LPS和沙門(mén)氏菌刺激時(shí)雞腦內(nèi)TLR4的表達(dá)規(guī)律研究
發(fā)布時(shí)間:2023-05-05 18:32
由于血腦屏障(Blood Brain Barrier, BBB)的存在,中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central Nervous System, CNS)被認(rèn)為是免疫特免區(qū),CNS內(nèi)炎癥感染與免疫反應(yīng)一直以來(lái)都備受關(guān)注和爭(zhēng)議。Toll樣受體(Toll like receptors, TLRs)的發(fā)現(xiàn)促進(jìn)了人們對(duì)腦內(nèi)炎癥反應(yīng)機(jī)制的認(rèn)識(shí),吸引了眾多研究者的目光。TLR4是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的TLRs,廣泛分布于機(jī)體的組織細(xì)胞。有研究表明TLR4在哺乳動(dòng)物CNS內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞上表達(dá),并證實(shí)在炎癥過(guò)程中,膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)TLR4與配體結(jié)合而發(fā)揮作用。目前有關(guān)TLR4與家禽腦內(nèi)炎癥和免疫反應(yīng)的關(guān)系缺乏系統(tǒng)研究報(bào)道。因此,本項(xiàng)目擬以2日齡雛雞作為試驗(yàn)對(duì)象,研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦組織結(jié)構(gòu)和BBB超微結(jié)構(gòu)的影響,同時(shí)檢測(cè)雞腦組織內(nèi)TLR4的分布特征以及表達(dá)變化,為揭示腦內(nèi)天然免疫反應(yīng)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下: 1.LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦組織結(jié)構(gòu)的影響 本試驗(yàn)采用LPS和沙門(mén)氏菌腹腔注射2日齡雛雞,探究細(xì)菌及其產(chǎn)物外周刺激后,腦組織結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果顯示:與對(duì)照...
【文章頁(yè)數(shù)】:77 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
基金項(xiàng)目資助
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 前言
1.1 立題依據(jù)
1.2 文獻(xiàn)綜述
1.2.1 CNS免疫的研究現(xiàn)狀
1.2.2 TLRs的作用及其與天然免疫的關(guān)系
1.2.2.1 TLRs的發(fā)現(xiàn)、基本結(jié)構(gòu)和基因定位
1.2.2.2 TLRs在生物體內(nèi)的分布及其生物學(xué)功能
1.2.2.3 TLR4的信號(hào)通路研究
1.2.2.4 TLRs與CNS的關(guān)系
1.2.3 雞TLRs研究進(jìn)展
1.2.4 血腦屏障的研究進(jìn)展
1.2.4.1 血腦屏障的發(fā)現(xiàn)、結(jié)構(gòu)和功能
1.2.4.2 LPS對(duì)血腦屏障結(jié)構(gòu)和功能的影響
1.3 本研究的目的和意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)動(dòng)物與器材
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及處理
2.1.2 主要儀器
2.1.3 主要試劑
2.1.4 主要溶液和試劑的配制
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 樣品采集
2.2.2 石蠟切片制作
2.2.3 蘇木精-伊紅(HE)染色
2.2.4 兩步法免疫組化染色
2.2.5 電鏡切片制作
2.2.6 ELISA檢測(cè)
2.2.7 圖像采集及數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激后不同時(shí)間點(diǎn)腦組織結(jié)構(gòu)的變化
3.1.1 LPS外周刺激后腦組織結(jié)構(gòu)的變化
3.1.2 沙門(mén)氏菌外周刺激后腦組織結(jié)構(gòu)的變化
3.2 沙門(mén)氏菌外周刺激致腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的變化
3.2.1 沙門(mén)氏菌刺激對(duì)雞大腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的影響
3.2.2 沙門(mén)氏菌刺激對(duì)雞小腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的影響
3.3 TLR4在雞腦組織的分布特征
3.3.1 TLR4在雞小腦內(nèi)的分布特征
3.3.2 TLR4在雞大腦內(nèi)的分布特征
3.4 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦內(nèi)免疫因子表達(dá)的影響
3.4.1 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦內(nèi)TLR4表達(dá)的影響
3.4.2 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響
3.4.3 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響
3.4.4 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦內(nèi)炎癥因子表達(dá)的影響
4 討論
4.1 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)腦組織結(jié)構(gòu)的影響
4.2 沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的影響
4.3 TLR4與雞腦內(nèi)的天然免疫
4.3.1 TLR4在雞腦內(nèi)的分布
4.3.2 TLR4與BBB之間的關(guān)系
4.4 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)腦內(nèi)免疫相關(guān)因子表達(dá)的影響
4.4.1 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)TLR4表達(dá)的影響
4.4.2 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響
4.4.3 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響
4.4.4 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)腦內(nèi)炎癥因子表達(dá)的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄1 個(gè)人簡(jiǎn)歷
附錄2 論文發(fā)表情況
本文編號(hào):3808172
【文章頁(yè)數(shù)】:77 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
基金項(xiàng)目資助
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
1 前言
1.1 立題依據(jù)
1.2 文獻(xiàn)綜述
1.2.1 CNS免疫的研究現(xiàn)狀
1.2.2 TLRs的作用及其與天然免疫的關(guān)系
1.2.2.1 TLRs的發(fā)現(xiàn)、基本結(jié)構(gòu)和基因定位
1.2.2.2 TLRs在生物體內(nèi)的分布及其生物學(xué)功能
1.2.2.3 TLR4的信號(hào)通路研究
1.2.2.4 TLRs與CNS的關(guān)系
1.2.3 雞TLRs研究進(jìn)展
1.2.4 血腦屏障的研究進(jìn)展
1.2.4.1 血腦屏障的發(fā)現(xiàn)、結(jié)構(gòu)和功能
1.2.4.2 LPS對(duì)血腦屏障結(jié)構(gòu)和功能的影響
1.3 本研究的目的和意義
2 材料與方法
2.1 試驗(yàn)動(dòng)物與器材
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及處理
2.1.2 主要儀器
2.1.3 主要試劑
2.1.4 主要溶液和試劑的配制
2.2 試驗(yàn)方法
2.2.1 樣品采集
2.2.2 石蠟切片制作
2.2.3 蘇木精-伊紅(HE)染色
2.2.4 兩步法免疫組化染色
2.2.5 電鏡切片制作
2.2.6 ELISA檢測(cè)
2.2.7 圖像采集及數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
3.1 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激后不同時(shí)間點(diǎn)腦組織結(jié)構(gòu)的變化
3.1.1 LPS外周刺激后腦組織結(jié)構(gòu)的變化
3.1.2 沙門(mén)氏菌外周刺激后腦組織結(jié)構(gòu)的變化
3.2 沙門(mén)氏菌外周刺激致腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的變化
3.2.1 沙門(mén)氏菌刺激對(duì)雞大腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的影響
3.2.2 沙門(mén)氏菌刺激對(duì)雞小腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的影響
3.3 TLR4在雞腦組織的分布特征
3.3.1 TLR4在雞小腦內(nèi)的分布特征
3.3.2 TLR4在雞大腦內(nèi)的分布特征
3.4 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦內(nèi)免疫因子表達(dá)的影響
3.4.1 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦內(nèi)TLR4表達(dá)的影響
3.4.2 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響
3.4.3 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響
3.4.4 LPS和沙門(mén)氏菌刺激對(duì)腦內(nèi)炎癥因子表達(dá)的影響
4 討論
4.1 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)腦組織結(jié)構(gòu)的影響
4.2 沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的影響
4.3 TLR4與雞腦內(nèi)的天然免疫
4.3.1 TLR4在雞腦內(nèi)的分布
4.3.2 TLR4與BBB之間的關(guān)系
4.4 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)腦內(nèi)免疫相關(guān)因子表達(dá)的影響
4.4.1 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)TLR4表達(dá)的影響
4.4.2 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響
4.4.3 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響
4.4.4 LPS和沙門(mén)氏菌外周刺激對(duì)腦內(nèi)炎癥因子表達(dá)的影響
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄1 個(gè)人簡(jiǎn)歷
附錄2 論文發(fā)表情況
本文編號(hào):3808172
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