發(fā)布時(shí)間：2024-12-07 04:44

　　 【目的】通過高通量測(cè)序的方法獲得PCV2感染3D4/21細(xì)胞的miRNAs表達(dá)譜,并探討miRNA-98在PCV2復(fù)制中的作用。【方法】本研究以豬肺泡巨噬細(xì)胞系3D4/21細(xì)胞為細(xì)胞模型,對(duì)PCV2感染過程中的3D4/21細(xì)胞進(jìn)行miRNAs差異表達(dá)分析,篩選與病毒復(fù)制相關(guān)的特異性miRNAs,并探討其在PCV2復(fù)制中的作用。【結(jié)果】經(jīng)高通量測(cè)序,獲得PCV2感染3D4/21細(xì)胞的miRNAs表達(dá)譜,結(jié)合實(shí)驗(yàn)室前期研究篩選獲得miRNA-98。實(shí)驗(yàn)表明,miRNA-98的表達(dá)量隨PCV2感染時(shí)間的延長(zhǎng)而持續(xù)升高,其變化趨勢(shì)與Cap蛋白表達(dá)變化基本一致,由此推測(cè)miRNA-98與PCV2復(fù)制正相關(guān)。過表達(dá)miRNA-98可顯著上調(diào)Cap蛋白的表達(dá)量和PCV2的復(fù)制。進(jìn)一步的研究表明,miRNA-98參與調(diào)節(jié)宿主免疫相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)和PCV2的復(fù)制�！窘Y(jié)論】miRNA-98可通過調(diào)節(jié)免疫相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)調(diào)控宿主免疫功能,幫助PCV2逃逸宿主免疫,促進(jìn)PCV2在3D4/21細(xì)胞中的復(fù)制。這些發(fā)現(xiàn)不僅為深入了解PCV2與宿主之間的關(guān)系提供了新視角,還有望為豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病的防控提供新的抗...

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【部分圖文】：

圖1.PCV2感染3D4/21細(xì)胞miRNAs的表達(dá)

為了鑒定PCV2感染3D4/21細(xì)胞中miRNA-98表達(dá)豐度的變化，初步探索其變化與PCV2感染之間的關(guān)系，本研究利用Westernblotting和實(shí)時(shí)熒光定量PCR分別檢測(cè)PCV2Cap蛋白和miRNA-98在PCV2感染3D4/21細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量。由圖2-A....

圖2.PCV2感染3D4/21細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)PCV2 ORF2和miRNA-98的表達(dá)

圖1.PCV2感染3D4/21細(xì)胞miRNAs的表達(dá)2.3miRNA-98對(duì)PCV2復(fù)制的影響

圖3.miRNA-98對(duì)PCV2復(fù)制的作用

Westernblotting檢測(cè)結(jié)果顯示(圖3-D),mimiccontrol組、inhibitorcontrol組和2010AHCY組幾乎無差異，這也表明轉(zhuǎn)染并未對(duì)PCV2的感染產(chǎn)生影響。miRNA-98mimic轉(zhuǎn)染后過表達(dá)miRNA-98增強(qiáng)了Cap蛋白的表達(dá)，相....

圖4.miRNA-98對(duì)PCV2感染3D4/21過程中細(xì)胞因子表達(dá)的影響

為了探討miRNA-98是否參與調(diào)節(jié)宿主免疫相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，本文將3D4/21細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染miRNA-98mimic及mimiccontrol，隨后，感染PCV22010AHCY株(MOI=1)。感染后36h，應(yīng)用qRT-PCR檢測(cè)與細(xì)胞凋亡、炎癥、細(xì)胞周期和抗病毒功....

本文編號(hào)：4014821