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小鼠裸卵的體外培養(yǎng)和發(fā)育潛力的探討

發(fā)布時(shí)間:2024-03-02 08:18
  一直以來(lái),裸卵因其體外成熟后胞質(zhì)質(zhì)量差、發(fā)育能力低得不到廣泛運(yùn)用。卵母細(xì)胞在高水平環(huán)磷酸腺苷(cAMP)抑制作用下發(fā)生減數(shù)分裂阻滯,延長(zhǎng)胞質(zhì)成熟時(shí)間,提高胞質(zhì)成熟質(zhì)量。胞質(zhì)成熟達(dá)到一定水平后,cAMP下降,成熟促進(jìn)因子(MPF)上升,使得質(zhì)核成熟同步,有利于卵母細(xì)胞后期發(fā)育。本試驗(yàn)利用藥物添加培養(yǎng)的方式模擬卵母細(xì)胞在體內(nèi)成熟的機(jī)制,旨在建立小鼠裸卵體外成熟培養(yǎng)體系。通過(guò)統(tǒng)計(jì)成熟率,鑒定成熟卵母細(xì)胞質(zhì)量,統(tǒng)計(jì)孤雌激活率、囊胚率,體外受精率、囊胚率,囊胚質(zhì)量鑒定,熒光定量PCR檢測(cè)基因表達(dá)的方法,觀察本試驗(yàn)所建立的裸卵體系的效率,進(jìn)而判定該裸卵成熟體系建立的可行性。本研究分為以下兩個(gè)部分:試驗(yàn)一:GV期小鼠自然裸卵在不同濃度的cAMP激動(dòng)劑forskolin培養(yǎng)液中培養(yǎng)不同時(shí)間段(3 h,12 h,24 h),之后轉(zhuǎn)移至普通培養(yǎng)液中分別進(jìn)行不同時(shí)間段的普通培養(yǎng)(21 h,12 h,0 h)。正交試驗(yàn)結(jié)果顯示,GV期裸卵在10、50、100μM forskolin濃度下培養(yǎng)3 h,之后轉(zhuǎn)移至普通培養(yǎng)液培養(yǎng)21 h,成熟率分別為:54.17±4.88%、50.83±4.84%、54.17士4....

【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

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