發(fā)布時(shí)間：2017-10-06 12:10

  本文關(guān)鍵詞：EV71病毒受體、Toll樣受體及其相關(guān)信號(hào)通路在EV71感染死亡病例中的影響及意義

  更多相關(guān)文章： 腸道病毒71型 病毒受體 Toll樣受體 信號(hào)通路

【摘要】：目的:最近幾年已有研究通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)鑒定出EV71病毒除了有SCARB2這一特異性細(xì)胞表面受體之外,還存在另外兩種特異性細(xì)胞表面受體,即PSGL-1、Annexin A2。在EV71感染人體組織中有2篇文獻(xiàn)報(bào)道與PSGL-1有關(guān),而無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道Annexin A2。同時(shí),有研究表明TLR3和TLR8分別可以識(shí)別某些雙鏈RNA病毒、單鏈RNA病毒,然而未見(jiàn)在人體組織中探討TLR/MyD88下游信號(hào)分子在EV71感染所致重癥手足口病中的影響。因此,本研究擬通過(guò)免疫組化法檢測(cè)PSGL-1、Annexin A2是否在EV71感染時(shí)提供入侵人體組織的基礎(chǔ);探討TLR3 mRNA和TLR8 mRNA在EV71感染中的意義;闡明TLR/MyD88下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子IRAK-1、TRAF-6、NF-κB p65在EV71感染所致炎癥反應(yīng)中的作用。方法:將9例EV71感染死亡病例(EV71組)作為研究對(duì)象,7例非感染性疾病死亡病例(對(duì)照組)作為對(duì)照,研究已通過(guò)本院倫理委員會(huì)審核及批準(zhǔn)同意,所有死亡病例家長(zhǎng)均已簽尸檢知情同意書。采用免疫組化(IHC)法檢測(cè)PSGL-1、Annexin A2、TLR3、TLR8、IRAK-1、TRAF-6及NF-κB p65的表達(dá),采用原位雜交(ISH)法檢測(cè)TLR3 mRNA和TLR8 mRNA的表達(dá)。應(yīng)用Image Pro Plus version 6.0(IPP 6.0)圖像分析軟件檢測(cè)圖片陽(yáng)性積分光密度(iod)值,再用spss18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果:(1)ev71受體檢測(cè)結(jié)果:ihc法檢測(cè)顯示psgl-1和annexina2在ev71組和對(duì)照組肺、腦組織中均有陽(yáng)性表達(dá),在ev71組肺組織中的iod值分別為125033、9376,在對(duì)照組肺iod值分別為60939、4179,兩組比較,p0.05;psgl-1和annexina2在ev71組腦組織中的iod值分別為49871、39883,在對(duì)照組腦組織中的iod值分別為9932,3810,兩組比較,p0.05。(2)tlrs檢測(cè)結(jié)果:(1)ish法檢測(cè)肺組織tlr3mrna,ev71組9例中有4例、對(duì)照組7例中有3例肺泡上皮細(xì)胞、支氣管壁上皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞胞漿呈陽(yáng)性;ish法檢測(cè)腦組織tlr3mrna,ev71組9例中僅1例有少許小膠質(zhì)細(xì)胞呈弱陽(yáng)性,對(duì)照組均呈陰性表達(dá)。ihc法檢測(cè)顯示ev71組9例肺、腦組織tlr3均呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)。(2)ish法檢測(cè)肺組織tlr8mrna,在ev71組9例中有4例、對(duì)照組7例中僅1例部分支氣管壁上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞胞漿呈陽(yáng)性;ish法檢測(cè)腦組織tlr8mrna,在ev71組9例中僅1例、對(duì)照組7例中有2例神經(jīng)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的胞漿可見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)。ihc法檢測(cè)顯示ev71組9例肺、腦組織tlr8均呈現(xiàn)陽(yáng)性至強(qiáng)陽(yáng)表達(dá)。(3)ihc法和ish法檢測(cè)陽(yáng)性表達(dá)得分比較:ihc法和ish法分別檢測(cè)ev71組肺組織中tlr3、tlr3mrna的陽(yáng)性表達(dá)得分分別為3.78±0.67、1.11±0.93;在ev71組腦組織中tlr3、tlr3mrna的陽(yáng)性表達(dá)得分分別為3.33±0.5、0.89±0.67。ihc法和ish法分別檢測(cè)ev71組肺組織中tlr8、tlr8mrna的的陽(yáng)性表達(dá)得分分別為5.22±0.83、1.44±0.53;在ev71組腦組織中tlr8、tlr8mrna的的陽(yáng)性表達(dá)得分分別為4.56±0.73、0.78±0.67。兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性表達(dá)得分在各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)TLRs信號(hào)傳導(dǎo)分子檢測(cè)結(jié)果:免疫組化法檢測(cè)顯示IRAK-1、TRAF-6和NF-κB p65在兩組肺、腦中均有陽(yáng)性表達(dá),在EV71組肺組織中IOD值分別為15198、10605、78733,在對(duì)照組肺組織中IOD值分別為123613、56820、5165,兩組比較,P均小于0.05;IRAK-1、TRAF-6和NF-κB p65在EV71組腦組織中的IOD值分別為8324、3240、35855,在對(duì)照組腦組織中IOD值分別為20079、7179、5251,兩組相比,P均0.05。結(jié)論:(1)人腦、肺組織均存在EV71病毒受體(PSGL-1與Annexin A2),示EV71能夠通過(guò)與病毒受體結(jié)合直接侵犯腦、肺組織。(2)TLR/MyD88下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子IRAK-1、TRAF-6、NF-κB p65可能參與了EV71感染所致重癥手足口病的促炎反應(yīng)及抑炎反應(yīng)過(guò)程。(3)對(duì)于陳舊性的經(jīng)10%福爾馬林固定及包埋的人腦、肺組織,IHC法比ISH法更敏感檢測(cè)TLRs的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：腸道病毒71型 病毒受體 Toll樣受體 信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R512.5
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 英漢縮略詞對(duì)照表12-13
• 前言13-17
• 1 材料與方法17-25
• 1.1 研究對(duì)象17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑與儀器17-20
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法及步驟20-24
• 1.4 結(jié)果判讀與圖片檢測(cè)24
• 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析24-25
• 2 結(jié)果25-37
• 2.1 PSGL-1 在肺、腦組織中的表達(dá)25-26
• 2.2 Annexin A2在肺、腦組織中的表達(dá)26-27
• 2.3 PSGL-1 和Annexin A2在EV71組肺、腦組織中的表達(dá)比較27
• 2.4 TLR3 mRNA在肺、腦組織中的表達(dá)27-28
• 2.5 TLR8 mRNA在肺、腦組織中的表達(dá)28
• 2.6 TLR3在EV71組肺、腦組織中表達(dá)28
• 2.7 TLR8在EV71組肺、腦組織中表達(dá)28-29
• 2.8 IHC法與ISH法檢測(cè)陽(yáng)性表達(dá)得分比較29
• 2.9 IRAK-1 在肺、腦組織中的表達(dá)29-30
• 2.10 TRAF-6 在肺、腦組織中的表達(dá)30-31
• 2.11 NF-κB p65在肺、腦組織中的表達(dá)31-32
• 2.12 實(shí)驗(yàn)結(jié)果附圖32-37
• 3 討論37-44
• 4 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-56
• 綜述56-72
• 參考文獻(xiàn)65-72
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文72-73
• 致謝73

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 段艷平;陳秀珠;;病毒受體的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));1991年05期

2 徐如良;用單克隆抗體技術(shù)研究病毒受體的新進(jìn)展[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;1987年06期

3 湯華;任中原;;免疫球蛋白超家族的病毒受體[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1990年05期

4 屠紅;;淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒結(jié)合蛋白的鑒定:一種可能的細(xì)胞病毒受體[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1993年04期

5 李愛(ài)民,梁國(guó)棟;病毒受體研究進(jìn)展[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;1997年03期

6 郭進(jìn)軍,黃愛(ài)龍;病毒受體的研究方法進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊(cè);2004年03期

7 朱雷;金奇;;病毒受體的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1998年01期

8 薛小平;;分子生物學(xué)技術(shù)在病毒受體研究中的應(yīng)用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1998年06期

9 王艦,周正任;80.病毒受體[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;2001年03期

10 吳清明;;紅細(xì)胞麻疹病毒受體的分離及特性[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1981年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 李志杰;丁壯;高恩鵬;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒受體研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第三屆豬病防控學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

2 宋戰(zhàn)昀;韓文瑜;丁壯;;麻疹病毒細(xì)胞膜受體研究進(jìn)展[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

3 宋戰(zhàn)昀;韓文瑜;丁壯;;麻疹病毒細(xì)胞膜受體研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第六屆理事會(huì)第二次會(huì)議暨教學(xué)專業(yè)委員會(huì)第六屆代表大會(huì)論文集[C];2006年

4 馬明;劉月煥;陳明勇;韓春華;林健;;虎呼吸道和消化道上皮細(xì)胞表面流感病毒受體種類的測(cè)定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十四次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

5 安同慶;周艷君;賀云霞;田志軍;徐靈龍;仇華吉;王云峰;童光志;;豬繁殖與呼吸綜合征病毒受體結(jié)合域的初步鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2006年

6 馬明;劉月煥;陳明勇;韓春華;林健;;鴿呼吸道和消化道黏膜上皮細(xì)胞表面流感病毒受體類型的檢測(cè)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2009年

7 冉偉;孫藝學(xué);朱利塞;丁壯;叢彥龍;;豬H3N2亞型流感病毒受體親和性鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

8 宋戰(zhàn)昀;馮新;丁壯;韓文瑜;;NA-1和F_(48)E_9病毒受體在不同禽類組織水平的研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十四次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 記者　韓建清;SARS病毒受體找到了[N];人民日?qǐng)?bào);2006年

2 記者　 張景華 吳春燕;中國(guó)科學(xué)家首次證實(shí)人體存在SARS病毒受體[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

3 記者 吳月輝 趙永新;我科學(xué)家首次發(fā)現(xiàn)乙肝病毒受體[N];人民日?qǐng)?bào);2012年

4 通訊員　鄒瑩 張淼 記者　于莘明;我科學(xué)家首次證實(shí)人體存在SARS病毒受體[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 梅梅;J亞群禽白血病病毒受體的分離鑒定及研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

2 劉利兵;日本乙型腦炎病毒受體的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1994年

3 張淑琴;馬傳染性貧血病毒受體選擇剪接變異體的鑒定及功能性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 李斌;EV71病毒受體、Toll樣受體及其相關(guān)信號(hào)通路在EV71感染死亡病例中的影響及意義[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2016年

2 高順平;山羊痘病毒受體的篩選及受體結(jié)合蛋白初步研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

3 劉華蘭;牛β干擾素克隆、表達(dá)和雞傳染性支氣管炎病毒受體鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

4 張?jiān)i;趨化因子類病毒受體的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 楊旭艷;馬慢病毒受體1插入型選擇性剪接體的原核表達(dá)[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：982700