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1型鴨甲肝病毒(DHAV-1)致雛鴨肝損傷機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2023-10-31 19:17
  鴨病毒性肝炎是由1型鴨甲肝病毒(DHAV-1)引起雛鴨的一種急性高度接觸性傳染病,主要侵害3周齡以內(nèi)的雛鴨,特別是1周齡以內(nèi)的雛鴨最易感,病死率達(dá)90%以上。雖然近兩年DHAV-1的全基因序列公布于世使得DVH得到了人們的關(guān)注,國內(nèi)眾多研究者的注意力集中在病原學(xué)的研究,而對于DVH的發(fā)病機(jī)制的研究仍局限在上世紀(jì)的組織學(xué)和血清學(xué)水平。自然感染DHA-V與日齡有關(guān),1-2周齡是發(fā)病的高峰期。我們前期研究已經(jīng)證實(shí)4日齡的雛鴨人工感染DHAV-1后1-2天急性死亡,而35日齡的大鴨僅見一過性的精神沉郁。35日齡鴨為什么不發(fā)病,除了與免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善以外,是不是與鴨肝臟發(fā)育相關(guān),國內(nèi)外對不同品種的8周齡以上鴨的肥肝發(fā)生機(jī)制研究的較多,而對于35日齡以下肉鴨肝臟脂代謝還未見報(bào)道。本課題第一部分?jǐn)M對3—35日齡鴨的脂肪代謝規(guī)律進(jìn)行動(dòng)態(tài)的研究。其次雛鴨感染DHAV-1后快速死亡與急性肝損傷及其導(dǎo)致的低血糖昏迷或肝性腦病密切相關(guān)。因此本研究第二部分以臨床分離的DHAV-1JX株感染動(dòng)物模型,研究病毒感染后,肝臟脂質(zhì)過氧化、脂代謝相關(guān)調(diào)控基因和炎癥因子的改變,從而闡明鴨肝炎病毒致雛鴨肝損傷的機(jī)制。 1....

【文章頁數(shù)】:103 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 鴨病毒性肝炎概述
        1.1 鴨肝炎病毒分型
        1.2 鴨病毒性肝炎的發(fā)病特點(diǎn)
        1.3 鴨病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制研究現(xiàn)狀
    2 肝損傷的研究進(jìn)展
        2.1 鴨肝脂代謝
        2.2 脂質(zhì)過氧化與肝損傷
        2.3 自由基與肝損傷
        2.4 細(xì)胞因子與肝損傷
        2.5 低血糖與肝性昏迷
    3 課題意義及研究思路
第二章 3-35日齡櫻桃谷肉鴨肝脂肪代謝的變化
    1 材料
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及營養(yǎng)要求
        1.2 主要儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑及配置
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及取材
        2.2 肝臟粗脂肪測定方法-索氏抽提法
        2.3 清生化指標(biāo)的測定
        2.4 冰凍切片的制作
        2.5 肝組織油紅O染色
        2.6 石蠟切片的制作和HE染色
        2.7 免疫組織化學(xué)染色
        2.8 數(shù)據(jù)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 不同日齡肉鴨肝臟內(nèi)粗脂肪的含量的測定結(jié)果
        3.2 不同日齡肉鴨血漿脂代謝指標(biāo)的測定結(jié)果
        3.3 不同日齡肉鴨肝組織內(nèi)中性脂肪含量變化
        3.4 不同日齡肉鴨肝組織組織學(xué)觀察
        3.5 不同日齡肉鴨肝組織內(nèi)脂代謝相關(guān)調(diào)控蛋白的含量變化
    4 討論
        4.1 不同日齡肉鴨肝臟的組織學(xué)特點(diǎn)和肝臟內(nèi)脂質(zhì)含量的變化
        4.2 不同日齡肉鴨血漿脂代謝的特點(diǎn)
        4.3 FABP、PPAR、MTP在肉鴨生長期肝脂代謝的可能作用
    5 結(jié)論
第三章 鴨病毒性肝炎對櫻桃谷肉鴨的肝損傷機(jī)制
    1 材料
        1.1 病毒、試驗(yàn)動(dòng)物及營養(yǎng)要求
        1.2 主要儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑及配置
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 病毒的增殖
        2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及取材
        2.3 肝勻漿的制備
        2.4 清生化指標(biāo)的測定
        2.5 肝組織自由基相關(guān)指標(biāo)的測定
        2.6 石蠟切片的制作和HE染色
        2.7 免疫組織化學(xué)染色
        2.8 肝組織RNA提取和cDNA合成
        2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肝組織中的病毒含量
        2.10 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肝組織細(xì)胞因子的表達(dá)
        2.11 血清內(nèi)細(xì)胞因子IL-1β和IL-6 ELISA測定
        2.12 數(shù)據(jù)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 DHAV-1感染雛鴨后臨床癥狀和病理剖檢變化
        3.2 DHAV-1感染雛鴨肝臟的組織學(xué)動(dòng)態(tài)觀察
        3.3 DHAV-1感染雛鴨后血液內(nèi)膽紅素的動(dòng)態(tài)變化
        3.4 DHAV-1感染雛鴨后血漿內(nèi)肝損傷相關(guān)酶的動(dòng)態(tài)變化
        3.5 DHAV-1感染雛鴨后脂代謝指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化
        3.6 DHAV-1感染雛鴨后肝組織中NOS和NO的變化規(guī)律
        3.7 DHAV-1感染雛鴨后肝組織中抗氧化酶的變化規(guī)律
        3.8 DHAV-1感染雛鴨后血氨和血糖的動(dòng)態(tài)變化
        3.9 DHAV-1感染雛鴨后PPAR在肝組織中的分布規(guī)律
        3.10 DHAV-1感染雛鴨后MTP在肝組織中的分布規(guī)律
        3.11 DHAV-1感染雛鴨肝組織中病毒含量的動(dòng)態(tài)變化
        3.12 DHAV-1感染雛鴨后血液內(nèi)細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化
        3.13 DHAV-1感染雛鴨后肝臟內(nèi)細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄
        3.14 DHAV-1感染雛鴨后肝臟內(nèi)PPARa的轉(zhuǎn)錄
    4 討論
        4.1 DHAV-1感染雛鴨后代謝異常與肝損傷的關(guān)系
        4.2 DHAV-1感染雛鴨后肝內(nèi)自由基與肝損傷的關(guān)系
        4.3 細(xì)胞因子參與DHAV-1感染后雛鴨肝損傷的機(jī)制
    5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
博士期間發(fā)表與研究相關(guān)的論文
致謝



本文編號:3859323

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