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低溫誘發(fā)肉雞腹水綜合征的分子機(jī)制及VC的緩解作用

發(fā)布時(shí)間:2023-04-01 10:45
  本文考察了飼糧VC添加對(duì)低溫誘導(dǎo)條件下肉雞生長(zhǎng)性能、心臟指數(shù)、血常規(guī)、抗氧化能力、肺血管重構(gòu)(Pulmonary vascular remodeling, PVR)和缺氧誘導(dǎo)因子-1α (Hypoxia inducible factor-1αa, HIF-1α)等缺氧相關(guān)基因表達(dá)的影響,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探索了CoCl2模擬缺氧對(duì)肉雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(Pulmonary arteries smooth muscle cells, PASMC)中HIF-1α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-2(Vascular endothelial growth factor receptor-2, VEGFR-2/Flk-1)基因表達(dá)水平的影響,為下一步繼續(xù)探索VC緩解肉雞腹水綜合征(Ascites syndrome, AS)的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。因此,本論文包括兩個(gè)試驗(yàn)。試驗(yàn)一:低溫與飼糧VC添加對(duì)1-21d肉雞機(jī)體抗氧化性能、HIF-1α基因表達(dá)及肺血管重構(gòu)的影響選用400只1d科寶肉公雞,按照初始體重?zé)o差異...

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號(hào)說明
一 前言
二 文獻(xiàn)綜述
    1 肉雞腹水綜合征研究現(xiàn)狀
        1.1 肉雞AS的發(fā)病現(xiàn)狀及引發(fā)因素
        1.2 肉雞AS發(fā)生的病理機(jī)制
            1.2.1 血液動(dòng)力學(xué)
            1.2.2 心臟病理學(xué)
            1.2.3 血管重構(gòu)
            1.2.4 自由基損傷
        1.3 HIF-1α及其信號(hào)途徑與肉雞AS
            1.3.1 HIF-1α的結(jié)構(gòu)與功能
            1.3.2 缺氧與HIF-1α
            1.3.3 HIF-1 α與肉雞AS
    2 VC的抗氧化作用及其對(duì)肉雞AS的調(diào)控
三 有待研究的問題、試驗(yàn)?zāi)康募耙饬x
    1 有待研究的問題
    2 試驗(yàn)?zāi)康募耙饬x
四 試驗(yàn)內(nèi)容
    試驗(yàn)一:低溫與飼糧VC添加對(duì)1-21d肉雞機(jī)體抗氧化性能、HIF-1α基因表達(dá)及肺血管重構(gòu)的影響
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理
            1.3 試驗(yàn)飼糧
            1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法
                1.4.1 生長(zhǎng)性能
                1.4.2 血常規(guī)
                1.4.3 心臟指數(shù)
                1.4.4 肺動(dòng)脈血管重構(gòu)
                1.4.5 抗氧化能力
                1.4.6 肺臟HIF-1α、VEGF和Flk-1mRNA水平
            1.5 數(shù)據(jù)處理
        2 試驗(yàn)結(jié)果與分析
            2.1 肉雞心臟指數(shù)與生長(zhǎng)性能
            2.2 溫度和VC對(duì)肉雞血常規(guī)指標(biāo)的影響
            2.3 溫度和VC對(duì)肉雞抗氧化指標(biāo)的影響
            2.4 溫度和VC對(duì)肉雞肺動(dòng)脈血管重構(gòu)的影響
            2.5 溫度和VC對(duì)肉雞肺臟HIF-1α、VEGF和Flk-1mRNA水平的影響
            2.6 基因相對(duì)表達(dá)量和肺動(dòng)脈重構(gòu)的相關(guān)性
        3 討論
            3.1 低溫與VC對(duì)肉雞AS的影響
            3.2 低溫與VC對(duì)肉雞機(jī)體氧化及抗氧化能力的影響
            3.3 低溫與VC對(duì)肉雞肺動(dòng)脈血管重構(gòu)及缺氧相關(guān)基因表達(dá)水平的影響
        4. 小結(jié)
    試驗(yàn)二:COCl2模擬缺氧對(duì)肉雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中HIF-1α,VEGF及Flk-1基因表達(dá)水平的影響
        1 材料與方法
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備與試劑
            1.3 原代細(xì)胞的培養(yǎng)
            1.4 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
            1.5 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的鑒定
                1.5.1 形態(tài)觀察
                1.5.2 免疫熒光染色
            1.6 檢測(cè)細(xì)胞HIF-1αmRNA相對(duì)表達(dá)量
                1.6.1 細(xì)胞缺氧處理
                1.6.2 細(xì)胞中總RNA的提取、反轉(zhuǎn)錄為cDNA和Real time-PCR
            1.7 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖
            1.8 數(shù)據(jù)處理
        2 試驗(yàn)結(jié)果與分析
            2.1 肉雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的鑒定
                2.1.1 形態(tài)學(xué)鑒定
                2.1.2 免疫熒光染色鑒定
            2.2 化學(xué)試劑CoCl2誘導(dǎo)肉雞肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞缺氧對(duì)HIF-1αmRNA水平及細(xì)胞增殖的影響
                2.2.1 HIF-1αmRNA的表達(dá)
                2.2.2 細(xì)胞增殖
            2.3 細(xì)胞中VEGF和Flk-1的基因表達(dá)
        3 討論
            3.1 原代細(xì)胞的培養(yǎng)
            3.2 COCl2誘導(dǎo)缺氧對(duì)細(xì)胞HIF-1α的影響
            3.3 細(xì)胞增殖與基因表達(dá)的關(guān)系
        4 小結(jié)
五 全文討論與結(jié)論
    1 全文討論
    2 全文結(jié)論
六 下一步研究的問題
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3777001

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