絳蟲(cestode)物種數(shù)目較多,大約有1500多種,對人及動物危害嚴(yán)重的是絳蟲的幼蟲,可引起絳蟲蚴病,其中豬囊蟲病和包蟲病是流行嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲病。準(zhǔn)確確定一個絳蟲種,不僅在治療和預(yù)防該絳蟲對人及動物的危害中起到重要作用,同時也給絳蟲分類學(xué)上的研究提供了豐富的數(shù)據(jù)。目前鑒定一個絳蟲物種主要依據(jù)其形態(tài)學(xué)、生活史等傳統(tǒng)分類學(xué)方法并結(jié)合分子分類學(xué)方法來進(jìn)行。傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)方法不能對那些形態(tài)學(xué)上相似、但在遺傳學(xué)方面卻不同的絳蟲加以鑒定。線粒體和核基因序列在物種鑒定方面的應(yīng)用已經(jīng)成為絳蟲分類學(xué)的研究熱點(diǎn),構(gòu)成絳蟲的核酸條形碼,為絳蟲隱藏種的發(fā)現(xiàn)和新物種的界定,以及為絳蟲病的準(zhǔn)確診斷、分子流行病學(xué)調(diào)查、預(yù)防措施的制定等提供了重要依據(jù)。 青海省果洛州達(dá)日縣和玖治縣兩地區(qū)位于青海省、甘肅省和四川省的交界處,該地區(qū)野生食肉動物(多見于狼和狐貍)及流浪犬較多,加之,兩地區(qū)嚙齒動物(高原鼠兔和青海田鼠)泛濫成災(zāi),對草原破壞較嚴(yán)重。野生食肉動物和流浪犬大多以草原上的嚙齒動物為生,而嚙齒動物則以草原上的草或種子為生。食肉動物的糞便常見附著在草上,這就為那些以嚙齒動物為中間宿主,以草原上的食肉動物為終末宿主的...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 研究目的和意義
    1.2 形態(tài)學(xué)方法
        1.2.1 成蟲形態(tài)學(xué)觀察
        1.2.2 幼蟲(蚴)形態(tài)學(xué)觀察
    1.3 生活史、宿主范圍、流行病學(xué)調(diào)查及生態(tài)學(xué)方法
        1.3.1 生活史及宿主范圍
        1.3.2 流行病學(xué)調(diào)查
        1.3.3 生態(tài)學(xué)研究
    1.4 免疫學(xué)方法
    1.5 分子生物學(xué)方法
        1.5.1 常規(guī)PCR及測序技術(shù)
        1.5.2 線粒體基因在絳蟲分類鑒定中的應(yīng)用
        1.5.3 核基因在絳蟲分類鑒定中的應(yīng)用
            1.5.3.1 核糖體RNA基因(rRNA)
            1.5.3.2 衛(wèi)星DNA序列
            1.5.3.3 其他核DNA序列
        1.5.4 其他分子生物學(xué)方法
    1.6 種間雜交在絳蟲分類鑒定上應(yīng)用
    1.7 研究的方法和內(nèi)容
第二章 囊尾蚴形態(tài)學(xué)、中間和終末宿主研究及流行病學(xué)調(diào)查
    2.1 材料與方法
        2.1.1 囊尾蚴的采集與處理
        2.1.2 囊尾蚴幼蟲染色及形態(tài)學(xué)觀察
            2.1.2.1 壓片制作
            2.1.2.2 HE染色
        2.1.3 中間宿主鑒定
            2.1.3.1 青海田鼠基因組DNA提取
            2.1.3.2 青海田鼠線粒體基因組擴(kuò)增引物設(shè)計
            2.1.3.3 PCR擴(kuò)增及測序
        2.1.4 采樣點(diǎn)糞樣收集及處理
        2.1.5 特異性檢測引物設(shè)計
        2.1.6 PCR檢測采樣點(diǎn)糞樣
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 樣品采集及處理
        2.2.2 囊尾蚴形態(tài)學(xué)觀察及染色
        2.2.3 中間宿主研究
        2.2.4 采樣點(diǎn)糞樣檢測結(jié)果
    2.3 討論
第三章 嚙齒動物囊尾蚴分子分類學(xué)鑒定及種內(nèi)變異研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 囊尾蚴基因組DNA樣品的提取
            3.1.1.1 樣品選擇及提取前的處理
            3.1.1.2 利用試劑盒試劑提取基因組DNA
        3.1.2 線粒體全基因組測序引物設(shè)計
        3.1.3 PCR反應(yīng)條件及測序
        3.1.4 利用生物信息學(xué)軟件對線粒體全基因組進(jìn)行分析
            3.1.4.1 利用DNAMAN軟件分析
            3.1.4.2 帶屬絳蟲線粒體各基因間變異程度分析
            3.1.4.3 編碼氨基酸殘基個數(shù)、起始密碼子、終止密碼子、非編碼區(qū)長度及AT%分析
        3.1.5 利用核苷酸和氨基酸序列進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析
        3.1.6 種內(nèi)遺傳變異分析
            3.1.6.1 引物設(shè)計
            3.1.6.2 PCR反應(yīng)條件及測序
            3.1.6.3 遺傳變異分析及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 兩種囊尾蚴線粒體基因組PCR擴(kuò)增及測序
        3.2.2 兩種囊尾蚴線粒體全基因組的物理圖譜
        3.2.3 帶屬絳蟲線粒體編碼基因不同種間的變異程度
        3.2.4 帶屬絳蟲線粒體基因組分析
        3.2.5 系統(tǒng)發(fā)育樹分析
        3.2.6 種內(nèi)遺傳變異分析
    3.3 討論
第四章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號：3777077