促黃體素受體(luteinizing hormone receptor, LHR)和催乳素受體(prolactin receptor, PRLR)基因在哺乳動物生殖發(fā)育中扮演著重要角色,廣泛存在于各種組織。為分析不同年齡牦牛(Bos grunniens)睪丸組織中LHR、PRLR基因表達的變化模式,并探究其在成年期牦牛不同器官中的表達差異,分別采集幼年期(6月齡)、初情期(24月齡)、性成熟期(36月齡)、成年期(72月齡)牦牛睪丸組織和72月齡公牦牛的腎臟、肝臟、肺臟、心臟、脾臟、骨骼肌等器官組織。采用qRT-PCR技術檢測不同發(fā)育時期牦牛睪丸組織和成年牦牛不同器官組織中LHR、PRLR mRNA表達水平,并采用免疫組織化學技術研究不同發(fā)育期牦牛睪丸組織的LHR、PRLR蛋白表達定位。結果顯示,LHR、PRLR基因在牦牛睪丸組織中的表達量從幼年期到性成熟期極顯著增加(P<0.01),成年期與性成熟期差異不顯著。成年牦牛不同器官組織LHR基因在睪丸組織中的表達水平高于在腎臟、骨骼肌和肺臟組織中的表達水平(P<0.05),PRLR基因在腎臟的表達量最高,其次為骨骼肌、睪丸和脾...

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 牦牛組織樣本采集
    1.3 總RNA的提取及cDNA的合成
    1.4 引物設計及合成
    1.5 常規(guī)逆轉錄PCR(reverse transcription poly-merase chain reaction,RT-PCR)檢測
    1.6 實時熒光定量PCR(quantitative real-timePCR,q RT-PCR)
    1.7 免疫組織化學技術檢測LHR和PRLR蛋白在牦牛睪丸組織中的分布與表達
2 結果與分析
    2.1 睪丸組織總RNA的提取
    2.2 LHR和PRLR基因的PCR擴增
    2.3 擴增產(chǎn)物特異性分析
    2.4 不同發(fā)育階段牦牛睪丸組織的LHR、PRLR mRNA表達檢測
    2.5 成年牦牛不同器官組織的LHR、PRLR mRNA表達檢測
    2.6 不同發(fā)育階段牦牛LHR和PRLR蛋白免疫組化檢測
3 討論
    3.1 不同發(fā)育階段牦牛睪丸組織中LHR、PRLR mRNA的表達差異
    3.2 成年牦牛不同器官組織中LHR、PRLR mRNA表達差異
    3.3 不同發(fā)育期牦牛睪丸組織中LHR、PRLR的蛋白定位
4 結論



本文編號：3816200