采用免疫組化技術(shù)檢測催乳素受體蛋白（PRLR）在綿羊卵巢中的表達(dá)定位,建立綿羊卵泡顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)體系,將顆粒細(xì)胞分成4個處理組,添加不同濃度催乳素（PRL）:對照組（不添加PRL）、試驗Ⅰ組（0.05 mg/L PRL）、試驗Ⅱ組（0.50 mg/L PRL）、試驗Ⅲ組（5.00 mg/L PRL）,用ELISA法檢測各組顆粒細(xì)胞雌激素（E₂）和孕酮（P₄）的分泌水平,熒光定量RT-PCR檢測FSHR、LHR、PRLR、StAR、CYP11和CYP19等基因相對表達(dá)量。結(jié)果表明:在綿羊卵巢中,PRLR蛋白主要在卵泡的顆粒細(xì)胞和黃體細(xì)胞中表達(dá);添加PRL抑制了E₂的分泌、促進(jìn)了P₄分泌,其中Ⅱ組和Ⅲ組E₂分泌水平顯著低于對照組和Ⅰ組（P<0.05）;P₄隨著PRL添加濃度的升高而升高,各試驗組P₄分泌水平均顯著高于對照組（P<0.05）。各試驗組顆粒細(xì)胞FSHR、LHR、PRLR、CYP11、StAR的mRNA表達(dá)量均極顯...

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圖1 PRLR在綿羊卵巢中的表達(dá)

PRL處理顆粒細(xì)胞對FSHR、LHR、PRLR、CYP19、CYP11、3β-HSD和StARmRNA相對表達(dá)量影響結(jié)果見圖2。由圖2可知,各PRL添加組顆粒細(xì)胞FSHR、PRLR、LHR、CYP11、StAR的mRNA表達(dá)量均極顯著高于對照組(P<0.01),CYP19的mR....

圖2 PRL處理后綿羊顆粒細(xì)胞功能相關(guān)基因mRNA的表達(dá)

卵泡的生長和發(fā)育受顆粒細(xì)胞、卵泡膜細(xì)胞和卵母細(xì)胞自分泌或者旁分泌激素以及生長因子的作用和調(diào)控,其中卵巢顆粒細(xì)胞不僅為卵母細(xì)胞提供營養(yǎng)并調(diào)節(jié)其生長,也是E2和P4等重要生殖激素的主要生成場所[9]。研究表明,在哺乳動物和鳥類動物顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基中加入PRL均會引起類固醇激素的變化[1....

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