本文關(guān)鍵詞：口瘡病毒AH-GY13株的分離鑒定及B2L基因的原核表達(dá)

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【摘要】：為確定安徽地區(qū)某山羊場(chǎng)發(fā)生的疑似口瘡(orf)的病原,經(jīng)過(guò)臨床診斷、PCR檢測(cè)以及HeLa細(xì)胞培養(yǎng)等途徑,確定其為口瘡病毒(ORFV),并命名為AH-GY13株。根據(jù)GenBank中公布的口瘡病毒B2L囊膜蛋白基因序列,設(shè)計(jì)引物,用PCR方法擴(kuò)增口瘡病毒B2L基因,并將此基因序列及其推導(dǎo)的氨基酸序列與其他不同來(lái)源的ORFV分離株進(jìn)行比較。結(jié)果顯示,AH-GY13株與選取的10株毒株的核苷酸序列同源性在97.4%~99.3%之間,氨基酸同源性在97.9%~99.7%之間;進(jìn)化樹(shù)分析顯示,此毒株與遼寧省分離株屬于同一分支。將該基因定向插入到原核表達(dá)載體pET-32a(+)中,構(gòu)建原核表達(dá)載體pET-32a(+)-B2L。轉(zhuǎn)化BL21,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),B2L基因獲得表達(dá),以包涵體的形式存在,通過(guò)優(yōu)化誘導(dǎo)時(shí)間和IPTG的濃度,確定了表達(dá)B2L基因的最佳誘導(dǎo)條件:IPTG終濃度為1 mmol/L,37℃誘導(dǎo)4 h。Western-blot分析表明,表達(dá)產(chǎn)物具有良好的免疫活性。上述結(jié)果為進(jìn)一步研究ORFV B2L囊膜蛋白的結(jié)構(gòu)與功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 口瘡病毒 分離鑒定 BL基因 序列分析 原核表達(dá) 蛋白質(zhì)免疫印跡
【分類號(hào)】：S858.27
【正文快照】： 口瘡病毒(orf virus,ORFV)是引起山羊、綿羊的接觸性嗜上皮性傳染病的病原[1]。山羊?qū)RFV易感,山羊羔和綿羊羔最為敏感,群體發(fā)病,在春末夏初高熱潮濕季節(jié)易發(fā)病,多群發(fā)于1~3月齡的山羊羔和綿羊羔,病死率可達(dá)20%,是危害山羊綿羊養(yǎng)殖業(yè)的重要傳染病病原,患病山羊和綿羊以及攜帶

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 改樹(shù)青;王志明;劉慧純;;羊傳染性口瘡病毒的生物學(xué)試驗(yàn)[J];遼寧畜牧獸醫(yī);1988年02期

2 ;羊兔天地[J];北方牧業(yè);2004年17期

3 張談順;劉艷芳;;山羊傳染性膿包瘡的預(yù)防及治療[J];當(dāng)代畜牧;2011年12期

4 ;[J];;年期

，

本文編號(hào)：640606