本文關(guān)鍵詞：雞免疫功能相關(guān)MHC B-LβⅡ基因篩選及一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)其免疫調(diào)節(jié)作用研究

  更多相關(guān)文章： MHC B-LβⅡ 多糖 細(xì)胞因子 免疫球蛋白 細(xì)胞轉(zhuǎn)化率 綿羊紅細(xì)胞抗體滴度

【摘要】：目的:本研究利用一定純度的中藥復(fù)方多糖,作用于MHC B-LβⅡ基因不同基因型的雞。通過(guò)檢測(cè)雞不同日齡各項(xiàng)免疫指標(biāo),探究一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)不同基因型雞的免疫調(diào)節(jié)作用,確定對(duì)不同基因型雞免疫調(diào)節(jié)作用的最佳中藥復(fù)方多糖的濃度,為中藥復(fù)方多糖在提高雞免疫能力方面的研究提供理論和試驗(yàn)依據(jù)。方法:1、用水提醇沉法,對(duì)由當(dāng)歸、黨參、熟地、川芎、山楂、何首烏等11味中藥組成的中藥復(fù)方進(jìn)行粗多糖的提取。2、利用Sevage法除去粗多糖中的蛋白質(zhì)成分后,將多糖經(jīng)過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附解吸,除去色素及小分子雜質(zhì),進(jìn)行粗多糖純化;再通過(guò)苯酚-硫酸法測(cè)定純化后多糖含量,獲得一定純度的中藥復(fù)方多糖。3、經(jīng)過(guò)DNA提取技術(shù)、PCR-SSCP技術(shù)和基因測(cè)序技術(shù),對(duì)500羽黃麻肉雞雛雞進(jìn)行DNA提取,以及基因分型。4、將一定純度的中藥復(fù)方多糖,配制成高劑量(50 mg/mL)、中劑量(25 mg/mL)、低劑量(12.5 mg/mL)3種不同濃度;對(duì)不同基因型的雞,分別進(jìn)行新城疫疫苗免疫、分組、用藥,采集21、42、56、70四個(gè)日齡階段的雞外周血,分離血清。5、用ELISA方法檢測(cè)21、42、56、70四個(gè)日齡階段,雞血清中細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IFN-α、IFN-γ)含量,新城疫抗體含量。6、用ELISA方法檢測(cè)21、42、56、70四個(gè)日齡階段,雞血清中CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞亞群含量,IgG、IgM含量。7、用MTT法檢測(cè)21、42、56、70四個(gè)日齡階段,雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,紅細(xì)胞凝集法檢測(cè)42、56、70三個(gè)日齡階,雞段綿羊紅細(xì)胞抗體滴度。結(jié)果:1、經(jīng)過(guò)提取純化后,利用苯酚-硫酸法檢測(cè),得到含量為77.10%的中藥復(fù)方多糖。2、根據(jù)PCR-SSCP以及基因測(cè)序結(jié)果,共分出AA、AB、BB、AC、AD五種不同基因型。3、雞各項(xiàng)免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示,高劑量組中,AA基因型個(gè)體的各項(xiàng)免疫功能相關(guān)指標(biāo)均高于其他四種基因型個(gè)體;中劑量組中,AB基因型個(gè)體的各項(xiàng)免疫功能相關(guān)指標(biāo)均高于其他四種基因型個(gè)體;低劑量組中,AB基因型個(gè)體的各項(xiàng)免疫功能相關(guān)指標(biāo)均高于其他四種基因型個(gè)體。結(jié)論:分析結(jié)果表明,MHC B-LβⅡ基因的多態(tài)性對(duì)中藥復(fù)方多糖最適免疫增強(qiáng)劑量的的篩選具有一定程度的影響,不同基因型雞中藥復(fù)方多糖的最佳劑量有所不同。同時(shí),在三種不同濃度的中藥多糖中,以中劑量濃度的促進(jìn)作用效果最好。
【關(guān)鍵詞】：MHC B-LβⅡ 多糖 細(xì)胞因子 免疫球蛋白 細(xì)胞轉(zhuǎn)化率 綿羊紅細(xì)胞抗體滴度
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S853.7;S831
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-11
• 英文縮略詞表11-12
• 引言12-13
• 第一章 文獻(xiàn)綜述13-24
• 1 中藥多糖的研究進(jìn)展13-15
• 2 中藥多糖在動(dòng)物免疫調(diào)節(jié)能力方面研究進(jìn)展15-23
• 2.1 中藥多糖對(duì)免疫器官發(fā)育的促進(jìn)作用16-17
• 2.2 中藥多糖對(duì)T淋巴細(xì)胞的免疫促進(jìn)作用17-19
• 2.3 中藥多糖對(duì)B淋巴細(xì)胞的免疫促進(jìn)作用19-20
• 2.4 中藥多糖對(duì)細(xì)胞因子的免疫促進(jìn)作用20-22
• 2.5 中藥多糖對(duì)雞新城疫抗體效價(jià)(ND)以及綿羊紅細(xì)胞免疫抗體滴度(SRBC)的影響22
• 2.6 中藥多糖對(duì)免疫球蛋白的影響22-23
• 3 雞MHC B-L β基因多態(tài)性與免疫性狀的關(guān)系23-24
• 第二章 中藥復(fù)方多糖的提取純化24-28
• 1 材料與方法24-26
• 1.1 試驗(yàn)材料24
• 1.2 試驗(yàn)方法24-26
• 2 結(jié)果與分析26
• 2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制26
• 2.2 中藥復(fù)方多糖含量的計(jì)算26
• 3 討論26-27
• 4 結(jié)論27-28
• 第三章 免疫功能相關(guān)MHC B-L β II基因型雞的多態(tài)性分析28-33
• 1 材料與方法28-30
• 1.1 試驗(yàn)材料28-29
• 1.2 試驗(yàn)方法29-30
• 2 結(jié)果與分析30-32
• 2.1 PCR-SSCP基因型檢測(cè)30-31
• 2.2 基因序列結(jié)果分析31-32
• 3 討論32
• 4 結(jié)論32-33
• 第四章 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ血清濃度的影響33-41
• 1 材料與方法34-35
• 1.1 試驗(yàn)材料34
• 1.2 試驗(yàn)方法34-35
• 2 結(jié)果與分析35-39
• 2.1 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞IL-2 含量的影響35-36
• 2.2 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞IL-4 含量的影響36
• 2.3 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞IL-6 含量的影響36-37
• 2.4 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞IFN-γ含量的影響37-38
• 2.5 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞TNF-α含量的影響38-39
• 3 討論39-40
• 4 結(jié)論40-41
• 第五章 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞新城疫抗體效價(jià)以及IgG、Ig M血清濃度的影響41-47
• 1 材料與方法41-42
• 1.1 試驗(yàn)材料41-42
• 1.2 試驗(yàn)方法42
• 2 結(jié)果與分析42-45
• 2.1 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞ND抗體含量的影響42-43
• 2.2 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞IgG、IgM含量的影響43-45
• 3 討論45-46
• 4 結(jié)論46-47
• 第六章 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞CD4+、CD8+含量，，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率以及綿羊紅細(xì)胞滴度的影響47-54
• 1 材料與方法47-48
• 1.1 試驗(yàn)材料47-48
• 1.2 試驗(yàn)方法48
• 2 結(jié)果與分析48-52
• 2.1 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞CD4+含量的影響48-49
• 2.2 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞CD8+含量的影響49-50
• 2.3 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響50-51
• 2.4 一定純度中藥復(fù)方多糖對(duì)MHC B-LβⅡ不同基因型雞SRBC滴度的影響51-52
• 3 討論52-53
• 4 結(jié)論53-54
• 全文結(jié)論54
• 創(chuàng)新點(diǎn)54-55
• 參考文獻(xiàn)55-62
• 致謝62-63
• 作者簡(jiǎn)介63-64
• 導(dǎo)師評(píng)閱表64

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本文編號(hào)：739555