本研究的目的在于揭示不同粗飼料及蛋白質(zhì)來源日糧對奶牛瘤胃細菌群落多樣性的影響，并分析優(yōu)勢菌群的數(shù)量變化。選取48頭泌乳日齡及體重相近的健康中國荷斯坦奶牛隨機分為3組，飼喂粗飼料及蛋白質(zhì)來源不同的三種日糧：MF組（苜蓿，玉米青貯及豆粕），CSA組（玉米秸稈，豆粕）和CSB組（玉米秸稈，棉籽粕和油菜籽粕）；其中，CSA組和MF組相比區(qū)別在于用玉米秸稈代替苜蓿和玉米青貯作為粗飼料來源；CSB組和CSA組相比區(qū)別在于用雜粕替代豆粕作為蛋白質(zhì)飼料來源。所有奶牛在飼喂其指定日糧91天后全部換為MF組日糧。在試驗期第31，61，91和107天，分晨飼前和晨飼后兩個時間點，通過口腔采樣器采集瘤胃內(nèi)容物樣品，進行不同粗飼料及蛋白質(zhì)飼料降解相關菌群的比較。主要研究內(nèi)容如下： 1.不同粗飼料和蛋白質(zhì)來源日糧條件下奶牛瘤胃細菌群落多樣性分析。提取不同時間點的瘤胃液樣品總DNA，利用變性梯度凝膠電泳（DGGE）技術分析細菌群落多樣性變化，并對差異條帶進行測序分析。DGGE分析結果表明，三個不同處理組的電泳圖譜的條代數(shù)和峰密度值差異顯著。聚類分析結果顯示，在試驗31天，混合粗飼料組（MF組）與單一秸稈組（CSA和...

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【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 研究目的和意義
    1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 瘤胃微生物組成
        1.2.2 瘤胃中主要的纖維降解菌
        1.2.3 日糧纖維在瘤胃內(nèi)的降解
        1.2.4 瘤胃中主要的蛋白質(zhì)降解菌
        1.2.5 日糧蛋白在瘤胃內(nèi)的降解
        1.2.6 日糧類型對瘤胃細菌多樣性的影響
        1.2.7 瘤胃微生物分子生物學研究方法
    1.3 研究技術路線和研究內(nèi)容
        1.3.1 技術路線
        1.3.2 研究內(nèi)容
第二章 不同粗飼料及蛋白質(zhì)來源日糧條件下瘤胃細菌多樣性分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗動物與試驗設計
        2.1.2 試驗儀器及耗材
        2.1.3 樣品采集與分析
    2.2 結果與分析
        2.2.1 總 DNA 提取及 PCR 擴增
        2.2.2 DGGE 指紋圖譜聚類分析
        2.2.3 多樣性分析
        2.2.4 條帶測序
    2.3 討論
    2.4 小結
第三章 不同粗飼料日糧條件下瘤胃優(yōu)勢菌群 R-UB 的驗證
    3.1 材料與方法
        3.1.1 優(yōu)勢細菌（群）R-UB 的鑒定
        3.1.2 qPCR 引物設計與驗證
        3.1.3 標準曲線的建立
        3.1.4 實時定量 PCR 檢測
        3.1.5 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結果與分析
        3.2.1 細菌 R-UB 的鑒定
        3.2.2 qPCR 引物的驗證
        3.2.3 R-UB 標準曲線的制備
        3.2.4 實時定量 PCR 分析
    3.3 討論
    3.4 小結
第四章 全文結論
    4.1 結論
    4.2 本試驗創(chuàng)新點
    4.3 有待于進一步研究的問題
參考文獻
致謝
作者簡介



本文編號：3812224