本文選題：新城疫 + 重組病毒��； 參考：《吉林大學》2017年碩士論文

【摘要】：新城疫是危害我國養(yǎng)禽業(yè)最嚴重的疫病之一,世界各國對新城疫的防控和研究一直十分重視。有研究表明,基因Ⅶ型已成為我國新城疫病毒流行的主要優(yōu)勢基因型,而目前廣泛使用的新城疫弱毒疫苗(如La Sota)均屬于基因Ⅱ型,雖然在降低發(fā)病率和死亡率上能夠提供保護,但免疫雞的組織器官在強毒感染下仍會產生病變。使用與流行毒株相同基因型的疫苗,不僅能有效降低攻毒后免疫雞群的排毒時間,而且能顯著減少喉氣管和泄殖腔中的病毒含量。因此,使用與流行基因型一致的疫苗株來防控新城疫,對于有效控制疫情的發(fā)展具有絕對優(yōu)勢,所以研制新城疫基因Ⅶ型弱毒疫苗迫在眉睫。本研究是以新城疫重組突變株rm NA-1為研究對象,評價其在雞胚內繼代以及雞體內繼代的遺傳穩(wěn)定性、免疫安全性及免疫效力,并與當前最常使用的商品疫苗La Sota作免疫效果的比較,為研制與當前流行株相匹配的疫苗候選株奠定基礎。同時,該研究也是為了完成農業(yè)部“新城疫診斷與防控及示范”專項并為申報新獸藥證書提供實驗依據。主要內容如下:Ⅰ.重組病毒rm NA-1株遺傳穩(wěn)定性試驗為了確定新城疫突變致弱重組病毒rm NA-1的遺傳穩(wěn)定性,本部分研究進行雞胚內繼代遺傳穩(wěn)定性試驗和雞體內繼代遺傳穩(wěn)定性試驗。重組病毒在雞胚傳至10代保持遺傳穩(wěn)定性,在此基礎上繼續(xù)傳至24代,突變位點依舊保持穩(wěn)定遺傳,未發(fā)生回復突變,表明突變致弱株rm NA-1至少能在雞胚內穩(wěn)定遺傳24代。此外,為了更好確定重組病毒的穩(wěn)定性,本研究進行了動物回歸實驗。重組病毒在雞體內連續(xù)傳至6代,重組病毒依舊保持遺傳穩(wěn)定性,表明突變致弱株rm NA-1至少能在雞體內穩(wěn)定遺傳6代。因此,遺傳穩(wěn)定性良好的基因Ⅶ型重組致弱株rm NA-1具有成為新一代新城疫疫苗種毒的前景。Ⅱ.重組病毒rm NA-1株實驗室安全性試驗為了確保rm NA-1株病毒的安全性,本部分研究使用rm NA-1雞胚尿囊液(約為使用劑量的100倍)以滴鼻的方式接種3日齡SPF雛雞10只。兩周后,所有雛雞均未出現新城疫臨床癥狀,剖檢也未出現組織病變,表明此疫苗候選株安全性良好。Ⅲ.重組病毒rm NA-1株實驗室免疫效力試驗為了測定重組病毒rm NA-1疫苗候選株的最小免疫劑量,本部分研究按不同病毒含量接種7日齡SPF雛雞,三周后攻毒,統(tǒng)計各組雞群存活率,測得重組病毒rm NA-1弱毒株的最小免疫劑量為5×104EID50。為了判斷rm NA-1疫苗候選株對雞群的免疫效力,以2×106EID50接種劑量免疫7日齡SPF雛雞40只,免疫后持續(xù)監(jiān)測HI抗體水平,并分別于免疫后3周、6周、7周、8周、9周、10周六個時間點,隨機抽取5只免疫后SPF雛雞,以105ELD50攻毒劑量接種新城疫NA-1強毒株,統(tǒng)計結果表明各時間點雞只的存活率均為100%,確定重組病毒rm NA-1疫苗候選株的免疫持續(xù)期至少為8周。Ⅳ.與商品疫苗La Sota株進行免疫效果比較通過比較商品疫苗和重組疫苗免疫后以及攻毒后雞群的HI抗體水平,重組病毒組HI抗體水平在攻毒后迅速大幅度下降后上升,隨即恢復平穩(wěn);而商品疫苗組的HI抗體水平未見波動而直接上升。結果能夠體現出當流行毒株和疫苗株的基因型與抗原性相匹配時,疫苗所產生的抗體會中和一定量的病毒,后迅速刺激機體產生免疫應答。商品疫苗組雖在臨床表現和存活率上和重組疫苗組結果一致,但攻毒后商品疫苗組雞只的體重增長情況遠遠低于重組疫苗組,且口咽和泄殖腔排毒的時間更長;商品疫苗組病理組織切片也顯示出有一定的病變,表明商品疫苗免疫雞群在受到新城疫NA-1強毒株感染后,對動物本身的損傷無法避免。
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【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S852.4

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本文編號：1754031