發(fā)布時間：2017-08-11 13:11

  本文關(guān)鍵詞：精原細胞介導(dǎo)法制備轉(zhuǎn)基因綿羊以及后代肉品質(zhì)測定

  更多相關(guān)文章： 羊 成肌調(diào)節(jié)因子 MyoG 精原細胞介導(dǎo)法 屠宰性能 肉品質(zhì)

【摘要】：骨骼肌是目前肉羊育種中的重要經(jīng)濟性狀,成肌調(diào)節(jié)因子(Myogenic regulatory factors, MRFs)負責調(diào)控整個骨骼肌的發(fā)生過程,MyoG是MRFs家族中唯一在所有骨骼肌細胞中均有表達的基因,在中胚層成肌細胞遷移至靶組織及完成增殖后肌管的形成過程中起調(diào)控作用,其成肌分化作用是其它MRFs家族成員無法代替的。本研究通過精原細胞介導(dǎo)法制備MyoG綿羊并對轉(zhuǎn)基因后代進行肉質(zhì)分析,旨在驗證該方法制備轉(zhuǎn)基因綿羊的可行性,同時也為生產(chǎn)實踐提供參考依據(jù),為社會帶來一定的經(jīng)濟效益。首先,通過精原細胞介導(dǎo)法,將攜帶有MyoG的重組載體轉(zhuǎn)入3只第一批成年公羊睪丸內(nèi),單側(cè)注射。注射40天后,摘取公羊睪丸,從附睪中采集精液,通過對綿羊精液涂片檢查、睪丸切片觀察、精子基因組DNA經(jīng)PCR檢測、精子總蛋白經(jīng)Western blot檢測,發(fā)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染效率可達到30%,初步驗證通過精原細胞介導(dǎo)法可以高效的將外源基因MyoG轉(zhuǎn)進綿羊精子中�；谏鲜龀墒斓姆椒w系,再次注射3只公羊,然后分別將公羊放入三個母羊圈中,每個圈大約10頭母羊,進行自然交配,獲得48頭G1代羔羊,經(jīng)過DNA和蛋白水平檢測,最終獲得1頭轉(zhuǎn)基因個體,陽性率為2.08%,將后代進行屠宰,對后代的屠宰性能、肉品質(zhì)以及肌肉纖維數(shù)等指標進行測定,發(fā)現(xiàn)MyoG過表達綿羊的肌纖維數(shù)高于對照組,而且屠宰性能跟陰性個體相比也有所提高,通過對肌肉的肉色、pH值、剪切力、蒸煮損失等指標進行測定,發(fā)現(xiàn)MyoG過表達綿羊的肉品質(zhì)與陰性個體相比也有所改善。
【關(guān)鍵詞】：羊 成肌調(diào)節(jié)因子 MyoG 精原細胞介導(dǎo)法 屠宰性能 肉品質(zhì)
【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S826
【目錄】：

• 中文摘要2-3
• Abstract3-7
• 符號表(縮略表語)7-9
• 第一章 文章綜述9-16
• 1. 我國羊肉市場現(xiàn)狀9
• 2. 生肌調(diào)節(jié)因子MRFs家族9-10
• 3. MyoG基因研究進展10-13
• 3.1 MyoG基因介紹10
• 3.2 MyoG基因的結(jié)構(gòu)10
• 3.3 MyoG基因的生物學(xué)功能10-11
• 3.4 MyoG基因的表達11-12
• 3.5 MyoG表達的調(diào)節(jié)12
• 3.6 MyoG基因與生產(chǎn)性能的關(guān)系12-13
• 4. 動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)與轉(zhuǎn)基因羊13-14
• 4.1 反轉(zhuǎn)錄病毒法13
• 4.2 原核顯微注射法13-14
• 4.3 胚胎干細胞介導(dǎo)法14
• 4.4 精原細胞介導(dǎo)法14
• 5. 睪丸注射制備轉(zhuǎn)基因羊14-15
• 6. 轉(zhuǎn)基因羊生產(chǎn)性能檢測15
• 7. 本研究的目的和意義15-16
• 第二章 MyoG轉(zhuǎn)基因綿羊的制備及后代肉品質(zhì)測定16-32
• 1. 材料與方法17-22
• 1.1. 材料17
• 1.2. 方法與步驟17-22
• 2. 結(jié)果22-28
• 2.1 睪丸組織冰凍切片和精子熒光檢測22-24
• 2.1.1 涂片檢查MyoG基因在精液中的熒光表達情況22-23
• 2.1.2 睪丸精液DNA水平檢測23-24
• 2.2 睪丸組織冰凍切片觀察目的基因熒光表達24
• 2.3 睪丸精液蛋白水平檢測24-25
• 2.4 利用精原細胞介導(dǎo)法制備MyoG綿羊25
• 2.5 G1代羔羊血樣DNA水平檢測25-26
• 2.6 G1代羔羊耳樣組織蛋白檢測26
• 2.7 轉(zhuǎn)基因后代羊的屠宰率及肉品質(zhì)測定26-28
• 3. 討論28-31
• 4 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-38
• 致謝38-39

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 R.Wilkinson;尚永豐;;未孕小母牛感染和免疫接種牛種布魯氏菌后的體液和細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答[J];中國獸藥雜志;1989年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 董忠軍;王靜;陳永艷;魏海明;田志剛;;NK細胞介導(dǎo)的新型小鼠肝炎模型的建立[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

2 漆明;竇偉;張敬;劉菊年;;復(fù)發(fā)性口瘡與細胞介導(dǎo)性免疫疾病的對照研究[A];FDI、CSA臨床口腔進展學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];1999年

3 石斌;殷惠軍;黃秀英;孫方臻;;HLA-G抑制NK細胞和T細胞介導(dǎo)的對豬內(nèi)皮細胞的細胞毒作用[A];中國細胞生物學(xué)學(xué)會醫(yī)學(xué)細胞生物學(xué)、免疫細胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2002年

4 黃勇;童德文;;IL-12在自然殺傷細胞的自調(diào)控機制[A];2012年中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會暨中國病理生理學(xué)會動物病理生理專業(yè)委員會學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

5 王琳源;關(guān)寧;林曉萍;;Treg細胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答在牙周炎小鼠中的研究[A];第十次全國牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2014年

6 田炯;陳江華;;T細胞適配蛋白ADAP在小鼠器官移植中的作用研究[A];2008年浙江省腎臟病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王樹森;HLA-G抑制人NK、T細胞介導(dǎo)的異種移植排斥反應(yīng)的研究[D];華中科技大學(xué);2006年

2 李丹;FTY720對CD4~+記憶T細胞介導(dǎo)的移植物排斥反應(yīng)的抑制作用的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 肖天榮;精原細胞介導(dǎo)法制備轉(zhuǎn)基因綿羊以及后代肉品質(zhì)測定[D];揚州大學(xué);2016年

2 張曉昂;高劑量和低劑量的白細胞介素-2對小鼠T細胞介導(dǎo)的肝炎的不同影響[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2009年

，

本文編號：656285