【目的】牛傳染性鼻氣管炎由BoHV-1感染引起,我國(guó)對(duì)該病的防控尚缺乏商品化標(biāo)記疫苗,本實(shí)驗(yàn)室前期成功研制了BoHV-1 gG^-/tk^-基因缺失疫苗,并通過將BoHV-1和Bo HV-插入BoHV-1 gG^-/tk^-的tk位置,構(gòu)建了重組病毒BoHV-1 gG^-/tk^-/g D+和BoHV-1 gG^-/tk^-/g D5+。本研究的目的在于評(píng)價(jià)該重組病毒在兔體內(nèi)5的免疫原性最好的糖蛋白g D的胞外區(qū)序列分別的安全性和免疫原性及對(duì)BoHV-1保護(hù)力和Bo HV-5的交叉保護(hù)力,以期開發(fā)出更為有效的牛傳染性鼻氣管炎標(biāo)記疫苗。【方法】選用30只日本大耳白兔并隨機(jī)分成6組,鼻腔接種和攻毒。通過臨床癥狀觀察、體溫測(cè)量和鼻腔排毒檢測(cè)進(jìn)行安全性評(píng)估。接種28 d后分別使用wt BoHV-1和wt Bo HV-5對(duì)兔體進(jìn)行攻擊,并通過臨床癥狀觀察、體溫測(cè)量、鼻腔排毒、病理組織學(xué)和組織病毒的分離鑒定進(jìn)行保護(hù)力研究。使用間接ELISA...

【文章頁(yè)數(shù)】：14 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 病毒毒株、細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:
        1.1.2 主要試劑和儀器:
    1.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 接種和攻毒:
        1.2.2 重組病毒安全性研究:
        1.2.3 抵抗同型病毒wt Bo HV-1的研究:
        1.2.4 抵抗異型病毒wt Bo HV-5的研究:
    1.3 檢測(cè)方法
        1.3.1 病毒的形態(tài)學(xué)檢測(cè):
        1.3.2 感染兔組織病毒的分離:
        1.3.3 病毒感染兔組織核酸的PCR檢測(cè):
        1.3.4 兔肺組織石蠟包埋切片制備方法:
        1.3.5 鼻腔排毒檢測(cè):
        1.3.6 中和抗體的檢測(cè):
        1.3.7 間接ELISA檢測(cè)Bo HV抗體:
        1.3.8 外周血單核細(xì)胞增殖水平的檢測(cè):
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
2 結(jié)果與分析
    2.1 重組病毒形態(tài)觀察
    2.2 重組病毒的安全性研究
    2.3 重組毒免疫抵抗野毒感染能力研究
        2.3.1 抵抗同型病毒wt Bo HV-1感染:
        2.3.2 抵抗異型病毒wt Bo HV-5感染的研究:
    2.4 重組病毒的免疫原性研究
        2.4.1 中和抗體檢測(cè):
        2.4.2 間接ELISA檢測(cè)Bo HV-1和Bo HV-5抗體:
        2.4.3 接種后外周血單核細(xì)胞增殖水平的檢測(cè):
3 討論
    3.1 雙拷貝糖蛋白g D提高了重組病毒的免疫原性
    3.2 雙拷貝糖蛋白g D重組病毒對(duì)兔體的安全性



本文編號(hào)：4000342