發(fā)布時(shí)間：2025-02-09 14:40

　　Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)是參與天然免疫的一類重要的模式識(shí)別受體,在天然免疫和獲得性免疫反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。當(dāng)細(xì)菌及其毒素等模式識(shí)別分子與TLRs結(jié)合進(jìn)而激活TLRs,誘導(dǎo)趨化因子、細(xì)胞因子以及炎癥介質(zhì)的大量分泌并促進(jìn)炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn),引發(fā)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn),在抗細(xì)菌感染所引發(fā)的炎癥過(guò)程中TLR2和TLR4發(fā)揮著核心作用,如能夠控制TLR2和TLR4的激活效應(yīng),則能夠控制細(xì)菌感染過(guò)程中過(guò)度炎癥反應(yīng)的發(fā)生。因此,本研究根據(jù)文獻(xiàn)已公布序列,合成了 TLR2和TLR4的特異性封閉肽。采用熒光定量PCR、ELISA以及Western Blot等技術(shù)檢測(cè)了 TLR2和TLR4的特異性封閉肽對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子IL-1β、IL-10、TNF-α以及RANTES表達(dá)和ERK、p38、JNK以及p65磷酸化的影響。TLR2和TLR4封閉肽預(yù)處理(24h)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞在LPS刺激4h后,熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,與LPS刺激組相比較,CP對(duì)照組IL-1β、IL-10、TNF-α以及RANTESmRNA的相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著性差異(P>0....

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 引言
    1.1 天然免疫研究概述
        1.1.1 天然免疫簡(jiǎn)述
        1.1.2 天然免疫模式識(shí)別作用機(jī)制
    1.2 Toll樣受體研究概述
        1.2.1 Toll樣受體簡(jiǎn)介
        1.2.2 Toll樣受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
        1.2.3 Toll樣受體在細(xì)菌感染過(guò)程中的作用
    1.3 細(xì)胞因子研究概述
    1.4 Toll樣受體封閉肽的研究概述
    1.5 研究的目的及意義
2 試驗(yàn)內(nèi)容
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離培養(yǎng)
        2.2.2 TLR2和TLR4封閉肽的合成
        2.2.3 分組及給藥
        2.2.4 RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞因子mRNA的表達(dá)量
        2.2.5 ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子蛋白表達(dá)量
        2.2.6 Western Blot檢測(cè)TLR2和TLR4介導(dǎo)的信號(hào)通路
3 試驗(yàn)結(jié)果
    3.1 BBPs對(duì)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
        3.1.1 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響
            3.1.1.1 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞IL-1βmRNA表達(dá)的影響
            3.1.1.2 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞IL-10 mRNA表達(dá)的影響
            3.1.1.3 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞TNF-αmRNA表達(dá)的影響
            3.1.1.4 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞RANTES mRNA表達(dá)的影響
        3.1.2 BBPs對(duì)細(xì)胞因子蛋白表達(dá)的影響
            3.1.2.1 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞IL-1β蛋白表達(dá)的影響
            3.1.2.2 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞IL-10蛋白表達(dá)的影響
            3.1.2.3 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞TNF-α蛋白表達(dá)的影響
            3.1.2.4 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞RANTES蛋白表達(dá)的影響
    3.2 BBPs對(duì)NF-κ B和MAPK激活效應(yīng)的影響
        3.2.1 BBPs對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞p65磷酸化的影響
        3.2.2 BBPs對(duì)MAPK激活效應(yīng)的影響
4 討論
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：4032391