本文關(guān)鍵詞：木蝴蝶粗提物對金黃色葡萄球菌小鼠肺炎治療作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：金黃色葡萄球菌(金葡菌)(Staphylococcus aureus,S.aureus)是臨床上重要的機(jī)會致病菌,為人獸共患革蘭氏陽性病原菌,可引起人和動物多種致死性感染。近年來由于抗生素的長期使用以及耐藥性的廣泛傳播和獲得使得金葡菌的耐藥性日益嚴(yán)重,尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus,VRSA)的出現(xiàn)使得金葡菌的治療難度日益加大,對社會造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失和危害。近年來的研究發(fā)現(xiàn)金葡菌的致病力與其分泌的多種毒力因子密切相關(guān),其中α-溶血素是由大部分致病性金葡菌分泌的一種成孔毒素,可裂解靶細(xì)胞并導(dǎo)致疾病的發(fā)生,是金葡菌引起多種疾病發(fā)生的重要毒力因子,提示α-溶血素是抗金葡菌感染的重要潛在靶標(biāo)。本實驗以金葡菌α-溶血素為靶標(biāo),根據(jù)其溶血活性首先建立了α-溶血素的篩選平臺,結(jié)果發(fā)現(xiàn)木蝴蝶粗提物在較低濃度下(4μg/m L-32μg/m L)可直接中和α-溶血素介導(dǎo)的成孔活性,但是木蝴蝶粗提物對α-溶血素的分泌并無影響;另外,木蝴蝶粗提物對金葡菌的抗菌活性較低,其MIC值為512μg/m L-1024μg/m L,而在木蝴蝶粗提物有效濃度范圍內(nèi)(4μg/m L-32μg/m L)其對金葡菌的生長幾乎沒有任何影響。上述結(jié)果表明在無抗菌活性濃度范圍內(nèi)(4μg/m L-32μg/m L)的木蝴蝶粗提物可直接中和α-溶血素的成孔活性,提示木蝴蝶粗提物是一種潛在的抗金葡菌感染的抗毒力候選復(fù)合物。為了進(jìn)一步驗證木蝴蝶粗提物對金葡菌致病力的影響,本實驗體外建立了金葡菌和人肺癌上皮細(xì)胞A549共感染體系,通過Live/Dead實驗和LDH實驗分析了木蝴蝶粗提物對金葡菌介導(dǎo)A549細(xì)胞損傷作用的影響,結(jié)果表明在共感染體系內(nèi)加入木蝴蝶后,A549細(xì)胞存活率顯著提高,細(xì)胞形態(tài)明顯得到改善,另外A549細(xì)胞釋放LDH的水平也顯著降低,上述研究結(jié)果表明木蝴蝶粗提物可顯著降低金葡菌介導(dǎo)A549細(xì)胞損傷作用,進(jìn)一步提示木蝴蝶粗提物是一種潛在的抗金葡菌感染的抗毒力候選復(fù)合物。最后,本實驗建立了金葡菌小鼠肺炎模型,通過死亡率統(tǒng)計、病理分析以及肺臟菌落定植數(shù)等實驗進(jìn)一步驗證了木蝴蝶粗提物對小鼠金葡菌肺炎的治療作用,結(jié)果表明經(jīng)木蝴蝶粗提物治療后顯著降低感染小鼠的致死率,改善感染小鼠肺臟的病理損傷以及降低感染小鼠肺臟菌落定植數(shù)。綜上所述,幾乎無抗菌活性的木蝴蝶粗提物在較低濃度范圍內(nèi)即可直接中和α-溶血素的成孔活性;體外降低金葡菌對A549細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞損傷作用;體內(nèi)抑制金葡菌介導(dǎo)小鼠肺炎的致病作用。這一結(jié)果提示木蝴蝶粗提物具有一定潛力可開發(fā)為抗金葡菌感染的抗毒力藥物,也為金葡菌及其他病原菌感染提供新的抗感染策略和候選復(fù)合物。
【關(guān)鍵詞】：金黃色葡萄球菌 抗毒力 α-溶血素 木蝴蝶粗提物
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S853.74;R285.5
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述11-34
• 第一章 金黃色葡萄球菌研究進(jìn)展11-21
• 1.1 金葡菌的生化特性11-12
• 1.2 金葡菌流行病學(xué)12-14
• 1.3 金葡菌信號通路系統(tǒng)14-17
• 1.4 金葡菌的致病性17-19
• 1.5 金葡菌的耐藥性19-21
• 第二章 金葡菌毒力因子研究進(jìn)展21-28
• 2.1 分泌型毒力因子21-25
• 2.2 細(xì)胞壁表面蛋白25-26
• 2.3 金葡菌生物膜26-28
• 第三章 木蝴蝶生物學(xué)活性研究進(jìn)展28-34
• 3.1 木蝴蝶植物學(xué)特征28-29
• 3.2 本草考證的研究29
• 3.3 木蝴蝶的化學(xué)成分29-32
• 3.4 木蝴蝶藥理作用32-34
• 第二篇 研究內(nèi)容34-62
• 第一章 木蝴蝶粗提物的制備及其對金黃色葡萄球菌α-溶血素作用研究34-48
• 1.1 材料與方法35-41
• 1.2 結(jié)果41-45
• 1.3 討論45-47
• 1.4 小結(jié)47-48
• 第二章 木蝴蝶粗提物對金葡菌介導(dǎo)細(xì)胞損傷的抑制作用研究48-54
• 2.1 材料與方法48-51
• 2.2 結(jié)果51-52
• 2.3 討論52-53
• 2.4 小結(jié)53-54
• 第三章 木蝴蝶粗提物對金黃色葡萄球菌小鼠肺炎治療作用54-62
• 3.1 材料與方法54-57
• 3.2 結(jié)果57-59
• 3.3 討論59-61
• 3.4 小結(jié)61-62
• 結(jié)論62-63
• 參考文獻(xiàn)63-73
• 導(dǎo)師簡介73-74
• 個人簡介74-75
• 致謝75

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：木蝴蝶粗提物對金黃色葡萄球菌小鼠肺炎治療作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：404366