本文關(guān)鍵詞：獸醫(yī)微生物課程綜合性實(shí)驗(yàn)的開(kāi)設(shè)與思考——以葡萄球菌與鏈球菌的分離鑒定為例，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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Key words Veterinary Microbiology;Staph3,us;us;Isolation and prehensive experiment 獸醫(yī)微生物學(xué)是動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)中一門重要的專業(yè)基礎(chǔ)課程,具有很強(qiáng)的實(shí)踐性與應(yīng)用性 J。通過(guò)該課程的學(xué)習(xí), 不僅使學(xué)生牢固掌握獸醫(yī)微生物學(xué)研究的基本方法與實(shí)驗(yàn)技術(shù),同時(shí)加深對(duì)獸醫(yī)微生物學(xué)基本理論知識(shí)的理解與認(rèn)識(shí),為進(jìn)一步學(xué)習(xí)動(dòng)物醫(yī)學(xué)其他專業(yè)課程奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。通過(guò)系統(tǒng)的學(xué)習(xí),如何使學(xué)生掌握獸醫(yī)微生物學(xué)的規(guī)范化、科學(xué)化操作技能,牢固樹(shù)立無(wú)菌觀念和熟練掌握無(wú)菌操作技術(shù),培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度,提高分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力是獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)的關(guān)鍵 J。綜合性實(shí)驗(yàn)是指在掌握一定基礎(chǔ)理論知識(shí)和基本操作技能的基礎(chǔ)上,運(yùn)用某一課程或多門課程知識(shí),對(duì)實(shí)驗(yàn)技能和實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜合訓(xùn)練的一種復(fù)合性實(shí)驗(yàn)”。綜合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)是學(xué)生鞏固和提高所學(xué)理論知識(shí)、實(shí)驗(yàn)操作技能的重要環(huán)節(jié)。它對(duì)學(xué)生提出了更高的要求,不僅要把課堂上教師講述的理論知識(shí)消化好,更要拓寬自己的知識(shí)面。因此,綜合性實(shí)驗(yàn)并不是傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)的簡(jiǎn)單綜合,也不是被動(dòng)地按照教師布置的內(nèi)容進(jìn)行操作,而是需要自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)思路、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)用品、主動(dòng)動(dòng)手操作等。青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中約 1/4的實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn),其余 3/4為綜合性實(shí)驗(yàn)。大量綜合性實(shí)驗(yàn)對(duì)學(xué)生理解理論知識(shí)、掌握系統(tǒng)的微生物學(xué)方法至關(guān)重要。筆者以葡萄球菌與鏈球菌的分離鑒定為例,從學(xué)生的角度,探討了獸醫(yī)微生物綜合性實(shí)驗(yàn)的開(kāi)設(shè)。 1 綜合性實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)和組織 1.1 實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)包括:常用器皿的洗滌與包裝,細(xì)菌的染色,細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)的顯微鏡觀察,細(xì)菌培養(yǎng)基的制備,細(xì)菌的培養(yǎng)方法。綜合性實(shí)驗(yàn)“葡萄球菌與鏈球菌的分離鑒定”就是在掌握細(xì)菌培養(yǎng)基制備、倒平板、分離劃線、染色鏡檢等知識(shí)的基礎(chǔ)上,結(jié)合學(xué)到的葡萄球菌和鏈球菌的理論知識(shí),進(jìn)行葡萄球作者簡(jiǎn)介王婷(1990一),女,山東濱州人,碩士研究生,研究方向:獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)。 通訊作者,教授,博士,碩士生導(dǎo)師, 從事獸醫(yī)微生物學(xué)與免疫學(xué)研究,E—mail:renren0228@sina. co n o 收稿日期 2013-04-21 菌與鏈球菌的分離鑒定。獸醫(yī)微生物學(xué)的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)或驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)的開(kāi)設(shè)方式與其他課程的實(shí)驗(yàn)開(kāi)設(shè)方法相似,基本上都由教師把實(shí)驗(yàn)內(nèi)容書(shū)寫在黑板上,結(jié)合實(shí)驗(yàn)教材,在教師的安排下,根據(jù)黑板上的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行基礎(chǔ)理論的驗(yàn)證和基本技能的訓(xùn)練,這種教學(xué)方法養(yǎng)成了學(xué)生的依賴思想,只是模仿操作不動(dòng)腦深入思考。而綜合性實(shí)驗(yàn)需要自己設(shè)計(jì)試驗(yàn),分組開(kāi)展試驗(yàn),師生一起討論試驗(yàn)步驟及采取的鑒定思路。課前 5~10 min為小組討論時(shí)間,然后每個(gè)實(shí)驗(yàn)組派 1個(gè)代表闡述自己的鑒定思路,由教師及其他組學(xué)生進(jìn)行評(píng)價(jià),相當(dāng)于小型開(kāi)題報(bào)告。通過(guò)論證,形成切實(shí)可行的思路后學(xué)生開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。教師只負(fù)責(zé)幫助學(xué)生整理思路,監(jiān)督檢查學(xué)生的實(shí)驗(yàn)規(guī)范,更多地需要依靠學(xué)生自己發(fā)揮主觀能動(dòng)性,按照可行的思路,用基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)中掌握的技術(shù)和方法開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。對(duì)葡萄球菌與鏈球菌進(jìn)行分離鑒定,結(jié)合課本的理論知識(shí),得出鑒定思路。學(xué)生可以通過(guò)葡萄球菌和鏈球菌的培養(yǎng)特性、形態(tài)檢查、生化試驗(yàn)進(jìn)行兩種菌的鑒定。按科赫法則的順序來(lái)鑒定細(xì)菌,拿到待檢菌,選擇普通細(xì)菌培養(yǎng)基和血瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng),得到該菌的純培養(yǎng)。只有得到純培養(yǎng)才能進(jìn)一步做形態(tài)鑒定和生化鑒定。獸醫(yī)l臨床的病原球菌都是革蘭氏陽(yáng)性菌,分為葡萄球菌和鏈球菌 2個(gè)屬。按照國(guó)際通用的分類方法,在確定為革蘭氏陽(yáng)性球菌的基礎(chǔ)上,對(duì)細(xì)菌的單菌落(純培養(yǎng))進(jìn)行觸酶試驗(yàn),陽(yáng)性者為葡萄球菌,陰性者為鏈球菌。如果進(jìn)一步對(duì)葡萄球菌進(jìn)行鑒定, 再做血漿凝固酶試驗(yàn),陽(yáng)性者為金黃色葡萄球菌,陰性者為表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。如果要進(jìn)一步對(duì)鏈球菌進(jìn)行鑒定,有許多方法,其中確定鏈球菌的溶血性是常用的方法,出現(xiàn) p溶血的致病性最高,其次為 溶血, 溶血即不溶血,一般沒(méi)有致病性,必要時(shí)可進(jìn)行血清型的鑒定,如對(duì)各地分離的豬鏈球菌進(jìn)行血清群的鑒定。在主要性狀鑒定的基礎(chǔ)上,可進(jìn)行其他性狀的鑒定。如”對(duì)甘露醇的利用“實(shí)驗(yàn)常常作為鑒定葡萄球菌致病性的依據(jù),能利用的通常具有致病性,金黃色葡萄球菌能分解甘露醇等。 4l卷 l4期 王婷等獸醫(yī)微生物課程綜合性實(shí)驗(yàn)的開(kāi)設(shè)與思考 6573 1.2 實(shí)驗(yàn)的組織只有把實(shí)驗(yàn)所能用到的器材準(zhǔn)備齊全后才能保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。從培養(yǎng)皿的洗刷、包裝及干烤滅菌,各種培養(yǎng)基的制作及高壓蒸汽滅菌,革蘭氏染色液及各種試劑的配制等最基本的準(zhǔn)備工作,使學(xué)生學(xué)習(xí)這方面的知識(shí)及一些注意事項(xiàng)�；A(chǔ)性實(shí)驗(yàn)中所用的無(wú)菌平板都是由教師直接提供,而在綜合性實(shí)驗(yàn)中需要自己動(dòng)手洗刷平板, 包裝并進(jìn)行干烤滅菌;實(shí)驗(yàn)中所用的培養(yǎng)基也需要學(xué)生自己配制并進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。通過(guò)參與實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作,極大地鍛煉了學(xué)生的動(dòng)手能力。在實(shí)驗(yàn)思路的指導(dǎo)下,按照順序準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn),開(kāi)展實(shí)驗(yàn),再一次鍛煉了細(xì)菌培養(yǎng)基的制備、細(xì)菌的分離培養(yǎng)及染色鏡檢,明確了細(xì)菌鑒定的一般思路,熟練了操作方法。 2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在的問(wèn)題實(shí)驗(yàn)過(guò)程暴露出了幾個(gè)問(wèn)題,簡(jiǎn)單歸納如下:①血平板的制作。鏈球菌通常對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求高,需要

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