本文關(guān)鍵詞：熒光素酶報告基因標(biāo)記的HBV小鼠模型的建立

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【摘要】：建立螢火蟲熒光素酶(Fluc)為報告基因標(biāo)記的乙型肝炎病毒(HBV)小鼠模型。通過水動力轉(zhuǎn)染10μg質(zhì)粒pGL3-CP-Fluc-HBV1.2分別導(dǎo)入C57BL/6和BALB/c小鼠肝細胞內(nèi),定期取血檢測HBsAg和HBV-DNA水平,活體成像檢測Fluc在小鼠的表達。在BALB/c小鼠中,血清HBsAg表達水平在轉(zhuǎn)染后第1w內(nèi)迅速升高,隨后快速下降。而在C57BL/6小鼠中,HBsAg表達水平下降較緩慢。血清病毒滴度在轉(zhuǎn)染后第1d平均達到3.89×104copy/ml,在第4d和第7d達到最高,分別為1.61×105和1.31×105copy/ml,隨后開始下降,在轉(zhuǎn)染的第70d仍維持在103 copy/ml以上。免疫組化檢測C57BL/6小鼠肝臟HBcAg的表達,結(jié)果顯示在轉(zhuǎn)染后第3dHBcAg高水平表達,第135dHBcAg仍有表達,但表達水平降低�；铙w熒光成像實時檢測小鼠肝臟Fluc,結(jié)果表明兩組小鼠均能持續(xù)高水平表達Fluc,轉(zhuǎn)染后第7周Fluc的表達量仍然超過106 photon/s。我們建立的報告基因標(biāo)記的HBV小鼠模型能夠穩(wěn)定表達HBV標(biāo)志物和Fluc,為進一步進行HBV的疫苗評價提供了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國人民解放軍第一七五醫(yī)院廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院輸血科;
【關(guān)鍵詞】： 乙型病毒性肝炎 動物模型 水動力轉(zhuǎn)染 活體熒光成像
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81102223) 南軍軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金項目(12MA068;15MS105)
【分類號】：R-332;R512.62
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染嚴(yán)重影響人類的健康,它可引起急、慢性病毒性肝炎。急性感染后,有(5~10)%的成年人發(fā)展為持續(xù)感染,最終可以導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化和肝癌[1-2]。目前全球約有3.5億乙型肝炎病毒慢性感染者[3],迄今為止,還無有效的藥物能夠完全治愈乙肝患，

本文編號：893942