采用免疫組化技術檢測催乳素受體蛋白（PRLR）在綿羊卵巢中的表達定位,建立綿羊卵泡顆粒細胞體外培養(yǎng)體系,將顆粒細胞分成4個處理組,添加不同濃度催乳素（PRL）:對照組（不添加PRL）、試驗Ⅰ組（0.05 mg/L PRL）、試驗Ⅱ組（0.50 mg/L PRL）、試驗Ⅲ組（5.00 mg/L PRL）,用ELISA法檢測各組顆粒細胞雌激素（E₂）和孕酮（P₄）的分泌水平,熒光定量RT-PCR檢測FSHR、LHR、PRLR、StAR、CYP11和CYP19等基因相對表達量。結果表明:在綿羊卵巢中,PRLR蛋白主要在卵泡的顆粒細胞和黃體細胞中表達;添加PRL抑制了E₂的分泌、促進了P₄分泌,其中Ⅱ組和Ⅲ組E₂分泌水平顯著低于對照組和Ⅰ組（P<0.05）;P₄隨著PRL添加濃度的升高而升高,各試驗組P₄分泌水平均顯著高于對照組（P<0.05）。各試驗組顆粒細胞FSHR、LHR、PRLR、CYP11、StAR的mRNA表達量均極顯...

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圖1 PRLR在綿羊卵巢中的表達

PRL處理顆粒細胞對FSHR、LHR、PRLR、CYP19、CYP11、3β-HSD和StARmRNA相對表達量影響結果見圖2。由圖2可知,各PRL添加組顆粒細胞FSHR、PRLR、LHR、CYP11、StAR的mRNA表達量均極顯著高于對照組(P<0.01),CYP19的mR....

圖2 PRL處理后綿羊顆粒細胞功能相關基因mRNA的表達

卵泡的生長和發(fā)育受顆粒細胞、卵泡膜細胞和卵母細胞自分泌或者旁分泌激素以及生長因子的作用和調控,其中卵巢顆粒細胞不僅為卵母細胞提供營養(yǎng)并調節(jié)其生長,也是E2和P4等重要生殖激素的主要生成場所[9]。研究表明,在哺乳動物和鳥類動物顆粒細胞培養(yǎng)基中加入PRL均會引起類固醇激素的變化[1....

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