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H7N9禽流感熒光報告病毒的構(gòu)建及初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2023-12-13 17:51
  為實現(xiàn)對H7N9禽流感病毒(AIV)感染過程的動態(tài)可視化示蹤,本研究構(gòu)建了重組報告質(zhì)粒pHH21-NS-Venus、pHH21-NS-Apple 和包含 H7N9 AIV CK/SD008 株的 8 個基因節(jié)段的重組質(zhì)粒 pHH21-PB2-627E、pHH21-PB2-627K(來自 CK/SD008-627K 株)、pHH21-PB1、pHH21-PA、pHH21-HA、pHH21-NA、pHH21-NP、pHH21-M。上述質(zhì)粒均經(jīng)測序鑒定。利用12質(zhì)粒反向遺傳操作系統(tǒng),構(gòu)建2株熒光報告病毒SD008-627EVenus、SD008-627E-Apple,及E627K 對哺乳動物嗜性的 2株熒光報告病毒 SD008-627K-Venus、SD008-627KApple。將這4株報告病毒感染A549細胞后在熒光顯微鏡下均可見相應(yīng)熒光且病毒主要定位在細胞核中;將其中兩株報告病毒SD008-627E-Venus/Apple經(jīng)雞胚傳2代,2株SD008-627K-Venus/Apple在小鼠體內(nèi)傳3代后均感染A549細胞,經(jīng)倒置熒光顯微鏡觀察均可見相應(yīng)熒光。上述結(jié)果表明4株報告病毒正確構(gòu)...

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