貴州省地方品種雞禽白血病病毒流行株的亞型鑒定及其分子特征分析
本文選題:禽白血病病毒 切入點(diǎn):貴州 出處:《中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年03期
【摘要】:為了解貴州省9個(gè)地方品種雞群中禽白血病病毒(ALV)流行株亞型與分子特征,本研究2016年從該省8個(gè)地區(qū)9個(gè)地方品種雞群共采集380份雞蛋樣品。采集卵白用ELISA試劑盒檢測(cè)ALV-P27抗原,陽(yáng)性卵白接種CEF和DF1細(xì)胞分離病毒,培養(yǎng)7 d后檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中ALV-P27抗原,對(duì)感染細(xì)胞cDNA以4對(duì)ALV特異性引物進(jìn)行PCR鑒定與分型。并選取9個(gè)雞群的部分ALV分離株進(jìn)行g(shù)p85基因的克隆測(cè)序與序列分析。結(jié)果表明,9個(gè)雞群的卵白樣品ALV-P27抗原陽(yáng)性率為0~36%;陽(yáng)性卵白的CEF和DF1細(xì)胞培養(yǎng)上清P27抗原檢測(cè)結(jié)果相同,陽(yáng)性率為26.8%(15/56),并鑒定出其亞型全部為J亞型(ALV-J)。已測(cè)序的21株ALV-J gp85基因序列與國(guó)內(nèi)外ALV-J參考株同源性為86.6%~100%;進(jìn)化樹(shù)分析顯示,21株ALV-J分離株在不同的分支,其進(jìn)化關(guān)系和來(lái)源之間未發(fā)現(xiàn)明顯規(guī)律。本研究表明,貴州省9個(gè)地方品種雞群有6個(gè)存在ALV-J感染。其中,3個(gè)當(dāng)?shù)嘏嘤钠贩N雞ALV感染率為0;而來(lái)自3個(gè)地區(qū)的綠殼蛋雞ALV-P27抗原陽(yáng)性率普遍較高(26.7%~36.0%)。本研究補(bǔ)充了我國(guó)禽白血病流行病學(xué)的數(shù)據(jù)并為該病的防制提供了調(diào)查依據(jù)。
[Abstract]:In order to understand the subtypes and molecular characteristics of avian leukemia virus (ALV) epidemic strains in 9 local breeds of chickens in Guizhou Province, 380 egg samples were collected from 9 local breeds of chickens in 8 regions of Guizhou province in 2016.Egg white was collected and tested for ALV-P27 antigen with ELISA kit. The positive egg white was inoculated with CEF and DF1 cells to isolate the virus. After 7 days of culture, the ALV-P27 antigen in the culture medium was detected. The cDNA of infected cells was identified and typed by PCR with 4 pairs of ALV specific primers.Partial ALV isolates from 9 chicken populations were selected for cloning, sequencing and sequencing of the gp85 gene.The results showed that the positive rate of ALV-P27 antigen in egg white samples of 9 flocks was 0 ~ 366.The positive rate of P27 antigen in the supernatant of CEF and DF1 cells cultured with positive egg white was the same, and the positive rate was 26.8%, and all the subtypes were identified as subtype J ALV-JN.The sequence of 21 ALV-J gp85 genes sequenced was 86.6% homology with ALV-J reference strains at home and abroad, and the phylogenetic tree analysis showed that 21 ALV-J isolates were in different branches, and there was no obvious regularity between their evolutionary relationships and sources.The results showed that ALV-J infection was found in 6 chickens of 9 local breeds in Guizhou province.Among them, the ALV infection rate of three local breeds was 0, while the positive rate of ALV-P27 antigen of green shell laying hens from three regions was generally higher than 26.7g / 36.0.This study supplements the epidemiological data of avian leukemia in China and provides an investigation basis for the prevention and control of the disease.
【作者單位】: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】:國(guó)家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科技專項(xiàng)(201203055) 江蘇省動(dòng)物預(yù)防醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題
【分類(lèi)號(hào)】:S852.65
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本文編號(hào):1717997
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