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表達豬細小病毒VP2蛋白的重組豬偽狂犬病毒在小鼠體內(nèi)的免疫反應

發(fā)布時間:2017-08-26 03:38

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【摘要】:為了研制出能夠同時預防豬細小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和豬偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的二聯(lián)活疫苗,本研究將PPV VP2基因克隆到偽狂犬病毒通用轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pG中,構(gòu)建重組偽狂犬轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pGVP2。利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒pGVP2和PRV HB98弱毒株DNA共轉(zhuǎn)染至豬睪丸(ST)細胞,使其在ST細胞內(nèi)發(fā)生同源重組,經(jīng)5次綠色熒光空斑純化重組病毒rPRV-VP2。分別用重組病毒rPRV-VP2、親本PRV HB98弱毒株、商品化PPV滅活苗和DMEM細胞培養(yǎng)液免疫6周齡雌性昆明小鼠,2周后進行二免。一免后第7周用PRV強毒NY株對小鼠進行攻毒。結(jié)果獲得表達VP2基因的重組病毒rPRV-VP2,經(jīng)ELISA試驗、血清中和試驗(SN)、血凝抑制試驗(HI)和流式細胞檢測發(fā)現(xiàn),重組病毒rPRV-VP2株可有效刺激小鼠機體產(chǎn)生抗PPV和PRV抗體,同時具有增強小鼠機體細胞免疫反應的能力,且對PRV強毒攻擊具有保護作用。結(jié)果表明,重組病毒rPRV-VP2可作為同時預防PPV和PRV感染的重組疫苗候選株。
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院;大北農(nóng)動物醫(yī)學研究中心;河南省動物疫病預防控制中心;鄭州市豬重大疫病防控重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】豬細小病毒 豬偽狂犬病毒 VP蛋白 重組病毒 免疫效力
【基金】:河南省重大科技專項(111100110300) 河南省產(chǎn)學研合作計劃項目(152107000003)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 3.大北農(nóng)動物醫(yī)學研究中心,北京100195;4.河南省動物疫病預防控制中心,鄭州450008)豬細小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是細小病毒科、細小病毒屬成員,是導致初產(chǎn)母豬出現(xiàn)繁殖障礙性疾病的重要病原體之一[1];其主要特征是引起母豬發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)出死胎、木乃伊胎以及新生仔豬的

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