通過制備兔抗化膿隱秘桿菌(Trueperella pyogenes)高免血清,篩選固定方法、封閉液、洗滌液、抗體稀釋度、抗體孵育時間等應(yīng)用條件,建立一種檢測化膿隱秘桿菌的間接免疫熒光方法。結(jié)果表明:用冷丙酮作固定劑,10%山羊血清作封閉液,0.05%Tween–20的0.01 mol/L pH 7.4 PBS(磷酸緩沖鹽溶液)作洗滌液,兔抗化膿隱秘桿菌高免血清(一抗)1∶50稀釋,37℃作用2 h,羊抗兔FITC(二抗)1∶100稀釋,37℃作用2 h,草酸銨結(jié)晶紫襯染菌體3 min,對純培養(yǎng)物化膿隱秘桿菌檢測,可見清晰的特異性熒光,能區(qū)分溶血隱秘桿菌、偽結(jié)核棒狀桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、沙門氏菌、豬鏈球菌;在人工感染化膿隱秘桿菌死亡小鼠的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟及發(fā)病山羊臨床病料中均能檢出化膿隱秘桿菌。

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【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1材料
    1.2化膿隱秘桿菌高免血清的制備
    1.3化膿隱秘桿菌抗原片制備
    1.4 IFA的檢測程序
    1.5 IFA檢測條件的優(yōu)化
    1.6特異性試驗
    1.7敏感性試驗
    1.8重復(fù)性試驗
    1.9應(yīng)用IFA對人工感染化膿隱秘桿菌的小鼠組織進(jìn)行檢測
    1.10 IFA的臨床應(yīng)用
2結(jié)果與分析
    2.1 IFA檢測條件的優(yōu)化結(jié)果
    2.2特異性試驗結(jié)果
    2.3敏感性試驗結(jié)果
    2.4重復(fù)性試驗結(jié)果
    2.5對人工感染化膿隱秘桿菌的小鼠組織檢測的結(jié)果
    2.6 IFA的臨床應(yīng)用結(jié)果
3結(jié)論與討論



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