水牛出生時卵巢中含有約數(shù)萬個原始卵泡,但在水牛生命周期中只有約200個卵泡可以發(fā)育成熟并排卵,約99.9%的卵泡在生長過程中閉鎖、退化。如何挖掘母水牛的繁殖潛能,開發(fā)并應(yīng)用卵巢中的腔前卵泡,是水牛生殖生理研究的重要課題。本研究的目的是對水牛不同時期腔前卵泡中候選基因的表達(dá)進(jìn)行檢測,總結(jié)其表達(dá)特點(diǎn)及差異,為探明水牛卵泡發(fā)生的分子機(jī)制,優(yōu)化水牛腔前卵泡體外培養(yǎng)系統(tǒng)奠定基礎(chǔ)。現(xiàn)將相關(guān)研究結(jié)果總結(jié)如下。 1.水牛PCNA蛋白和VASA蛋白在卵巢組織中的表達(dá)定位研究。采用石蠟切片結(jié)合免疫組化的方法,對水牛PCNA蛋白和VASA蛋白在卵巢組織不同時期卵泡中的表達(dá)情況進(jìn)行定位研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),(1)原始卵泡中,PCNA和VASA蛋白在顆粒細(xì)胞并未檢測到表達(dá),卵母細(xì)胞中有表達(dá)；(2)初級卵泡中,PCNA和VASA在卵母細(xì)胞和部分顆粒細(xì)胞中均可檢測到較低表達(dá)；(3)次級卵泡中,PCNA和VASA在卵母細(xì)胞和大多數(shù)的顆粒細(xì)胞中均可檢測到表達(dá),但VASA在卵母細(xì)胞核中未表達(dá)；(4)在有腔卵泡中,PCNA在顆粒細(xì)胞、卵泡膜細(xì)胞及卵母細(xì)胞周圍的卵丘細(xì)胞中均有很強(qiáng)的表達(dá),而VASA在這些細(xì)胞中均未檢測到表達(dá)；隨著卵...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 哺乳動物卵泡的發(fā)育過程
        1.1 卵泡的劃分及其特點(diǎn)
        1.2 原始卵泡庫的建立
        1.3 原始卵泡的生長發(fā)育及調(diào)控
    2 動物腔前卵泡體外發(fā)育的研究
    3 腔前卵泡的分離方法概述
        3.1 酶消化法
        3.2 機(jī)械分離法
        3.3 酶-機(jī)械分離結(jié)合法
        3.4 顯微分離法
    4 腔前卵泡的體外培養(yǎng)方法概述
        4.1 普通培養(yǎng)法
        4.2 二維培養(yǎng)法
        4.3 三維培養(yǎng)法
        4.4 共培養(yǎng)法
        4.5 培養(yǎng)板倒置法
    5 生長因子和激素等在腔前卵泡發(fā)育中的作用
        5.1 增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)
        5.2 VASA
        5.3 卵泡刺激素(FSH)
        5.4 胰島素樣生長因子(IGFs)
        5.5 成纖維樣細(xì)胞生長因子2(FGF-2)
    6 本研究的意義和目的
第二部分 試驗(yàn)研究
    第一章 水牛PCNA和VASA蛋白在卵巢中的表達(dá)定位研究
        摘要
        1 試驗(yàn)材料與方法
            1.1 主要試驗(yàn)試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 卵巢來源
            1.4 試驗(yàn)方法
        2 結(jié)果
            2.1 水牛PCNA蛋白在卵巢中的表達(dá)定位
            2.2 水牛VASA蛋白在卵巢中的表達(dá)定位
        3 分析與討論
            3.1 水牛PCNA蛋白在卵巢中的表達(dá)定位
            3.2 水牛VASA蛋白在卵巢中的表達(dá)定位
        4 結(jié)論
    第二章 水牛PCNA、FSHR、IGF及FGF等基因在不同時期腔前卵泡中的表達(dá)研究
        摘要
        1 試驗(yàn)材料與方法
            1.1 主要試驗(yàn)試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 卵巢來源
            1.4 試驗(yàn)方法
            1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.6 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 不同時期腔前卵泡的觀察
            2.2 水牛不同時期腔前卵泡中PCNA mRNA的表達(dá)
            2.3 水牛不同時期腔前卵泡中FSHR mRNA的表達(dá)
            2.4 水牛不同時期腔前卵泡中IGFR-1、IGF-Ⅱ及其受體IGFR-2的表達(dá)
            2.5 水牛不同時期腔前卵泡中FGF-2及其受體FGFR-2的表達(dá)
        3 分析與討論
            3.1 水牛不同腔前卵泡中FSHR mRNA的表達(dá)
            3.2 水牛不同腔前卵泡中IGFR-1、IGF-Ⅱ及其受體IGFR-2的表達(dá)
            3.3 水牛不同腔前卵泡中FGF-2及其受體FGFR-2的表達(dá)
        4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
論文發(fā)表情況



本文編號：3808242