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流感病毒與宿主細(xì)胞相互作用的棕櫚酰化蛋白的分析與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-04-19 17:14

  本文關(guān)鍵詞:流感病毒與宿主細(xì)胞相互作用的棕櫚;鞍椎姆治雠c鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:禽流感是由A型流感病毒引起的一種禽類(lèi)感染的綜合癥,高致病性禽流感(highly pathogenic avian influenza,HPAI)可引起禽類(lèi)的高死亡率。由于其可以跨物種傳播,所以人類(lèi)也是禽流感病毒的宿主之一。禽流感自發(fā)現(xiàn)以來(lái),已經(jīng)對(duì)人類(lèi)的身體健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)造成了巨大危害和損失,是近幾年對(duì)養(yǎng)禽業(yè)造成嚴(yán)重危害的病毒性傳染病之一,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(Office International Des Epizooties,OIE)和我國(guó)家畜家禽防疫條例均將HPAI規(guī)定為A類(lèi)烈性傳染病。本研究采用非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero細(xì)胞)培養(yǎng)禽流感病毒(H5N1),利用;-生物素置換(ABE)法和蛋白質(zhì)組學(xué)策略,結(jié)合生物質(zhì)譜技術(shù)對(duì)H5N1感染的宿主非洲綠猴腎細(xì)胞的棕櫚;揎椀牡鞍踪|(zhì)組進(jìn)行了鑒定分析。在流感病毒感染的Vero細(xì)胞的棕櫚;鞍踪|(zhì)組的研究結(jié)果如下:(1)空白對(duì)照樣品鑒定出226個(gè)候選蛋白,通過(guò)篩選得到56個(gè)高可信度棕櫚酰化修飾的蛋白。(2)病毒感染的Vero細(xì)胞樣品鑒定出172個(gè)候選蛋白,通過(guò)篩選得到28個(gè)高可信度棕櫚酰化修飾的蛋白。由于棕櫚酰化修飾主要發(fā)生在膜蛋白和膜相關(guān)蛋白中,因此,在傳統(tǒng)的棕櫚;鞍籽芯恐,科學(xué)家主要針對(duì)膜蛋白的棕櫚;M(jìn)行了研究,對(duì)于胞漿蛋白中的棕櫚;鞍缀苌傺芯俊R虼,本實(shí)驗(yàn)在研究了流感病毒宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)組的棕櫚;幕A(chǔ)上,又對(duì)流感病毒宿主Vero細(xì)胞的胞漿蛋白的棕櫚酰化修飾的變化進(jìn)行了進(jìn)一步的研究。在對(duì)流感病毒感染Vero細(xì)胞過(guò)程中胞漿蛋白的棕櫚酰化修飾變化的研究結(jié)果如下:(3)空白對(duì)照樣品中共鑒定出40個(gè)候選蛋白,通過(guò)篩選得到5個(gè)高可信度棕櫚;揎椀牡鞍。(4)病毒感染的Vero細(xì)胞樣品中共鑒定了56個(gè)候選蛋白,通過(guò)篩選得到17個(gè)高可信度棕櫚;揎椀牡鞍。
【關(guān)鍵詞】:禽流感 棕櫚酰化 質(zhì)譜 ;-生物素置換法 蛋白質(zhì)組
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:S852.65
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 縮略詞11-12
  • 引言12-25
  • 1 蛋白質(zhì)組學(xué)及其研究技術(shù)的簡(jiǎn)介12-14
  • 1.1 蛋白質(zhì)組學(xué)簡(jiǎn)介12
  • 1.2 蛋白質(zhì)組學(xué)分離技術(shù)簡(jiǎn)介12-14
  • 2 禽流感病毒與蛋白質(zhì)棕櫚;揎椇(jiǎn)介14-25
  • 2.1 從禽流感到人流感15-16
  • 2.2 蛋白質(zhì)的脂類(lèi)修飾16-18
  • 2.3 流感病毒蛋白質(zhì)的簡(jiǎn)介及其棕櫚酰化修飾18-22
  • 2.4 棕櫚;鞍踪|(zhì)的分析檢測(cè)方法22-25
  • 第一章 流感病毒感染的VERO細(xì)胞的棕櫚酰化蛋白質(zhì)組的研究25-40
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料25-26
  • 1.1 儀器與試劑25-26
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法26-28
  • 2.1 病毒感染和蛋白樣品制備26
  • 2.2 利用;-生物素置換反應(yīng)標(biāo)記和純化棕櫚;鞍26-27
  • 2.3 SDS-凝膠電泳(PAGE)分析27
  • 2.4 免疫酶聯(lián)吸附(ELISA)法對(duì)生物素標(biāo)記的蛋白進(jìn)行定量分析27
  • 2.5 利用胰蛋白酶水解蛋白樣品27
  • 2.6 利用 Zip Tip C18 Pipette Tips 微量層析柱處理樣品27-28
  • 2.7 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析鑒定蛋白28
  • 2.8 數(shù)據(jù)檢索28
  • 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-38
  • 3.1 SDS-凝膠電泳(PAGE)分析28-29
  • 3.2 免疫酶聯(lián)吸附(ELISA)法對(duì)生物素標(biāo)記的蛋白進(jìn)行定量分析29
  • 3.3 對(duì)質(zhì)譜鑒定得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析29-34
  • 3.4 對(duì)篩選得到的15個(gè)特異性蛋白質(zhì)進(jìn)行生物信息學(xué)分析34-36
  • 3.5 H5N1流感病毒的棕櫚;鞍椎姆治雠c鑒定36-38
  • 4 小結(jié)38-40
  • 第二章 流感病毒感染VERO細(xì)胞過(guò)程中胞漿蛋白的棕櫚;揎椬兓难芯40-48
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料40-41
  • 1.1 儀器與試劑40-41
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法41-42
  • 2.1 病毒感染和蛋白樣品制備41
  • 2.2 利用;-生物素置換反應(yīng)標(biāo)記和純化棕櫚;鞍41
  • 2.3 利用胰蛋白酶水解蛋白樣品41-42
  • 2.4 利用ZipTip C18 Pipette Tips微量層析柱處理樣品42
  • 2.5 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析鑒定蛋白42
  • 2.6 數(shù)據(jù)檢索42
  • 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-47
  • 3.1 對(duì)質(zhì)譜鑒定得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析42-45
  • 3.2 對(duì)篩選得到的16個(gè)特異性蛋白質(zhì)進(jìn)行生物信息學(xué)分析45-47
  • 4 小結(jié)47-48
  • 結(jié)論48-49
  • 參考文獻(xiàn)49-56
  • 附錄56-85
  • 作者簡(jiǎn)介及攻讀碩士期間所取得的科研成果85-86
  • 致謝86

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 叢蓓蓓;跨膜銜接蛋白CBP及其棕櫚;稽c(diǎn)突變?cè)贑D59介導(dǎo)的T系白血病中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究[D];青島大學(xué);2015年

2 張玉靈;蛋白質(zhì)棕櫚;{(diào)控?cái)M南芥根毛極性生長(zhǎng)的機(jī)理研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 高祥;流感病毒與宿主細(xì)胞相互作用的棕櫚;鞍椎姆治雠c鑒定[D];吉林大學(xué);2016年


  本文關(guān)鍵詞:流感病毒與宿主細(xì)胞相互作用的棕櫚;鞍椎姆治雠c鑒定,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):316751

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