本文關(guān)鍵詞：豬PRRSV和PCV2雙重TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立及應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型 雙重Man熒光定量PCR

【摘要】：為快速及定量的檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)和豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV2),本研究根據(jù)GenBank中登錄的PRRSV和PCV2基因組確定了其基因保守序列,分別設(shè)計其特異性探針和引物,建立了PRRSV-PCV2雙重TaqMan熒光定量PCR檢測方法。特異性試驗顯示該方法對豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬偽狂犬病毒及豬瘟病毒的檢測結(jié)果均為陰性。對PRRSV和PCV2的檢測靈敏度均達(dá)10拷貝/μl。重復(fù)性試驗結(jié)果顯示批內(nèi)、批間變異系數(shù)均小于4%。應(yīng)用該方法對60份已知臨床病料進(jìn)行檢測,結(jié)果檢出PRRSV和PCV2陽性感染率分別為30.67%和35%,混合感染率為11.67%,與已知結(jié)果的符合率為100%。該方法具有敏感、快速、特異、定量、重復(fù)性、穩(wěn)定性好等優(yōu)點,在用于PRRSV和PCV2感染的快速鑒別診斷的同時,在細(xì)胞培養(yǎng)特性以及疫苗生產(chǎn)檢測中也具有廣闊的應(yīng)用前景。
【作者單位】： 廣東海大集團股份有限公司;廣東海大畜牧獸醫(yī)研究院;
【關(guān)鍵詞】： 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型 雙重Man熒光定量PCR
【基金】：廣東省科技項目(2013B020401003)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： 豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive andrespiratory syndrome,PRRS)和豬圓環(huán)病毒II型(Porcine circovirus type2,PCV2)均是嚴(yán)重危害豬只的病毒性疾病,常以單獨或混合感染的方式感染豬,造成較高的發(fā)病率和死亡率,并通過各種傳播途徑進(jìn)行快速傳播[1]。其中PRRS是由PRRS病

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 霍紅;李業(yè)南;薛遙;郭立平;王曉磊;步志高;華榮虹;;豬流行性乙型腦炎病毒TaqMan熒光定量PCR方法的建立[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2014年07期

2 季新成;史茜;郭春娟;王科珂;冉多良;;牛病毒性腹瀉病毒內(nèi)標(biāo)雙重TaqMan熒光RT-PCR方法的建立及初步應(yīng)用[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2014年08期

3 鄭衛(wèi)東,鄭懷競,楊澤,從冠寧;通用TaqMan探針技術(shù)在apoE基因3937T/C單核苷酸多態(tài)性檢測中的應(yīng)用[J];臨床檢驗雜志;2004年03期

4 崔銀秋;張全超;謝承志;周慧;;新型TaqMan-MB熒光探針測定古DNA模板含量[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2007年01期

5 周倫江;王隆柏;方桂友;魏宏;車勇良;陳如敬;莊向生;;變異型豬繁殖與呼吸綜合征病毒TaqMan熒光定量RT-PCR方法的建立與初步應(yīng)用[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2010年08期

6 劉毅;吳志明;閆若潛;趙明軍;王東方;趙雪麗;劉梅芬;程俊貞;薛曉;李寧;;犬細(xì)小病毒TaqMan MGB熒光定量PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[J];中國畜牧獸醫(yī);2014年06期

7 栗冬梅;宋秀平;王君;劉起勇;;TaqMan-MGB探針檢測文森巴爾通體博格霍夫亞種實時熒光定量PCR方法的建立及應(yīng)用[J];微生物學(xué)報;2013年09期

8 萬春和;程龍飛;邵周伍林;劉思國;黃瑜;張云;;鴨疫里默氏桿菌TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立[J];中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報;2014年06期

9 翟新驗,盧勝明,劉鈞;實時TaqMan PCR技術(shù)在獸醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J];實驗動物科學(xué)與管理;2002年02期

10 曹偉偉;郭抗抗;許信剛;寧蓬勃;劉偉;程敏;董玲娟;徐磊;高婉俊;任敏;;豬圓環(huán)病毒Ⅱ型TaqMan實時熒光定量PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2013年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 弋英;陳繼明;王志亮;;TaqMan檢測技術(shù)——未來的病毒病常規(guī)檢測手段[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集（上）[C];2003年

2 袁秀芳;劉鄧;徐麗華;王一成;;豬傳染性胃腸炎病毒和豬流行性腹瀉病毒多重TaqMan實時熒光定量RT-PCR檢測方法的建立及其初步應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2009年

3 Yachun Su;Shanshan Wang;Jinlong Guo;Bantong Xue;Liping Xu;Youxiong Que;;A TaqMan real-time PCR assay for detection and quantification of Sporisorium scitamineum in sugarcane[A];中國作物學(xué)會2013年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2013年

4 Songhong Wei;Theo van der Lee;Richard van Hoof;Marga van Gent-Pelzer;Els verstappen;Cees Waalwijk;Zhiheng Liu;;Quantitative detection of Fusarium graminearum and its chemotypes by TaqMan PCR[A];中國菌物學(xué)會第六屆會員代表大會（2014年學(xué)術(shù)年會）暨貴州省食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇會議摘要[C];2014年

5 高志強;宋立;張鶴曉;寧宜寶;喬彩霞;楊承槐;吳丹;谷強;;豬鏈球菌通用及2型TaqMan熒光PCR檢測技術(shù)建立與應(yīng)用[A];京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會暨新思想、新觀點、新方法論壇論文集[C];2008年

6 李文濤;李文潔;劉淑清;汪洋;楊昆;鄒浩勇;何啟蓋;;豬圓環(huán)病毒2型TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(上冊)[C];2010年

7 楊苗;Cheng An-chun;Wang Ming-shu;Xing Hong-yi;;Development and Application of a One-step Real-time TaqMan RT-PCR Assay for Detection of Duck Hepatitis Virus Type 1[A];第五屆中國畜牧科技論壇論文集[C];2011年

8 拜廷陽;趙德明;吳志明;閆若潛;趙明軍;劉梅芬;;豬巨細(xì)胞病毒TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

9 路斌;袁秀芳;徐麗華;李軍星;王一成;;一步法TaqMan~汶探針實時熒光定量RT-PCR快速檢測豬繁殖與呼吸綜合征方法的建立及初步應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2013年

10 劉陽;史子學(xué);魏建超;邵東華;王皓婷;賈園;高小琪;王宗堯;晏文君;張書蕭;劉哲;王水明;王志亮;馬志永;;埃博拉病毒Z/S亞型一步法TaqMan MGB熒光定量RT-PCR檢測方法的建立[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會第三次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王玄珂;豬流行性腹瀉病毒TaqMan熒光定量RT-PCR檢測方法的建立及其初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 霍紅;流行性乙型腦炎病毒TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

3 肖文;豬傳染性胃腸炎病毒TaqMan熒光定量RT-PCR方法的建立及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 丁維民;TaqMan-MGB探針雙重?zé)晒舛縋CR方法絕對定量MDV-Ⅰ和HVT[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

5 李霞;CAEV TaqMan PCR檢測及重組SU蛋白的真核表達(dá)[D];天津大學(xué);2012年

6 官家明;美洲型及歐洲型PRRSV多重TaqMan熒光定量RT-PCR鑒別檢測方法的建立及應(yīng)用[D];廣西大學(xué);2014年

7 呂品;狐源CDV H、F、N基因序列分析及其TaqMan熒光定量RT-PCR診斷方法的建立[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 方桂友;TaqMan熒光定量PCR檢測PRRSV(FJ06株)在人工感染豬體內(nèi)分布規(guī)律[D];福建農(nóng)林大學(xué);2009年

9 王韜;應(yīng)用TaqMan-MGB探針實時定量PCR技術(shù)檢測豬KIT基因型的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

10 王海波;重要致病性弧菌TaqMan實時PCR檢測方法的建立[D];山東大學(xué);2009年

，

本文編號：640720