此前本實(shí)驗(yàn)室從健康豬腸道及糞樣中分離純化得到57株大腸桿菌噬菌體,發(fā)現(xiàn)其中有12株噬菌體可裂解產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC),本研究旨在探究這些大腸桿菌噬菌體的宿主譜及抑菌效力,以期了解腸道內(nèi)大腸桿菌噬菌體對(duì)機(jī)體的保護(hù)作用。以89株大腸桿菌為宿主菌(其中包括5株ETEC),采用點(diǎn)滴法、雙層平板法和液體擴(kuò)增法測(cè)定噬菌體的宿主譜,利用濁度法測(cè)定噬菌體對(duì)ETEC的抑菌效力,并對(duì)噬菌體分類進(jìn)行鑒定。12株噬菌體均能裂解一種或多種ETEC,但是均無法通過感染ETEC而增殖。S143₁、S143₂、S144₂、S35、S86₁、L86及S172等7株噬菌體雖然無法通過ETEC產(chǎn)生子代噬菌體,但在感染復(fù)數(shù)(MOI)為10或100時(shí)仍對(duì)ETEC具有顯著的抑菌效力。12株噬菌體中有8株為T4樣噬菌體,其他4株噬菌體均屬于有尾噬菌體目肌尾噬菌體科。本研究從豬腸道內(nèi)分離到12株大腸桿菌噬菌體,雖然無法感染ETEC,但仍可裂解ETEC,其中,7株在MOI為10或100時(shí)可有效地抑制ETEC生長(zhǎng)。

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【部分圖文】：

圖1噬菌體S143＿1的抑菌曲線

表2用點(diǎn)滴法、雙層平板法檢測(cè)12株大腸桿菌噬菌體的宿主譜Table2Hostrangeof12E.coliphages噬菌體Phages點(diǎn)滴法Spottest雙層平板法Double-layeragarplateS143_135,143,171,23....

圖2噬菌體S1432、S1442及S861的抑菌曲線

對(duì)噬菌體宿主譜的測(cè)定通常用點(diǎn)滴法或雙層平板培養(yǎng)法,但是相關(guān)研究表明,點(diǎn)滴法測(cè)定出的宿主譜往往要比雙層平板培養(yǎng)法得到的結(jié)果更廣,并且兩種方法得到的結(jié)果之間并無相關(guān)性[23-26]。本試驗(yàn)得到的結(jié)果也表明,用點(diǎn)滴法與雙層平板法得到的宿主譜并不一致,因此,確定噬菌體的宿主譜時(shí)單一的用點(diǎn)....

圖3噬菌體S172、L86及S35的抑菌曲線

圖2噬菌體S143_2、S144_2及S86_1的抑菌曲線圖4T4樣噬菌體主要衣殼蛋白基因鑒定結(jié)果

圖4T4樣噬菌體主要衣殼蛋白基因鑒定結(jié)果

圖3噬菌體S172、L86及S35的抑菌曲線點(diǎn)滴法測(cè)定的宿主譜比用雙層平板法廣,是由于噬菌體可以裂解某些細(xì)菌但并不能在這些細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生子代噬菌體。導(dǎo)致噬菌體裂解細(xì)菌可能的原因:1)用于擴(kuò)增噬菌體的大腸桿菌本身會(huì)產(chǎn)生大腸桿菌素(colicin),抑制指示菌的生長(zhǎng)從而形成空斑[2....

本文編號(hào)：3893973