生物標(biāo)志物的研究[D];東華大學(xué);2004年

  本文關(guān)鍵詞：核質(zhì)橋作為輻射生物標(biāo)志物的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：152390