本文關(guān)鍵詞：日糧添加鋅對(duì)綿羊睪丸、附睪鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zips表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本文旨在研究日糧中添加不同水平鋅對(duì)綿羊睪丸、附睪組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zips(s：1、3、6和8)表達(dá)的影響。選擇體重相近(26±1.5 kg)健康的6月齡杜寒雜種公羊30只。隨機(jī)分為5組,每組6只,分別飼喂基礎(chǔ)日糧(對(duì)照組)、基礎(chǔ)日糧+50mg/kg無(wú)機(jī)鋅(ZnSO4)、基礎(chǔ)日糧+25 mg/kg、50 mg/kg和75 mg/kg氨基酸鋅。預(yù)飼期10 d,正式期60 d。最后采集睪丸、附睪頭、附睪體和附睪尾。運(yùn)用qRT-PCR法檢、Western Blotting技術(shù)、免疫組化技術(shù)對(duì)睪丸、附睪組織中Zips(1、3、6、8) mRNA表達(dá)和Zip6蛋白表達(dá)及定位的研究。主要結(jié)果如下：1 qRT-PCR分析表明：(1)添加有機(jī)鋅綿羊睪丸中Zip1 mRNA表達(dá)量顯著降低(P0.05)；附睪頭中Zip1 mRNA表達(dá)量隨著有機(jī)鋅添加量的增加而升高,且50mg/kg有機(jī)鋅組和75 mg/kg有機(jī)鋅組附睪頭Zip1 mRNA表達(dá)量顯著高于其他試驗(yàn)組(P0.05)；在綿羊附睪體中Zip1 mRNA表達(dá)量與附睪頭中基本一致;附睪尾中Zip1 mRNA表達(dá)量因添加鋅均明顯下降(P0.05);(2)添加無(wú)機(jī)鋅綿羊睪丸中Zip3 mRNA的表達(dá)量顯著升高,而添加有機(jī)鋅Zip3 mRNA的表達(dá)量明顯下降(P0.05)。添加75 mg/kg有機(jī)鋅組附睪頭和附睪體中Zip3 mRNA的表達(dá)量顯著升高(P0.05);添加鋅綿羊附睪尾中Zip3 mRNA的表達(dá)量顯著降低(P0.05);(3)添加75 mg/kg有機(jī)鋅睪丸和附睪中Zip6 mRNA表達(dá)量顯著升高(P0.05)。(4)添加兩種鋅源均可使綿羊睪丸中Zip8 mRNA表達(dá)量顯著下降(P0.05),使附睪頭中Zip8 mRNA表達(dá)量顯著升高(除25 mg/kg有機(jī)鋅組)(P0.05),有機(jī)鋅對(duì)附睪體和附睪尾中Zip8 mRNA表達(dá)量均顯著升高(P0.05)。2 Western Blotting結(jié)果：鋅添加組綿羊睪丸中Zip6的蛋白表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P0.05)；有機(jī)鋅組綿羊附睪頭中Zip6蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05);添加50 mg/kg無(wú)機(jī)鋅和25 mg/kg有機(jī)鋅使綿羊附睪體中Zip6蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.05)。各組附睪尾中Zip6蛋白表達(dá)量沒(méi)有顯著差異(P0.05)。3免疫組化結(jié)果：鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zip6主要定位于睪丸和附睪頭中。平均光密度值顯示,鋅添加組睪丸和附睪頭平均光密度值顯著高于對(duì)照組(P0.05)。無(wú)機(jī)鋅添加組附睪體平均光密度顯著高于對(duì)照組(P0.05),附睪尾中各組平均光密度沒(méi)有明顯變化(P0.05)。結(jié)論：(1)日糧中添加鋅對(duì)綿羊睪丸、附睪中Zip1、Zip3、Zip6和Zip8 mRNA表達(dá)有一定的影響,Zip6 mRNA在綿羊睪丸中特異性高表達(dá),添加有機(jī)鋅促進(jìn)其表達(dá)且添加75 mg/kg有機(jī)鋅表達(dá)量最高,而添加無(wú)機(jī)鋅其表達(dá)沒(méi)有顯著變化;Zip8 mRNA在綿羊附睪體中特異性高表達(dá),添加有機(jī)鋅顯著促進(jìn)其表達(dá)且添加75 mg/kg有機(jī)鋅表達(dá)量最高,而添加無(wú)機(jī)鋅其表達(dá)沒(méi)有顯著變化。說(shuō)明日糧添加有機(jī)鋅對(duì)Zip1、Zip3、Zip6和Zip8 mRNA表達(dá)的影響大于添加無(wú)機(jī)鋅。(2)日糧添加鋅能促進(jìn)睪丸和附睪頭中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zip6的表達(dá)。(3)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zip6主要定位于精原細(xì)胞、精母細(xì)胞和附睪頭假?gòu)?fù)層柱狀上皮細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：綿羊 鋅 睪丸 附睪 Zips表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S826.5
【目錄】：

• 摘要7-9
• 1 綜述9-15
• 1.1 鋅的生物學(xué)功能9-11
• 1.1.1 鋅對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的影響9
• 1.1.2 鋅對(duì)免疫機(jī)能的影響9-10
• 1.1.3 鋅的抗氧化10
• 1.1.4 鋅對(duì)繁殖的影響10-11
• 1.2 鋅在飼料中的添加形式11-12
• 1.3 鋅在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)消化吸收機(jī)制12-13
• 1.4 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白13-15
• 1.4.1 Zip(SLC39A)家族13-14
• 1.4.2 ZnT(SLC30A)家族14-15
• 2 引言15-16
• 3 材料與方法16-23
• 3.1 試驗(yàn)動(dòng)物與處理16
• 3.2 飼料配制與飼養(yǎng)管理16-17
• 3.3 樣品采集17-18
• 3.4 試驗(yàn)儀器18-19
• 3.5 試驗(yàn)試劑19-20
• 3.6 試驗(yàn)方法20-23
• 3.6.1 引物設(shè)計(jì)20
• 3.6.2 總RNA提取20
• 3.6.3 總RNA濃度及完整性20-21
• 3.6.4 cDNA合成21
• 3.6.5 常規(guī)RT-PCR檢測(cè)21
• 3.6.6 QRT-PCR檢測(cè)21
• 3.6.7 Western blotting分析21-22
• 3.6.8 免疫組化分析22-23
• 3.7 數(shù)據(jù)處理23
• 4 試驗(yàn)結(jié)果23-37
• 4.1 RNA檢測(cè)結(jié)果23-24
• 4.2 PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果24-25
• 4.3 熒光定量結(jié)果25-30
• 4.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立25-26
• 4.3.2 睪丸和附睪中Zip1 mRNA表達(dá)量26-27
• 4.3.3 睪丸和附睪中Zip3 mRNA表達(dá)量27-28
• 4.3.4 睪丸和附睪中Zip6 mRNA表達(dá)量28-29
• 4.3.5 睪丸和附睪中Zip8 mRNA表達(dá)量29-30
• 4.4 睪丸和附睪中Zip6的蛋白表達(dá)量30-32
• 4.5 睪丸和附睪中Zip6的免疫組化結(jié)果32-37
• 5 分析與討論37-40
• 5.1 飼糧不同鋅水平對(duì)綿羊睪丸、附睪中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zips mRNA表達(dá)影響37-39
• 5.2 不同鋅水平對(duì)綿羊睪丸、附睪組織Zip6蛋白表達(dá)的影響39-40
• 5.3 不同鋅水平組對(duì)睪丸和附睪組織中Zip6免疫組化結(jié)果的影響40
• 6 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• Abstract45-47
• 致謝47

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 夏龍鋼;日糧添加鋅對(duì)綿羊睪丸、附睪鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zips表達(dá)的影響[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：日糧添加鋅對(duì)綿羊睪丸、附睪鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Zips表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：348941