為了研究牦牛雜交雄性不育的分子機制，本研究采用3′-RACE、RT-PCR等方法，從牦牛和黃牛睪丸組織總RNA中分別獲得Prdm9基因的cDNA序列，長度分別為2580bp和2421bp。牦牛和黃牛Prdm9基因的開放閱讀框內(nèi)有10個核苷酸同義突變，10個核苷酸非同義突變以及11個氨基酸差異。 在Prdm9基因編碼鋅指域的核苷酸序列兩側(cè)保守區(qū)設(shè)計引物，用基因組DNA擴增麥洼牦牛（n=11）、昌臺牦牛（n=12）、九龍牦牛（n=10）、黃牛（n=6）的Prdm9基因編碼鋅指域的核苷酸序列。結(jié)果顯示：3個品種（類群）牦牛Prdm9基因都編碼5個連續(xù)的C2H2型鋅指，且鋅指域氨基酸序列完全一致；黃牛則含有5、7或8個C2H2型鋅指，在重要的正向選擇位點處氨基酸變異大。黃牛和牦牛的鋅指域有19處氨基酸差異，其中有10處在重要的正向選擇位點處。 采用熒光定量PCR方法分析成年牦牛（n=20）、犏牛（n=8）、犢牛（n=4）以及黃牛（n=4）睪丸中Prdm9基因的mRNA水平。結(jié)果顯示：成年牦牛、黃牛睪丸中Prdm9基因的mRNA水平顯著高于犏牛和犢牛。 本研究提示：牦牛和黃牛Prdm9...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖2-1牦牛與黃牛睪丸組織RNA甲醛變性膠電泳圖譜

圖2-1牦牛與黃牛睪丸組織RNA甲醛變性膠電泳圖譜DNAmarker，泳道1、2分別為成年牦牛、黃牛睪丸組織dehydedenaturinggelelectrophoresisoftotalRNAfromtcattler，lane1and2：T....

圖2-2黃牛和牦牛睪丸中Prdm9基因3′-RACEPCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳圖譜

牦牛與黃牛睪丸組織RNA甲醛變性膠ker，泳道1、2分別為成年牦牛、黃牛naturinggelelectrophoresisoftotalRNcattleand2：TotalRNAfromthetestesofadul基因cDNA序列的擴增從牦....

圖2-3牦牛、黃牛睪丸Prdm95’-部分序列PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖譜

長度分別為1548bp和1392bp。用RT-PCR擴增獲得了牦牛和黃牛均約為250bp的特異性條帶（圖2-3），測序結(jié)果證實為牦牛和黃牛的Prdm9片段。圖2-2黃牛和牦牛睪丸中Prdm9基因3′-RACEPCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳圖譜M為....

圖2-4牦牛和黃牛睪丸中PCR擴增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖譜

牛睪丸Prdm95’-部分序列PCR產(chǎn)物瓊marker，泳道1、2為成年牦牛，泳道3trophoresisofPCRproductsfor5′partthetestesofyakandcattlearker，lanes1and2：adul....

本文編號：4040862