為了降低生產(chǎn)成本,簡化下游純化工作,本研究嘗試用乳糖替代IPTG對雜合抗菌肽CC34進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),并且對乳糖誘導(dǎo)的條件和培養(yǎng)基組成進(jìn)行優(yōu)化選擇,并將乳糖誘導(dǎo)與發(fā)酵罐發(fā)酵工藝相結(jié)合,進(jìn)行了擴(kuò)大培養(yǎng)。本研究的探索結(jié)果如下：1.在本研究過程中,基因工程菌pGEX-6P-1/CC34/BL21 (DE3)實(shí)現(xiàn)了乳糖替代IPTG誘導(dǎo)表達(dá)CC34融合蛋白,并且誘導(dǎo)表達(dá)效果與IPTG誘導(dǎo)效果相當(dāng)。在乳糖誘導(dǎo)優(yōu)化的過程中發(fā)現(xiàn),0.5mmol/L左右的乳糖就能夠?qū)е氯诤系鞍椎拇罅勘磉_(dá),其用量與IPTG的用量相當(dāng),而乳糖的價(jià)格低廉,使用乳糖誘導(dǎo)可使生產(chǎn)成本大幅降低。2.為了提高表達(dá)量,本研究對乳糖誘導(dǎo)的條件進(jìn)行了優(yōu)化,使其表達(dá)效率更高,優(yōu)化后的條件為：(1)轉(zhuǎn)速：18Or/min; (2)誘導(dǎo)溫度：33℃；(3)誘導(dǎo)時(shí)間：10h。3.本研究在條件優(yōu)化的基礎(chǔ)上,通過單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和均勻設(shè)計(jì)進(jìn)行了搖瓶發(fā)酵優(yōu)化篩選培養(yǎng)基組成。得到了以下結(jié)論：(1)過高濃度的葡萄糖抑制乳糖表達(dá),單因素篩選的葡萄糖最佳添加量為1g/L,這在均勻設(shè)計(jì)中再次得到驗(yàn)證；(2)提高了基因工程菌pGEX-6P-1/CC34/BL...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 抗菌肽
    1.2 抗菌肽在畜牧業(yè)上的應(yīng)用研究進(jìn)展
    1.3 基因工程菌發(fā)酵工藝研究進(jìn)展
    1.4 研究目的與意義
    1.5 技術(shù)路線
第二章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌的乳糖誘導(dǎo)表達(dá)
    摘要
    2.1 引言
    2.2 材料
    2.3 方法
    2.4 結(jié)果與分析
    2.5 討論
    2.6 結(jié)論
第三章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌乳糖誘導(dǎo)表達(dá)條件的優(yōu)化
    摘要
    3.1 引言
    3.2 材料
    3.3 方法
    3.4 結(jié)果與分析
    3.5 討論
    3.6 結(jié)論
第四章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌乳糖誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成的優(yōu)化
    摘要
    4.1 引言
    4.2 材料
    4.3 方法
    4.4 結(jié)果與分析
    4.5 討論
    4.6 結(jié)論
第五章 雜合抗菌肽CC34基因工程菌的擴(kuò)大誘導(dǎo)培養(yǎng)及產(chǎn)品純化
    摘要
    5.1 引言
    5.2 材料
    5.3 方法
    5.4 結(jié)果與分析
    5.5 討論
    5.6 結(jié)論
第六章 總體結(jié)論與工作展望
    6.1 總體結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 工作展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
個(gè)人簡歷



本文編號：4011477