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金黃色葡萄球菌A型腸毒素雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2017-08-08 20:27

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【摘要】:【目的】建立一種快速、靈敏、特異的金黃色葡萄球菌A型腸毒素(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)檢測(cè)方法。【方法】以原核表達(dá)的可溶性重組SEA蛋白為免疫原,獲得特異性強(qiáng)、親和力高的單克隆抗體作為捕獲抗體,同時(shí)制備抗SEA兔多抗血清作為檢測(cè)抗體建立雙抗體夾心ELISA(Double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)檢測(cè)方法!窘Y(jié)果】該方法對(duì)SEA的線性檢測(cè)區(qū)間為2-128μg/L(y=1.102x-0.07,R2=0.994),檢測(cè)下限為1.89μg/L,與SEB、SEC2和SED之間無交叉反應(yīng);鮮奶SEA人工污染試驗(yàn)測(cè)定回收率為94%-114%,變異系數(shù)小于10%。應(yīng)用該方法對(duì)46株金黃色葡萄球菌水產(chǎn)品分離株和164株奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌分離株的體外培養(yǎng)上清進(jìn)行檢測(cè),陽性率分別為4.4%和50.6%,表明SEA污染普遍存在!窘Y(jié)論】建立的DAS-ELISA方法特異性、靈敏度和穩(wěn)定性好,為檢測(cè)SEA的食源性污染提供了有效手段。
【作者單位】: 浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院浙江省動(dòng)物預(yù)防醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】金黃色葡萄球菌A型腸毒素 單克隆抗體 雙抗體夾心ELISA
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(No.2012AA101602)~~
【分類號(hào)】:S852.611
【正文快照】: 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是一種廣泛分布的重要人獸共患病病原,其致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素以及侵襲性酶[1],包括腸毒素(Staphylococcal enterotoxins,SEs)、溶血素、殺白細(xì)胞素、血漿凝固酶等。該菌不僅能夠引起人和動(dòng)物的化膿性感染及膿毒敗血癥,

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):641904

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