豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的豬的一種嚴(yán)重的傳染病。我國采取豬瘟兔化弱毒疫苗預(yù)防接種與撲殺病豬相結(jié)合的綜合性防控措施控制住了豬瘟的大面積暴發(fā)和流行,但是在目前的養(yǎng)豬業(yè)中,大量的隱性感染和非典型感染給豬瘟疫情的防控帶來了巨大挑戰(zhàn)。在這種情況下,對機(jī)體本身抗病毒基因的研究就顯得非常重要。干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白(Interferon-induced transmembrane,IFITM)家族,特別是IFITM1、2、3可以抑制許多囊膜RNA病毒的感染過程,但其對豬瘟病毒的影響尚未見報(bào)道。本文主要研究IFITM1、2、3對CSFV增殖的影響,獲得以下結(jié)果:1.構(gòu)建了IFITM1、2、3與標(biāo)簽EGFP的融合表達(dá)載體,通過熒光顯微鏡觀察,IFITM1主要定位于細(xì)胞膜上,而IFITM2和IFITM3則定位在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。接種CSFV后,3種IFITM的定位會發(fā)生改變。IFITM1、2、3在正常情況下與溶酶體標(biāo)記物L(fēng)AMP1部分共定位;接種CSFV后,這3種蛋白與LAMP1共定位現(xiàn)象增多。2.初步...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

V-Flag-IFITM1質(zhì)粒雙酶切鑒定；2.CMV-3.CMV-Flag-IFITM3質(zhì)粒雙酶切鑒定00;1.IdentificationofCMV-Flag-IFITM1vITM2vector;3.IdentificationofCMV-Flag-....

用CCK-8法檢驗(yàn)過表達(dá)細(xì)胞系的細(xì)胞活同（圖2-5），可以用于試驗(yàn)。分別收取每PCR檢測過表達(dá)細(xì)胞系IFITM1、2、3的m3種蛋白的表達(dá)量遠(yuǎn)高于對照組（P<0.001）Flag來檢測3種蛋白的表達(dá)量（圖2-6）。mRNA水平和蛋白水平均獲得較高的表達(dá)....

鑒定IFITM1、2、3過表達(dá)細(xì)胞系；B.Westernblot鑒定IFITM1、2、3過表達(dá)細(xì)胞系tionofthecelllinesofIFITMoverexpressionbyRT-qPCR;B.Identificationofthe....

A.shN；B.shIFITM1；C.shIFITM2；D.shIFITM3圖2-7IFITM1、2、3干擾細(xì)胞系Fig.2-7ThecelllinesofshRANmediatedIFITMsknockdown圖2-8干擾細(xì)胞系細(xì)胞活力檢測Fig....

本文編號：4010274