為了研究重組雞白細(xì)胞介素-6(rChIL-6)蛋白在SPF雞體內(nèi)外活性相關(guān)性，從而為開發(fā)以rChIL-6蛋白為主要成分的基因工程免疫增強(qiáng)劑研究提供科學(xué)依據(jù)，本研究采用間接ELISA法和MTS法分別測定不同濃度的rChIL-6蛋白與抗rChIL-6單抗發(fā)生特異性免疫反應(yīng)活性以及體外促雞脾臟、外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性；篩選出4個(gè)濃度的rChIL-6蛋白進(jìn)行體內(nèi)活性比較實(shí)驗(yàn)。將160只37日齡SPF雞隨機(jī)平均分為20組，進(jìn)行以上4個(gè)濃度的rChIL-6蛋白對傳染性法氏囊病毒(IBDV)滅活疫苗、活疫苗免疫增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)研究；通過檢測分析接種后不同時(shí)間實(shí)驗(yàn)組雞的IBDV抗體水平、不同細(xì)胞因子(ChIL-2、ChIL-4、ChIL-6、ChIFN-α、ChIFN-γ)表達(dá)水平、脾臟和外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性、外周血T淋巴細(xì)胞亞群含量等指標(biāo)，篩選出可在雞體內(nèi)發(fā)揮好的免疫增強(qiáng)作用的rChIL-6蛋白最大稀釋度。將48只130日齡SPF雞隨機(jī)平均分為6組，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)通過皮下注射、滴鼻點(diǎn)眼途徑將rChIL-6蛋白(以上實(shí)驗(yàn)篩選出的濃度，1:25倍稀釋)與新城疫病毒(NDV)滅活疫苗、弱毒活疫苗同時(shí)接種后不同時(shí)...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 白細(xì)胞介素-6(IL-6)簡介
    1.2 IL-6的受體
    1.3 IL-6的生物學(xué)作用
    1.4 人白細(xì)胞介素-6的研究進(jìn)展
        1.4.1 人白細(xì)胞介素-6的結(jié)構(gòu)
        1.4.2 人白細(xì)胞介素-6(HuIL-6)的基因結(jié)構(gòu)
        1.4.3 人白細(xì)胞介素-6的功能及其在臨床的應(yīng)用
    1.5 雞白細(xì)胞介素-6(ChIL-6)的研究進(jìn)展
        1.5.1 雞白細(xì)胞介素-6(ChIL-6)的結(jié)構(gòu)及生物活性檢測
        1.5.2 雞白細(xì)胞介素-6在臨床上的應(yīng)用前景
第2章 不同濃度的重組雞白細(xì)胞介素-6(rChIL-6)蛋白體外活性研究
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 rChIL-6蛋白與抗ChIL-6單抗發(fā)生特異性免疫反應(yīng)活性檢測
        2.2.2 rChIL-6蛋白促雞脾淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
        2.2.3 rChIL-6蛋白促雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 rChIL-6蛋白與抗ChIL-6單抗發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的活性
        2.3.2 rChIL-6蛋白促雞脾淋巴細(xì)胞增殖活性
        2.3.3 rChIL-6蛋白促雞外周血T淋巴細(xì)胞(PBLC)增殖活性
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第3章 不同濃度rChIL-6蛋白對傳染性法氏囊病毒(IBDV)滅活疫苗免疫增強(qiáng)作用比較研究
    3.1 材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器設(shè)備
    3.2 方法
        3.2.1 試驗(yàn)雞分組及接種方法
        3.2.2 樣品的采集
        3.2.3 IBDV抗體檢測
        3.2.4 不同細(xì)胞因子表達(dá)水平檢測
        3.2.5 雞脾臟淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
        3.2.6 雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
        3.2.7 雞外周血淋巴細(xì)胞CD4⁺/CD8⁺比值測定
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 IBDV抗體水平
        3.3.2 不同細(xì)胞因子表達(dá)水平
        3.3.3 雞脾臟淋巴細(xì)胞增殖活性
        3.3.4 雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性
        3.3.5 外周血淋巴細(xì)胞CD4⁺/CD8⁺比值
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第4章 重組雞白細(xì)胞介素-6(rChIL-6)蛋白對IBDV活疫苗免疫增強(qiáng)作用比較研究
    4.1 材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器設(shè)備
    4.2 方法
        4.2.1 試驗(yàn)分組免疫接種方法
        4.2.2 樣品的采集
        4.2.3 IBDV抗體檢測
        4.2.4 不同細(xì)胞因子表達(dá)水平檢測
        4.2.5 雞脾臟淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
        4.2.6 雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
        4.2.7 雞外周血淋巴細(xì)胞CD4⁺/CD8⁺比值測定
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 IBDV抗體水平
        4.3.2 細(xì)胞因子表達(dá)水平
        4.3.3 雞脾淋巴細(xì)胞增殖活性
        4.3.4 雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性
        4.3.5 雞外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD4⁺/CD8⁺比值
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第5章 重組雞白細(xì)胞介素-6蛋白對新城疫活疫苗及滅活疫苗的免疫增強(qiáng)作用研究
    5.1 材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 主要儀器設(shè)備
    5.2 方法
        5.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物分組及免疫接種方法
        5.2.2 樣品采集
        5.2.3 NDV抗體滴度測定
        5.2.4 雞脾臟淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
        5.2.5 雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性檢測
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 NDV抗體滴度
        5.3.2 雞脾淋巴細(xì)胞增殖活性
        5.3.3 雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略語詞匯表
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
    一、攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的與學(xué)位論文相關(guān)的學(xué)術(shù)論文及專著



本文編號：3911234