發(fā)布時(shí)間：2017-06-09 22:02

  本文關(guān)鍵詞：咪達(dá)唑侖對鈣離子通路的影響及臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)的目的是觀察注射不同劑量的咪達(dá)唑侖對Ca2+—CaM—Ca MKII通路的影響,研究通路內(nèi)離子和相關(guān)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子含量的變化。進(jìn)一步探究咪達(dá)唑侖對大腦神經(jīng)中樞的抑制作用,以及對學(xué)習(xí)記憶功能的影響,為日后臨床研究上合理利用咪達(dá)唑侖提供指導(dǎo)和依據(jù)。方法:首先準(zhǔn)備wistar大鼠72只,從中任意選取24只,并將它們按照不同咪達(dá)唑侖劑量分成四組進(jìn)行水迷宮試驗(yàn):按照各自要求給藥后,老鼠清醒即刻進(jìn)行水迷宮定位航行試驗(yàn),連續(xù)5天,在第六天的同一時(shí)間,再次給藥,清醒即刻進(jìn)行大鼠的空間探索試驗(yàn)。將剩余48只大鼠隨機(jī)分為4組,在腹腔注射不同劑量咪達(dá)唑侖后的不同時(shí)間點(diǎn)斷頭處死大鼠,分離海馬組織,用RT-PCR方法檢測CaMK和Ca MKⅡmRNA表達(dá),用比色法檢測Ca2+離子的表達(dá)。結(jié)果:1.水迷宮結(jié)果顯示:被注射入咪達(dá)唑侖的三組實(shí)驗(yàn)大鼠,在定位航行試驗(yàn)中和生理鹽水組相比,表現(xiàn)出更長的逃避潛伏期。與此同時(shí)在空間探索實(shí)驗(yàn)中,第三象限停留時(shí)間比率降低,穿越實(shí)驗(yàn)平臺(tái)結(jié)果也呈現(xiàn)減小趨勢,并且給藥劑量越大,大鼠的平均逃避潛伏期越長,穿越平臺(tái)次數(shù)和第三象限停留時(shí)間比率均越低。各組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯(P0.05)。2.用RT-PCR方法檢測大鼠海馬中Ca M和CaMKII mRNA表達(dá)的結(jié)果顯示,咪達(dá)唑侖劑量依賴式的抑制了Ca M和CaMKII mRNA的表達(dá),劑量越大,抑制越明顯。各組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯(P0.05)。3.比色法測定的Ca2+濃度也隨著給藥劑量的升高而降低。各組統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯(P0.05)。結(jié)論:行為學(xué)與生物學(xué)檢測結(jié)果相一致,推測咪達(dá)唑侖可能通過Ca2+—Ca M—CaMKII通路的作用機(jī)制來導(dǎo)致大鼠學(xué)習(xí)記憶的短期損傷。
【關(guān)鍵詞】：咪達(dá)唑侖 Ca2+—Ca M—Ca MKII信號(hào)通路 學(xué)習(xí)記憶 海馬
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S859.7
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-10
• 1 引言10-20
• 1.1 咪達(dá)唑侖概述10-11
• 1.2 咪達(dá)唑侖的臨床麻醉概述11-14
• 1.2.1 咪達(dá)唑侖麻醉前用藥應(yīng)用概述11
• 1.2.2 咪達(dá)唑侖全身麻醉誘導(dǎo)和維持應(yīng)用概述11-12
• 1.2.3 咪達(dá)唑侖全憑靜脈麻醉(TIVA)應(yīng)用概述12
• 1.2.4 咪達(dá)唑侖腰麻、硬膜外麻醉應(yīng)用概述12-14
• 1.3 咪達(dá)唑侖在癲癇持續(xù)狀態(tài)的應(yīng)用概述14
• 1.4 學(xué)習(xí)記憶與海馬14-18
• 1.4.1 學(xué)習(xí)記憶14-15
• 1.4.2 海馬15-16
• 1.4.3 與學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的行為學(xué)檢測16-18
• 1.5 Ca~(2+)-Ca M-CaMKII通路18-19
• 1.5.1 Ca~(2+)-CaM信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路18-19
• 1.5.2 CaMKⅡ的生物學(xué)特性及與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系19
• 1.6 實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c意義19-20
• 2 材料與方法20-27
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料20-21
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 2.1.2 主要試劑20
• 2.1.3 主要儀器和設(shè)備20-21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法21-27
• 2.2.1 動(dòng)物分組21-22
• 2.2.2 基因克隆和實(shí)時(shí)熒光PCR22-24
• 2.2.3 比色法對鈣離子濃度的測量24-26
• 2.2.4 水迷宮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)26-27
• 3 結(jié)果27-36
• 3.1 基因克隆結(jié)果和實(shí)時(shí)熒光PCR27-32
• 3.1.1 目的基因片段PCR擴(kuò)增結(jié)果27
• 3.1.2 對CaM和CaMKⅡ的實(shí)時(shí)熒光PCR方法的建立27-29
• 3.1.3 不同濃度的咪達(dá)唑侖對CaM、CaMKⅡ的mRNA表達(dá)量的影響29-32
• 3.2 鈣離子濃度32-33
• 3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線32
• 3.2.2 鈣離子濃度分析32-33
• 3.3 水迷宮結(jié)果33-36
• 3.3.1 不同濃度咪達(dá)唑侖對空間學(xué)習(xí)記憶影響33-35
• 3.3.2 定位航行實(shí)驗(yàn)路線35-36
• 4 討論36-39
• 4.1 確定給藥劑量與采樣時(shí)間的方法36-37
• 4.2 水迷宮檢測方法的優(yōu)缺點(diǎn)37
• 4.3 咪達(dá)唑侖對大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響37-39
• 5 結(jié)論39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：436736