水牛出生時卵巢中含有約數(shù)萬個原始卵泡,但在水牛生命周期中只有約200個卵泡可以發(fā)育成熟并排卵,約99.9%的卵泡在生長過程中閉鎖、退化。如何挖掘母水牛的繁殖潛能,開發(fā)并應(yīng)用卵巢中的腔前卵泡,是水牛生殖生理研究的重要課題。本研究的目的是對水牛不同時期腔前卵泡中候選基因的表達進行檢測,總結(jié)其表達特點及差異,為探明水牛卵泡發(fā)生的分子機制,優(yōu)化水牛腔前卵泡體外培養(yǎng)系統(tǒng)奠定基礎(chǔ)�，F(xiàn)將相關(guān)研究結(jié)果總結(jié)如下。 1.水牛PCNA蛋白和VASA蛋白在卵巢組織中的表達定位研究。采用石蠟切片結(jié)合免疫組化的方法,對水牛PCNA蛋白和VASA蛋白在卵巢組織不同時期卵泡中的表達情況進行定位研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),(1)原始卵泡中,PCNA和VASA蛋白在顆粒細胞并未檢測到表達,卵母細胞中有表達；(2)初級卵泡中,PCNA和VASA在卵母細胞和部分顆粒細胞中均可檢測到較低表達；(3)次級卵泡中,PCNA和VASA在卵母細胞和大多數(shù)的顆粒細胞中均可檢測到表達,但VASA在卵母細胞核中未表達；(4)在有腔卵泡中,PCNA在顆粒細胞、卵泡膜細胞及卵母細胞周圍的卵丘細胞中均有很強的表達,而VASA在這些細胞中均未檢測到表達；隨著卵...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻綜述
    1 哺乳動物卵泡的發(fā)育過程
        1.1 卵泡的劃分及其特點
        1.2 原始卵泡庫的建立
        1.3 原始卵泡的生長發(fā)育及調(diào)控
    2 動物腔前卵泡體外發(fā)育的研究
    3 腔前卵泡的分離方法概述
        3.1 酶消化法
        3.2 機械分離法
        3.3 酶-機械分離結(jié)合法
        3.4 顯微分離法
    4 腔前卵泡的體外培養(yǎng)方法概述
        4.1 普通培養(yǎng)法
        4.2 二維培養(yǎng)法
        4.3 三維培養(yǎng)法
        4.4 共培養(yǎng)法
        4.5 培養(yǎng)板倒置法
    5 生長因子和激素等在腔前卵泡發(fā)育中的作用
        5.1 增殖細胞核抗原(PCNA)
        5.2 VASA
        5.3 卵泡刺激素(FSH)
        5.4 胰島素樣生長因子(IGFs)
        5.5 成纖維樣細胞生長因子2(FGF-2)
    6 本研究的意義和目的
第二部分 試驗研究
    第一章 水牛PCNA和VASA蛋白在卵巢中的表達定位研究
        摘要
        1 試驗材料與方法
            1.1 主要試驗試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 卵巢來源
            1.4 試驗方法
        2 結(jié)果
            2.1 水牛PCNA蛋白在卵巢中的表達定位
            2.2 水牛VASA蛋白在卵巢中的表達定位
        3 分析與討論
            3.1 水牛PCNA蛋白在卵巢中的表達定位
            3.2 水牛VASA蛋白在卵巢中的表達定位
        4 結(jié)論
    第二章 水牛PCNA、FSHR、IGF及FGF等基因在不同時期腔前卵泡中的表達研究
        摘要
        1 試驗材料與方法
            1.1 主要試驗試劑
            1.2 主要儀器
            1.3 卵巢來源
            1.4 試驗方法
            1.5 試驗設(shè)計
            1.6 數(shù)據(jù)分析
        2 結(jié)果
            2.1 不同時期腔前卵泡的觀察
            2.2 水牛不同時期腔前卵泡中PCNA mRNA的表達
            2.3 水牛不同時期腔前卵泡中FSHR mRNA的表達
            2.4 水牛不同時期腔前卵泡中IGFR-1、IGF-Ⅱ及其受體IGFR-2的表達
            2.5 水牛不同時期腔前卵泡中FGF-2及其受體FGFR-2的表達
        3 分析與討論
            3.1 水牛不同腔前卵泡中FSHR mRNA的表達
            3.2 水牛不同腔前卵泡中IGFR-1、IGF-Ⅱ及其受體IGFR-2的表達
            3.3 水牛不同腔前卵泡中FGF-2及其受體FGFR-2的表達
        4 結(jié)論
參考文獻
致謝
論文發(fā)表情況



本文編號：3808242