本文關鍵詞：H9N2亞型AIV感染雞腦組織損傷及細胞凋亡的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：H9N2亞型禽流感病毒(Avain influenza virus,AIV)屬低致病性的禽流感病毒,廣泛分布于世界各地。家禽感染H9N2亞型AIV后除了引起咳嗽,呼吸困難、產蛋下降等臨床癥狀外,還能引起感染雞歪頭,伸頸等神經癥狀。然而,目前關于H9N2亞型AIV感染雞后腦組織損傷方面的研究很少。為了闡明H9N2亞型AIV感染雞后對腦組織損傷的致病機理,本次試驗用H9N2亞型AIV(A/chicken/Shaanxi/11/2012)毒株采用滴鼻點眼的方法人工感染10周齡非免疫健康雞,在感染后不同時間采取發(fā)病雞腦組織,HE染色觀察腦組織的病理組織學變化,TUNEL和Caspase-3酶活性法檢測H9N2 AIV誘導的腦組織細胞凋亡情況。結果如下:1.H9N2亞型AIV人工感染10周齡非免健康雞,采用滴鼻點眼的方法感染H9N2AIV。每天觀察記錄雞的臨床癥狀,并分別在感染后第0 d、2 d、4 d、6 d、8 d、15 d放血處死5只小雞,無菌采集腦組織。用HE染色,觀察攻毒后雞腦組織發(fā)生的組織學病變;結果顯示大腦組織軟腦膜下血管擴張、充血,神經元變性、壞死,退行性變化的神經元胞漿內可見多個小膠質細胞侵入;小腦組織疏松、水腫,神經元內尼氏小體消失;細胞出現(xiàn)空泡,細胞核濃縮,溶解消失,炎性細胞浸潤,常環(huán)繞血管,集聚于血管周圍形成血管套。2.TUNEL染色結果顯示H9N2亞型AIV感染小雞腦組織發(fā)生細胞凋亡,且隨著感染天數(shù)的增加,細胞凋亡越明顯,并在4 d和6 d時,細胞凋亡最嚴重。在感染后第4 d檢測大腦和小腦組織中Caspase-3酶活性均比健康雞高。凋亡檢測證實了H9N2亞型AIV感染小雞可誘導腦組織細胞發(fā)生凋亡。綜上所述,H9N2亞型AIV感染小雞后,腦組織發(fā)生了不同程度的非化膿性腦炎病理學損傷和組織細胞凋亡,隨著時間的推移,組織損傷和細胞凋亡更嚴重,感染后4 d-6d是病理損傷最嚴重的時期。隨后雞群逐步康復,在感染后15 d臨床癥狀基本恢復正常。試驗表明,H9N2亞型AIV感染能引起小雞腦組織非化膿性炎癥,從而導致雞出現(xiàn)神經癥狀。
【關鍵詞】：H9N2亞型禽流感病毒 腦組織 病理變化 凋亡 雞
【學位授予單位】：西北農林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S858.31
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 文獻綜述10-18
• 第一章 禽流感病毒的研究進展10-18
• 1.1 禽流感病毒概述10-13
• 1.1.1 禽流感概述10
• 1.1.2 病原學10-11
• 1.1.3 致病性11-12
• 1.1.4 宿主范圍12-13
• 1.1.5 H9N2亞型禽流感病毒13
• 1.2 AIV對神經系統(tǒng)致病性的研究13-15
• 1.2.1 神經系統(tǒng)13-14
• 1.2.2 中樞神經系統(tǒng)的防御機制14
• 1.2.3 禽流感對神經系統(tǒng)致病性研究14-15
• 1.3 禽流感誘導細胞凋亡機制研究概況15-17
• 1.3.1 細胞凋亡15
• 1.3.2 細胞凋亡的機制15-17
• 1.4 本研究的目的及意義17-18
• 試驗研究18-33
• 第二章 小雞感染H9N2亞型AIV后腦組織病理學觀察18-24
• 2.1 材料18
• 2.1.1 毒株18
• 2.1.2 試驗動物18
• 2.1.3 主要試劑儀器18
• 2.2 方法18-20
• 2.2.1 病毒復蘇與增殖18-19
• 2.2.2 測定病毒的EID5019
• 2.2.3 人工感染試驗19
• 2.2.4 石蠟切片的制作19-20
• 2.2.5 HE染色20
• 2.2.6 顯微照相20
• 2.3 結果20-23
• 2.3.1 感染雞的臨床癥狀20-21
• 2.3.2 感染小雞的病理變化21-23
• 2.4 討論23
• 2.5 小結23-24
• 第三章 H9N2亞型AIV感染小雞后腦組織細胞凋亡檢測24-33
• 3.1 材料24
• 3.1.1 毒株24
• 3.1.2 試驗動物24
• 3.1.3 主要試劑儀器24
• 3.2 方法24-27
• 3.2.1 動物感染試驗24-25
• 3.2.2 石蠟切片的制作25
• 3.2.3 TUNEL法染色25-26
• 3.2.4 組織中Caspase-3 酶活性檢測26-27
• 3.2.5 顯微照相27
• 3.3 結果27-32
• 3.3.1 感染雞大腦和小腦組織TUNEL染色27-29
• 3.3.2 Caspase-3 酶活性檢測情況29-32
• 3.4 討論32
• 3.5 小結32-33
• 結論33-34
• 參考文獻34-38
• 致謝38-39
• 作者簡介39

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