牛巴貝斯蟲�。˙ovine babesiosis）是由巴貝斯科巴貝斯屬的原蟲寄生于牛類動物紅細(xì)胞內(nèi)所引起的蜱傳血液原蟲病。該病對牛群危害嚴(yán)重，病牛貧血、血尿、迅速消瘦，病程后期死亡率高，對畜牧生產(chǎn)造成重大損失。因此，建立準(zhǔn)確、靈敏、快速的檢測、診斷技術(shù)，對該病的早期診斷、流行病學(xué)研究和綜合防治具有重大意義。 (Ⅰ)為建立牛巴貝斯蟲(Babesia bovis)的TaqMan實(shí)時熒光PCR檢測方法，本研究根據(jù)GenBank中牛巴貝斯蟲的18S rRNA基因保守序列，設(shè)計(jì)引物和TaqMan探針，通過優(yōu)化反應(yīng)體系，建立檢測牛巴貝斯蟲的實(shí)時熒光PCR方法。試驗(yàn)結(jié)果表明：實(shí)時熒光PCR對靶基因的最低檢測值為1.31×101copies/μL，比常規(guī)PCR的敏感性高1000倍；而且與牛的其他血液原蟲無交叉反應(yīng)；組內(nèi)及組間重復(fù)性試驗(yàn)的變異系數(shù)均小于2%，具有良好的重復(fù)性；在23份被檢樣品中，實(shí)時熒光PCR和常規(guī)PCR的檢出率分別為52.17%和30.43%。 (Ⅱ)根據(jù)雙芽巴貝斯蟲（Babesia bigemina）18S rRNA基因的保守序列，設(shè)計(jì)特異性引物和TaqMan探針，建立了檢測雙芽巴貝...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1紅細(xì)胞內(nèi)的牛巴貝斯蟲Fig.1-1B.bovisinredbloodcells

rne于1893年在美國德克薩斯州的牛中也發(fā)現(xiàn)此病，并將病原命名為]。該病給畜牧業(yè)造成重大損失，在我國，引起牛巴貝斯蟲病的主要病雙芽巴貝斯蟲[3]。原形態(tài)巴貝斯蟲為小型蟲體，其長度小于紅細(xì)胞半徑，多數(shù)位于紅細(xì)胞邊緣蟲體尖端相對排列成鈍角，或略呈一字形排列，一個紅細(xì)胞內(nèi)的蟲體....

圖1-2紅細(xì)胞內(nèi)的雙芽巴貝斯蟲Fig.1-2B.bigeminainredbloodcells

貝斯蟲病實(shí)時熒光PCR診斷方法的建立和及其初步應(yīng)用研究雙芽巴貝斯蟲為大型蟲體，其長度大于紅細(xì)胞半徑，多數(shù)位于紅細(xì)胞中央，內(nèi)的蟲體常為1-2個，偶見3個。蟲體呈梨籽形、圓形、橢圓形及不規(guī)則形為成雙梨籽形，尖端以銳角相聯(lián)。每蟲體內(nèi)有一團(tuán)染色質(zhì)塊。蟲體經(jīng)姬姆薩染呈淡藍(lán)色，染....

圖1-3巴貝斯蟲生活史Fig.1-3LifecycleofBabesia

新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文蜱在動物身上叮咬的時間與動物感染巴貝斯蟲的幾率有一定的關(guān)系，如果讓蜱在動物身上自由采食和繁殖，動物的感染率能達(dá)到90%。當(dāng)子孢子進(jìn)入動物，侵入動物的紅細(xì)胞后，進(jìn)行出芽生殖并裂解紅細(xì)胞釋放出裂殖子（merozoites）。大多數(shù)裂殖子在宿主紅細(xì)胞內(nèi)形成滋養(yǎng)....

圖1-4TaqMan探針原理

新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文PCR反應(yīng)目的片段的擴(kuò)增，更多的Taqman探針被水解，熒光信號值隨之增加。常用的熒光報告基團(tuán)的有FAM，TET，JOE，HEX或VIC等，3'端的熒光淬滅基團(tuán)一般都為TAMRA，Taqman探針可以通過加入不同熒光基團(tuán)標(biāo)記的不同探針以進(jìn)行....

本文編號：3980578