本文關(guān)鍵詞：NK細(xì)胞Siglec-7表達(dá)與慢性HBV感染的相關(guān)性研究

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【摘要】：背景:Siglecs(唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素)是一群主要表達(dá)于免疫細(xì)胞的跨膜蛋白,通常認(rèn)為Siglecs能結(jié)合多糖配體負(fù)性調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。Siglec-7(唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素7)是CD33相關(guān)的Siglecs的一員,主要表達(dá)于自然殺傷(NK)細(xì)胞和單核細(xì)胞。Siglec-7通過與含唾液酸的多糖配體結(jié)合,能夠抑制NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性。但是,Siglec-7表達(dá)與NK細(xì)胞活性的精確關(guān)系仍然不確定。有研究發(fā)現(xiàn)在HIV感染中下調(diào)的Siglec-7表達(dá)反映了NK細(xì)胞功能的異常,且與HIV病毒載量相關(guān)。但在慢性HBV中,NK細(xì)胞上Siglec-7表達(dá)的情況尚未被報道。目的:明確Siglec-7表達(dá)與NK細(xì)胞功能的關(guān)系;并探索NK細(xì)胞Siglec-7表達(dá)與慢性HBV感染的關(guān)系。原料和方法:(1)實驗標(biāo)本:正常人及慢性HBV感染患者外周血。(2)通過聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度離心法獲得外周血單個核細(xì)胞。(3)通過流式細(xì)胞術(shù),檢測細(xì)胞表面受體及細(xì)胞因子的表達(dá)。(4)通過CD107a脫顆粒試驗和IFN-γ釋放試驗探索不同NK細(xì)胞亞群的功能。(5)通過與具有刺激性的特異性抗體共孵育,探索Siglec-7與相應(yīng)配體結(jié)合對NK細(xì)胞功能的影響。(6)根據(jù)臨床資料,慢性HBV感染患者可以分為四期,通過流式細(xì)胞術(shù),檢測慢性HBV感染患者四個時期的外周血NK上Siglec-7的表達(dá)。(7)統(tǒng)計學(xué)分析:實驗數(shù)據(jù)采用Graph Pad Prism 5軟件進(jìn)行分析,正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用t檢驗,非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用非參數(shù)檢驗,p0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:(1)在正常人外周血中,Siglec-7在NK細(xì)胞上高度表達(dá)(82.6±10.82%),且與不成熟的NK細(xì)胞相比,成熟的NK細(xì)胞表達(dá)更高水平的Siglec-7;與Siglec-7-NK細(xì)胞相比,Siglec-7+NK細(xì)胞表達(dá)較高水平的活化性受體CD16(p=0.0349)、CD38(p=0.0123)、DNAM1(p=0.0024)、NKp30(p=0.0122)及NKp46(p=0.0186),表達(dá)較低水平的抑制性受體NKG2A(p=0.024)與CD158b(p=0.0315)。(2)在正常人外周血中,與Siglec-7-NK細(xì)胞相比,Siglec-7+NK細(xì)胞有更強的CD107a脫顆粒功能和IFN-γ釋放能力。(3)與具有刺激性的特異性抗體共孵育,Siglec-7抑制了NK細(xì)胞的CD107a表達(dá)和IFN-γ釋放(p值分別為0.0004、0.0125)。(4)與正常人(82.6±10.82%)相比,慢性HBV感染患者外周血NK細(xì)胞上Siglec-7表達(dá)(64.94±11.86%)明顯降低(p0.01)。在慢性HBV感染的四個不同時期中,免疫耐受期NK細(xì)胞上Siglec-7表達(dá)(58.4±13.84%)明顯低于免疫清除期(66.88±13.72%,p0.01)、非復(fù)制期(65.21±17.21%,p0.05)、再活動期(75.03±17.48%,p0.01)。(5)在慢性HBV感染患者外周血中,與Siglec-7-NK細(xì)胞相比,Siglec-7+NK細(xì)胞具有更高的CD107a表達(dá)水平及IFN-γ釋放水平(p值分別為0.0028、0.0103)。結(jié)論:(1)在正常人外周血中,Siglec-7在NK細(xì)胞上高度表達(dá)且在成熟的NK細(xì)胞上優(yōu)勢表達(dá)。(2)Siglec-7+NK細(xì)胞比Siglec-7-NK細(xì)胞有更強的細(xì)胞毒性及細(xì)胞因子釋放能力。(3)Siglec-7與相應(yīng)配體作用能抑制自然殺傷細(xì)胞的功能。(4)慢性HBV感染患者外周血NK細(xì)胞上Siglec-7表達(dá)下降,尤其在免疫耐受期更為明顯,反映了NK細(xì)胞功能異常。
【關(guān)鍵詞】：唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素7 自然殺傷細(xì)胞 慢性HBV感染 CD107a干擾素-γ
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R512.62
【目錄】：

• 符號說明4-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 第一部分 Sigelc-7 表達(dá)與NK細(xì)胞功能的研究16-32
• 1 材料和方法16-20
• 1.1 實驗材料16
• 1.2 實驗試劑及儀器16-17
• 1.3 實驗方法17-20
• 2 實驗結(jié)果20-29
• 3 討論29-31
• 4 小結(jié)31-32
• 第二部分 NK細(xì)胞Siglec-7 表達(dá)在慢性HBV感染中的研究32-40
• 1 材料和方法32-35
• 1.1 實驗材料32-33
• 1.2 主要試劑與儀器33
• 1.3 實驗方法33-35
• 2 結(jié)果35-37
• 3 討論37-38
• 4 小結(jié)38-40
• 全文總結(jié)40-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 文獻(xiàn)綜述44-54
• 參考文獻(xiàn)49-54
• 致謝54-55
• 攻讀碩士期間發(fā)表的文章目錄55

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 邵建營;NK細(xì)胞Siglec-7表達(dá)與慢性HBV感染的相關(guān)性研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號：889791