兩種布魯氏菌弱毒株侵染小鼠巨噬細(xì)胞過(guò)程的熒光表征及分析
本文關(guān)鍵詞:兩種布魯氏菌弱毒株侵染小鼠巨噬細(xì)胞過(guò)程的熒光表征及分析,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:通過(guò)對(duì)綠色熒光蛋白(GFP)布魯氏菌弱菌株M5(GFP-M5)和S19(GFP-S19)侵染小鼠巨噬細(xì)胞(RAW264.7)及對(duì)其與胞內(nèi)溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體初次結(jié)合所用時(shí)間進(jìn)行測(cè)定,探討分析兩種布魯氏菌弱毒株侵染小鼠巨噬細(xì)胞過(guò)程的熒光表征。將GFP-M5和GFP-S19分不同時(shí)間段分別侵染RAW264.7,利用激光共聚焦和流式細(xì)胞儀觀察和檢測(cè)。結(jié)果顯示,GFP-M5和GFP-S19均構(gòu)建成功。布魯氏菌M5和S19及GFP-M5和GFP-S19侵染RAW264.7后胞內(nèi)生存能力無(wú)明顯差異。GFP-M5和GFP-S19侵染30min后均已進(jìn)入小鼠巨噬細(xì)胞,2h分別到達(dá)溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。而兩種弱毒株在1、2、3、4h與各細(xì)胞器結(jié)合率相近。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,GFP-M5和GFP-S19侵染RAW264.7的GFP+細(xì)胞含量無(wú)顯著差異(P0.05)。結(jié)果提示,兩種弱毒株在侵染進(jìn)入宿主細(xì)胞的初期及侵襲能力并沒(méi)有明顯差異。
【作者單位】: 石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 布魯氏菌 綠色熒光蛋白(GFP) RAW. 共聚焦顯微鏡 流式細(xì)胞儀
【基金】:國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)(2010CB530200)
【分類號(hào)】:S852.61
【正文快照】: 布魯氏菌(Brucellaspp.)是一種兼性細(xì)胞內(nèi)寄生菌,無(wú)鞭毛,與類α-變形菌極其相似的菌種,可引起許多動(dòng)物疾病并能誘導(dǎo)人慢性感染。對(duì)于侵染宿主的細(xì)菌來(lái)說(shuō),細(xì)菌在宿主吞噬細(xì)胞內(nèi)的生存和復(fù)制是細(xì)菌引起宿主發(fā)病的關(guān)鍵[1],因此研究細(xì)菌在吞噬細(xì)胞中的生存方式尤為重要。細(xì)菌可穿
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