FSHβ基因區(qū)域多態(tài)性與臺灣褐色菜鴨生產性狀關聯(lián)研究
本文關鍵詞:FSHβ基因區(qū)域多態(tài)性與臺灣褐色菜鴨生產性狀關聯(lián)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本實驗以臺灣褐色菜鴨為試驗材料,通過PCR-SSCP和測序技術對臺灣褐色菜FSHβ基因進行SNP檢測同時分析其多態(tài)性與各性狀的關聯(lián);通過實時熒光定量PCR技術,通過使用2-△△ct換算法對FFSHβ基因拷貝數(shù)進行定量,并分析其多態(tài)性與生產性能的關聯(lián)。(1)在臺灣褐色菜鴨FSHβ基因擴增序列的第106bp、第266bp和第267bp位點發(fā)現(xiàn)堿基替換(分別為A106C.C266T和A267G),并產生了HH、Hh和hh三種基因型,其中HH型為野生型,共有7個個體,Hh型共有46個個體,hh型共有41個個體;h等位基因頻率是0.6809,H等位基因頻率是0.3191;該基因座位的雜合度為0.4346;其多態(tài)信息含量為0.3401;FSHβ基因多態(tài)位點經χ2適應性檢驗表明處于平衡狀態(tài)。經關聯(lián)發(fā)現(xiàn),基因型Hh和基因型hh的個體的四周齡體重均顯著低于基因型HH的個體(P0.05);基因型Hh和基因型hh的個體的蛋重均顯著高于基因型HH的個體(P0.05);基因型Hh的個體蛋殼厚度極顯著低于基因型HH的個體(P0.01),同時基因型hh的個體也顯著低于基因型HH的個體(P0.05)。(2)將FFSHβ-F/FSHβ-R和|Anpl-DRA-F-F/Anpl-DRA-兩對引物進行定量PCR的擴增,應用熒光定量PCR儀自帶系統(tǒng),繪制標準曲線。FSHβ基因引物的曲線相關系數(shù)R2=0.996,擴增效率E=108.337%,斜率為-3.137;Anpl-DRA基因引物的曲線相關系數(shù)R2=0.990,擴增效率E=106.068%,斜率為-3.185。其中斜率差為0.048,擴增效率差為2.269%。(3)本試驗利用熒光定量PCR技術檢測鴨FSHβ基因拷貝數(shù)變異情況,共檢測五種變異類型,個體數(shù)分別為42、26、15、7、4。關聯(lián)分析顯示,臺灣褐色菜鴨FSHβ基因CNVs位點的五種拷貝數(shù)變異與其蛋殼厚度和蛋白高度均存在顯著相關(P0.05),在蛋殼厚度中五種拷貝數(shù)變異存在兩兩顯著差異,其中拷貝數(shù)為1的個體蛋殼厚度極顯著高于拷貝數(shù)為2的個體;拷貝數(shù)為Ⅳ的個體蛋白高度明顯低于拷貝數(shù)為Ⅰ、Ⅱ、和Ⅲ的個體;其余性各狀間均無顯著相關(P0.05)。
【關鍵詞】:SNP 拷貝數(shù) 多態(tài)性 FSHβ 鴨
【學位授予單位】:福建農林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S834
【目錄】:
- 摘要7-8
- Abstract8-10
- 第一章 文獻綜述10-20
- 1. DNA分子遺傳標記10
- 2. 單核苷酸多態(tài)性的研究進展10-14
- 2.1 單核苷酸多態(tài)性標記10-11
- 2.2 單核苷酸多態(tài)性檢測方法11-13
- 2.3 SNP在畜禽中的應用13-14
- 3 拷貝數(shù)變異的研究進展14-18
- 3.1 拷貝數(shù)變異的檢測方法14-16
- 3.2 CNVs在畜禽中的研究16-18
- 4 促卵泡素β亞基基因18-19
- 5 本研究的意義與目的19-20
- 第二章 FSHβ基因SNPs與鴨性狀關聯(lián)分析20-32
- 1 實驗材料20-21
- 1.1 實驗動物與性狀測定20
- 1.2 試驗所需儀器與設備20
- 1.3 主要試劑藥品及來源20
- 1.4 常用主要試劑20-21
- 2 試驗方法21-26
- 2.1 鴨基因組DNA提取21
- 2.2 基因組DNA的濃度及純度的檢測21
- 2.3 瓊脂糖凝膠電泳檢測21-22
- 2.4 引物的設計合成22
- 2.5 PCR擴增及檢測22-23
- 2.6 PCR-SSCP操作步驟23
- 2.7 銀染過程23-24
- 2.8 數(shù)據統(tǒng)計及性狀關聯(lián)分析24-26
- 3. 結果與分析26-30
- 3.1 基因組DNA提取26
- 3.2 FSHβ基因多態(tài)性檢測26-30
- 4 討論30-32
- 第三章 FSHβ基因拷貝數(shù)變異與各性狀關聯(lián)分析32-44
- 1 實驗材料32
- 1.1 實驗動物與性狀測定32
- 1.2 試驗所需儀器與設備32
- 1.3 主要試劑藥品及來源32
- 2. 試驗方法32-37
- 2.1 鴨基因組DNA提取32
- 2.2 基因組DNA的濃度及純度的檢測32
- 2.3 引物的設計與合成32-33
- 2.4 PCR擴增及檢測33
- 2.5 標準品的構建33-34
- 2.6 建立標準曲線34-36
- 2.7 FSHβ基因拷貝數(shù)檢測36
- 2.8 FSHβ基因CNVs與生產性能相關性分析36-37
- 3. 結果與分析37-42
- 3.1 FSHβ基因和Anpl-DRA基因引物擴增檢測37
- 3.2 重組質粒的檢測37-38
- 3.3 引物標準曲線的繪制38-40
- 3.4 FSHβ基因拷貝數(shù)的檢測40-42
- 4 討論42-44
- 全文結論44-45
- 參考文獻45-52
- 附表52-54
- 致謝54
【參考文獻】
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本文關鍵詞:FSHβ基因區(qū)域多態(tài)性與臺灣褐色菜鴨生產性狀關聯(lián)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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