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南寧市本地犬三種血液原蟲的初步調(diào)查與犬伊氏錐蟲病例人工復制實驗研究

發(fā)布時間:2017-06-08 08:01

  本文關鍵詞:南寧市本地犬三種血液原蟲的初步調(diào)查與犬伊氏錐蟲病例人工復制實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本次實驗就巴貝斯蟲(Babesia)、犬肝簇蟲(Hepatozoon canis)、伊氏錐蟲(Trypanosoma evansi)這三種血液原蟲展開在廣西南寧市本地犬中的流行病學調(diào)查;并通過犬人工接種伊氏錐蟲廣西株,對犬伊氏錐蟲病的病程進行觀察與研究;分別使用血蟲凈、普得安對接種成功的伊氏錐蟲病犬進行治療,對這兩種藥物的治療效果進行初步探究,為臨床用藥提供參考。方法:2013年11月至2014年11月,對在南寧市廣西大學動物醫(yī)院進行就診的犬只進行血液采集,制作血涂片進行染色鏡檢,并將采集的血液進行凍存,隨意抽取160份血樣分別進行三種血液原蟲的PCR檢測,將獲得的目標條帶進行克隆測序后,通過BLAST軟件在線比對分析。以本實驗室保存的從水牛體內(nèi)分離到的伊氏錐蟲廣西株為病原,取肉犬8只,3只通過靜脈接種、2只通過口服接種,3只為對照組,僅對病程進行觀察與研究。另取3只肉犬接種病原,使用血蟲凈、普得安進行治療。血蟲凈連用三天,劑量為0.15-0.2 ml/只;普得安用2次,隔天1次,劑量為3.5 mg/kg。觀察比較這兩種藥物對犬伊氏錐蟲病的治療效果。結(jié)果:通過PCR方法檢測出巴貝斯蟲陽性4份,感染率2.5%,序列比對顯示均為韋氏巴貝斯蟲亞種;檢出1份犬肝簇蟲,感染率0-625%;伊氏錐蟲未檢測到陽性。犬人工接種伊氏錐蟲的實驗中,通過靜脈或者口服接種病原均可引起犬的感染,其中通過靜脈接種的2只犬分別在接種后第3和第4天死亡;口服感染的1只犬在接種后第6天于血液中可見蟲體,第10天死亡。慢性感染犬只外周血中的蟲體呈周期性出現(xiàn)。期間,犬的體溫與蟲體的周期性變化呈正相關。治療結(jié)果顯示,血蟲凈對犬的伊氏錐蟲沒有效果,普得安可緩解犬只的情況,但是一個療程未能完全治愈犬的伊氏錐蟲病。我們應當提高對犬血液原蟲病的重視,做好防控措施。
【關鍵詞】: 巴貝斯蟲 犬肝簇蟲 伊氏錐蟲 PCR 病程
【學位授予單位】:廣西大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S858.292
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-12
  • 縮略詞表12-13
  • 第一部分 綜述13-24
  • 1.1 巴貝斯蟲病13-17
  • 1.1.1 犬巴貝斯蟲病病原的分類與形態(tài)14
  • 1.1.2 犬巴貝斯蟲病原的生活史14
  • 1.1.3 犬巴貝斯蟲病原的流行病學14-15
  • 1.1.4 犬巴貝斯蟲病的臨床癥狀15
  • 1.1.5 犬巴貝斯蟲病的診斷15-16
  • 1.1.6 犬巴貝斯蟲病的研究近況16-17
  • 1.2 肝簇蟲病17-20
  • 1.2.1 犬肝簇蟲的病原特征17-18
  • 1.2.2 犬肝簇蟲的生活史18
  • 1.2.3 犬肝簇蟲的流行病學18
  • 1.2.4 犬肝簇蟲病臨床癥狀18-19
  • 1.2.5 犬肝簇蟲的診斷19-20
  • 1.2.6 犬肝簇蟲的研究近況20
  • 1.3 錐蟲病20-24
  • 1.3.1 伊氏錐蟲病原形態(tài)21
  • 1.3.2 伊氏錐蟲的生活史21
  • 1.3.3 伊氏錐蟲流行病學21
  • 1.3.4 犬伊氏錐蟲病的臨床癥狀21-22
  • 1.3.5 伊氏錐蟲病的診斷22-23
  • 1.3.6 伊氏錐蟲病的研究現(xiàn)狀23-24
  • 第二部分 實驗部分24-65
  • 第一章 南寧市本地犬三種血液原蟲的初步調(diào)查24-36
  • 2.1 實驗材料24-25
  • 2.1.1 樣品來源24
  • 2.1.2 實驗材料與器材24-25
  • 2.2 實驗方法25-28
  • 2.2.1 樣品采集和處理25
  • 2.2.2 DNA抽提25
  • 2.2.3 引物的選擇與PCR擴增25-27
  • 2.2.4 PCR擴增產(chǎn)物的檢測與回收27
  • 2.2.5 TA-克隆測序27-28
  • 2.3 實驗結(jié)果28-30
  • 2.3.1 PCR檢測結(jié)果與序列比對28-29
  • 2.3.2 PCR陽性犬的臨床病例記錄29-30
  • 2.3.3 血涂片染色鏡檢30
  • 2.4 討論30-34
  • 2.4.1 巴貝斯蟲的結(jié)果分析30-33
  • 2.4.2 犬肝簇蟲的結(jié)果分析33
  • 2.4.3 蜱傳巴貝斯蟲與犬肝簇蟲的綜合分析33-34
  • 2.4.4 伊氏錐蟲的結(jié)果分析34
  • 2.5 本章小結(jié)34-36
  • 第二章 犬人工接種伊氏錐蟲的病程研究36-55
  • 3.1 材料與試劑36-37
  • 3.1.1 供試動物36
  • 3.1.2 實驗儀器設備36
  • 3.1.3 實驗試劑36-37
  • 3.1.4 蟲體復蘇37
  • 3.2 實驗方法37-39
  • 3.2.1 實驗動物分組37
  • 3.2.2 觀察指標37-38
  • 3.2.3 病理解剖38
  • 3.2.4 病理切片的制作38-39
  • 3.2.5 PCR對伊氏錐蟲的檢測39
  • 3.3 結(jié)果與分析39-51
  • 3.3.1 顯微鏡觀察蟲體39-40
  • 3.3.2 感染情況與死亡情況40
  • 3.3.3 外周血中蟲體數(shù)的統(tǒng)計40-43
  • 3.3.4 臨床癥狀43-45
  • 3.3.5 病理解剖45
  • 3.3.6 組織病理切片觀察45-51
  • 3.3.7 PCR對伊氏錐蟲的檢測51
  • 3.4 討論51-53
  • 3.4.1 感染情況51-52
  • 3.4.2 外周血中蟲體的觀察52
  • 3.4.3 臨床癥狀52-53
  • 3.4.4 病理組織切片53
  • 3.4.5 PCR檢測53
  • 3.5 本章小結(jié)53-55
  • 第三章 兩種藥物對犬伊氏錐蟲病治療效果的初探55-64
  • 4.1 材料與試劑55
  • 4.1.1 供試動物55
  • 4.1.2 實驗試劑與儀器55
  • 4.1.3 實驗藥物55
  • 4.2 實驗方法55-56
  • 4.2.1 實驗動物分組與給藥方法55-56
  • 4.2.2 觀察指標56
  • 4.3 結(jié)果與分析56-62
  • 4.3.1 外周血中蟲體的觀察56-58
  • 4.3.2 臨床癥狀58
  • 4.3.3 病理解剖58
  • 4.3.4 組織病理切片觀察58-62
  • 4.3.4 PCR對病原的檢測62
  • 4.4 討論62-63
  • 4.5 本章小結(jié)63-64
  • 第四章 全文總結(jié)64-65
  • 參考文獻65-74
  • 致謝74-75
  • 攻讀學位期間發(fā)表論文情況75

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本文編號:431829

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