為了降低生產(chǎn)成本,簡化下游純化工作,本研究嘗試用乳糖替代IPTG對雜合抗菌肽CC34進行誘導表達,并且對乳糖誘導的條件和培養(yǎng)基組成進行優(yōu)化選擇,并將乳糖誘導與發(fā)酵罐發(fā)酵工藝相結合,進行了擴大培養(yǎng)。本研究的探索結果如下：1.在本研究過程中,基因工程菌pGEX-6P-1/CC34/BL21 (DE3)實現(xiàn)了乳糖替代IPTG誘導表達CC34融合蛋白,并且誘導表達效果與IPTG誘導效果相當。在乳糖誘導優(yōu)化的過程中發(fā)現(xiàn),0.5mmol/L左右的乳糖就能夠導致融合蛋白的大量表達,其用量與IPTG的用量相當,而乳糖的價格低廉,使用乳糖誘導可使生產(chǎn)成本大幅降低。2.為了提高表達量,本研究對乳糖誘導的條件進行了優(yōu)化,使其表達效率更高,優(yōu)化后的條件為：(1)轉速：18Or/min; (2)誘導溫度：33℃；(3)誘導時間：10h。3.本研究在條件優(yōu)化的基礎上,通過單因素試驗設計、正交試驗設計和均勻設計進行了搖瓶發(fā)酵優(yōu)化篩選培養(yǎng)基組成。得到了以下結論：(1)過高濃度的葡萄糖抑制乳糖表達,單因素篩選的葡萄糖最佳添加量為1g/L,這在均勻設計中再次得到驗證；(2)提高了基因工程菌pGEX-6P-1/CC34/BL...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 抗菌肽
    1.2 抗菌肽在畜牧業(yè)上的應用研究進展
    1.3 基因工程菌發(fā)酵工藝研究進展
    1.4 研究目的與意義
    1.5 技術路線
第二章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌的乳糖誘導表達
    摘要
    2.1 引言
    2.2 材料
    2.3 方法
    2.4 結果與分析
    2.5 討論
    2.6 結論
第三章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌乳糖誘導表達條件的優(yōu)化
    摘要
    3.1 引言
    3.2 材料
    3.3 方法
    3.4 結果與分析
    3.5 討論
    3.6 結論
第四章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌乳糖誘導培養(yǎng)基組成的優(yōu)化
    摘要
    4.1 引言
    4.2 材料
    4.3 方法
    4.4 結果與分析
    4.5 討論
    4.6 結論
第五章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌的擴大誘導培養(yǎng)及產(chǎn)品純化
    摘要
    5.1 引言
    5.2 材料
    5.3 方法
    5.4 結果與分析
    5.5 討論
    5.6 結論
第六章 總體結論與工作展望
    6.1 總體結論
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 工作展望
參考文獻
致謝
附錄
個人簡歷



本文編號：4011477