本文關(guān)鍵詞：hTERT啟動表達VacA基因的重組桿狀病毒載體的構(gòu)建

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【摘要】：目的構(gòu)建人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶啟動子(hTERT)調(diào)控的、攜帶幽門螺桿菌細胞空泡毒素A(Vacuolatingcytotoxin A,VacA)基因的選擇性表達重組桿狀病毒。方法應(yīng)用酶切、連接方法將hTERT連接于桿狀病毒穿梭質(zhì)粒pFastBac~(TM)DUAL載體P10啟動子序列之后,和SV40分別調(diào)控目的基因VacA的表達和終止;將重組穿梭質(zhì)粒電轉(zhuǎn)入DH10Bac~(TM)E.coli感受態(tài)細胞,經(jīng)轉(zhuǎn)座重組獲得重組桿粒Bacmid-VacA。利用脂質(zhì)體Cellfectin~汶將重組桿粒轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲細胞,包裝重組桿狀病毒。結(jié)果應(yīng)用PCR驗證、雙酶切分析、序列測定等方法驗證重組質(zhì)�；蚱芜B接正確無突變,通過轉(zhuǎn)座重組獲得攜帶有VacA基因片段的重組桿粒。結(jié)論攜帶VacA基因的選擇性復(fù)制重組桿粒成功構(gòu)建。
【作者單位】： 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 桿狀病毒 空泡毒素A 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶啟動子
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金項目(KB20161345) 江蘇省2014年度研究生課題(JGLX14_088)
【分類號】：R532.21
【正文快照】： 血吸蟲病是由于血吸蟲寄生于人體而引起的疾病,在我國主要流行于長江流域及其以南的省區(qū),目前主要治療方法是藥物治療。本課題組設(shè)想通過昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)將可使細胞空泡樣變性的細胞空泡毒素A(Vacuolatingcytotoxin A,Vac A)轉(zhuǎn)入血吸蟲體內(nèi),并在其中表達,最終破壞蟲體,達，

本文編號：954737