根據(jù)偽狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)gB基因保守序列,設(shè)計合成一套特異引物和TaqMan探針,建立了一種快速、敏感和特異的檢測偽狂犬病毒的實時熒光定量PCR方法。該方法靈敏度高,可檢測到相當(dāng)于10拷貝/μL的病毒DNA,比常規(guī)PCR檢測方法高約100倍。該方法特異性強(qiáng),與豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)和豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)均無交叉反應(yīng)。該方法變異系數(shù)小于1%,具有良好的重復(fù)性。本研究建立的實時熒光定量PCR方法可用于偽狂犬病毒經(jīng)典株和變異株的檢測和定量。為了研究豬偽狂犬病滅活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)的免疫原性,確定其對豬的最小免疫劑量,進(jìn)行了仔豬免疫攻毒試驗。25頭2周齡PRV抗原和抗體陰性的健康仔豬,隨機(jī)分為5組,每組5頭。第1—4組分別頸部肌肉注射豬偽狂犬病滅活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)0.5 mL、1 mL、2 mL和3 mL,28天后每組用同等劑量疫苗加強(qiáng)免疫一次,第5組為對照組。各組豬在免疫后,每周采集血清檢測PRV gE和gB抗體水平。第二次免疫后第28天,所有豬用105.0 TCID50...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖1-1PRV病毒粒子結(jié)構(gòu)示意圖(Pomeranz,etal.,2005)

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第一章引言含病毒基因組的核蛋白核心、二十面體的核衣殼（包含162個殼粒）、蛋白質(zhì)的皮層以及含有病毒編碼糖蛋白的脂質(zhì)雙層囊膜(Granzowetal.,1997;Pomeranzetal.,2005)（圖1-1）。

圖1-2PRV的復(fù)制周期(Pomeranz,etal.,2005)

圖1-2PRV的復(fù)制周期(Pomeranz,etal.,2005)Fig.1-2ReplicationcycleofPRVRV還能夠造成潛伏性感染。潛伏性感染主要發(fā)生在神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元細(xì)伏性感染起始感染如同增殖性感染的前幾步，除了病毒在核內(nèi)DNA

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